Адаптация коробки: Страница не найдена — АКПП

Содержание

Страница не найдена — АКПП

Масло для АКПП

Здравствуйте, дорогие читатели! Сегодня я расскажу о том, откуда появилось и каковы преимущества трансмиссионного

Масло для АКПП

Сегодня речь пойдет о замене масла в АКПП транспортного средства Санг Енг Актион. Эти

Ремонт и обслуживание АКПП

Сегодня мы рассмотрим АКПП 6F35, ее особенности обслуживания и ремонт, так как любая автоматическая

Определение типа АКПП

Квалифицированному специалисту по силовым агрегатам не составит труда определить тип АКПП, однако, бывают ситуации,

Ремонт и обслуживание АКПП

Экспертами автомобильной компании Ford 1998-м году была разработана АКПП 4f27e, которая применяется в переднеприводных

Масло для АКПП

Aisin ATF AFW – трансмиссионная жидкость, которая была создана компанией Aisin Ceiki CO, LTD.

Страница не найдена — АКПП

Масло для АКПП

Здравствуйте, дорогие читатели! Сегодня поговорим о замене масла в АКПП транспортного средства Рав 4.

Все про автоматическую коробку передач

Профилактический, текущий или капитальный ремонт АКПП — дело технически сложное и затратное. Лезть внутрь

Масло для АКПП

Здравствуйте, дорогие читатели! Сегодня я расскажу вам о масла для трансмиссии, которое пришло к

Определение типа АКПП

Квалифицированному специалисту по силовым агрегатам не составит труда определить тип АКПП, однако, бывают ситуации,

Ремонт и обслуживание АКПП

Сегодня мы рассмотрим АКПП 6F35, ее особенности обслуживания и ремонт, так как любая автоматическая

Все про автоматическую коробку передач

Автомат или механика — что лучше выбрать, покупая автомобиль? Обсуждение этой темы продолжается с

Адаптация АКПП и сброс адаптации

Для большинства современных автоматических коробок передач, после их капитального ремонта, необходима помощь специалиста «акппшника-реаниматолога» для возврата к нормальной жизни внутри слаженного организма автомобиля. Нынче уже недостаточно просто перебрать АКПП, но необходимо «привязать» её к блокам управления и двигателю (у более современных автомобилей также к ключу зажигания и системам безопасности автомобиля), а также заново обучить её «ходить».
Сброс адаптационных функций АКПП необходим даже для «самообучающихся» само адаптивных автоматов, для дальнейшей их правильной адаптации. Многие считают данное утверждение «страшилкой», но это суровая правда в области обслуживания и ремонта АКПП. Без возврата к заводским установкам, новые данные поступающие в электронный блок управления, будут ложиться не на ровный «фундамент» данных, вызывая неприятные переключения передач автомата, как минимум продолжительное время, а может и на постоянной основе.
Сброс адаптаций АКПП для разных автомобилей производится различными способами (чаще известными только узкому кругу специалистов), так же, как и адаптация автомата. Существует множество способов, как с участием автомобильного сканера, для данной марки автомобиля, также и механическая адаптация, при помощи набора разных «шаманских» действий, с ключом зажигания, педальным узлом, селектором передач, и правильной обкаткой.
Порой «строптивые» автомобили проходят процесс адаптации АКПП достаточно долго, и поверьте, не для глаз и нервов владельца транспортного средства. В наших технических центрах мастера с многолетним опытом, указывая на необходимость адаптации автоматической коробки передач, не пытаются вам навязать услугу, тем более что она входит в стоимость работ по ремонту АКПП, а стараются вам быстрее вернуть друга, прошедшего «пересадку органов», и пройти этот путь «возврата к жизни» вам самим, в надежде только на самоадаптацию АКПП, не рекомендуется.
Так же не рекомендован самостоятельный «ремонт АКПП» путём прохождения сброса адаптаций, и возврата к заводским настройкам, так как ваша автоматическая коробка передач адаптируется к общему износу и увеличениям зазоров, к изменению давления и прочим проявлениям старения автомата, и «эликсир молодости» в виде сброса адаптационных функций, скорее в последствии навредит работе АКПП, поэтому лучше доверить процесс восстановления работоспособности вашей автоматической коробки передач профессионалам, которые вам смогут дать гарантии.
В разделах, посвящённых отдельным маркам автомобилей, и конкретным маркам автоматов, мы будем обязательно предупреждать о необходимости сброса адаптаций и адаптации АКПП (не раскрывая, уж простите тонкостей прохождения данной операции), для понимания владельцем тонкостей ремонта его любимца, и возможных небольших задержек по времени ремонта, которых мы естественно стараемся допускать как можно меньше.

Адаптация АКПП (коробки передач) в Самаре: цена 500 руб -Сервис

   Адаптация АКПП после замены масла или сцепления в Самаре за 1 час 

Автоматическая адаптация облегчает процесс управления авто и делает его более комфортным. За рулем такой машины сложно заметить рывки, толчки, пинки и прочие неприятные моменты, связанные с работой автоматической трансмиссии. Коробка способна считывать действия водителя, адаптироваться под его манеру вождения. Когда появляются все перечисленные явления, не всегда дело обстоит с неисправным «железом», иногда к этому приводят проблемы с электронным управлением гидроавтомата.

Адаптация коробки передач после замены масла

Со всем этим можно столкнуться, если осуществить замену масла в коробке передач, поменять фильтры, но не выполнить адаптацию. Подобное техническое мероприятие можно выполнить только при наличии специального диагностического сканера. Для автомобилей Renault, Citroen это оригинальный дилерский прибор, позволяющий сбросить память блока управления АКПП. В нем заложена специальная программа, которая позволяет очистить память ЭБУ до заводских значений, одновременно стирая все коррекции, появившиеся непосредственно в результате эксплуатации автомобиля.

Обслуживание автомобилей.

     

Адаптация после замены сцепления

После капитального ремонта и замены сцепления на авто нужна будет адаптация трансмиссии. Такую услугу предоставляет наша мастерская в городе Самара. Специалисты готовы осуществить замену неисправного комплекта сцепления, после чего выполнить адаптацию агрегата. Если этого не сделать, ездить за рулем машины будет некомфортно. Как правило, работа не занимает слишком много свободного времени автовладельца. Профессионалы быстро и качественно адаптируют трансмиссию, а водитель получает полностью исправный и приятный в управлении автомобиль.

Адаптация трансмиссии после другого хозяина

Поскольку коробка способна адаптироваться под стиль вождения водителя, с покупкой авто на вторичном рынке можно столкнуться с некоторыми неприятностями. Автомобиль будет непослушным, неудобным в управлении, так как ваша манера управления машиной может серьезно отличаться от манеры вождения предыдущего хозяина. Что делать в такой ситуации? Очевидно, что необходимо сбросить память ЭБУ при помощи дилерского оборудования.

Как выполнить адаптацию своими руками

В работе по адаптации коробки передач профессионалы придерживаются следующего порядка действий:

    1. В первую очередь двигатель прогревается до рабочей температуры.
    2. Мотор глушат, выжидают 10 секунд и вновь заводят.
    3. Теперь необходимо, чтобы силовой агрегат вышел на 2-2.5 тыс. оборотов в минуту.
    4. Снова заглушите, выждите и заведите двигатель.
    5. Включите каждую передачу, удерживая педаль тормоза.
    6. Подключите дилерский прибор.
    7. Начните движение за рулем авто.
    8. Плавно наберите скорость (до 40 км/ч), остановитесь и заглушите двигатель.
    9. Заводим, также плавно набираем до 80 км/ч.
    10. Снова останавливаемся и глушим мотор.
    11. Дальше заводим и начинаем движение по прямому участку с разной скоростью (до 80 км/ч) в течение 20-30 минут.
    12. Смотрим, не начало ли протекать трансмиссионное масло.
    13. Дальше без нагрузки на двигатель нужно проехать 10-15 км.
    14. Убеждаемся, что масло не течет через сальники, если течь есть, вытираем и доливаем недостающее количество по уровню.

Еще эта коробка оснащена счетчиком старения масла. Его значение постоянно увеличивается, поэтому после замены технической жидкости его следует сбросить. Не сделав этого, сложно добиться положительного результата в плане комфорта управления от машины. Но для этого потребуется работа с компьютером и дилерским сканером. Специалисты уменьшают значение счетчика, после чего трансмиссия начинает работать с новым трансмиссионным маслом гораздо лучше.

 

Перечень услуг ЦЕНА руб
Диагностика  БЕСПЛАТНО
Адаптация АКПП, РКПП, вариатора от 500руб

 

 

Адаптация АКПП в Москве по низкой цене на Дубровке (ЮВАО)

Автолюбители, выбравшие автоматическую коробку переключения передач, знакомы с тем, что существует адаптивная и обычная АКПП. На сегодняшний день практически все производители автомобилей устанавливают на выпускаемые машины именно адаптивные автоматы. Напичканные электроникой монстры прислушиваются к действиям хозяина и подстраивают режим работы коробки под конкретного человека и дорожную ситуацию.

Откалиброванный автомат выполняет свои обязанности чётко и без заскоков. Однако, случается такое, что автомат начинает «тупить». Машина едет не так, как того хочет водитель. В таком случае необходима повторная адаптация АКПП.

Как происходит адаптация коробки переключения передач

Современные АКПП постоянно отслеживают режим разгона-торможения для подбора наиболее эффективных оборотов и моментов для переключения передач. Основными режимами работы считаются «трасса» и «пробки». Например, адаптация АКПП в Москве и другом городе с большим количеством трафика будет проходить в условиях пробок. В этом режиме разгон будет происходить медленнее, с плавным переключением передач.

В режиме трассы, когда движение машины происходит плавно, без резких изменений, электронный мозг автомобиля выбирает наиболее высокую передачу для максимальной экономии топлива.

Различаются не только режимы работы, но и алгоритмы обучения коробок. Какие-то учатся постоянно, подстраиваясь под необходимый в конкретный момент стиль.

Другие – запоминают алгоритмы действия водителя на большом отрезке времени — 100, 300, 500 и более, километров. Переучивание подобного автомата может стать большой проблемой.

В каких случаях требуется повторная адаптация АКПП

Принудительная адаптация коробки «под себя» возможна в ускоренном режиме. Проводить её необходимо в следующих случаях:

  • Автомобиль куплен «с рук» и стиль вождения предыдущего водителя разительно отличается от вашего;
  • Машина перестала слушаться, но диагностика у дилера не выявила механических дефектов;
  • Произошёл сброс настроек после ремонта коробки.

Иногда проще подождать и отъездить на машине сотню-другую километров, и дать коробке провести настройку самой. Но если время не терпит, то можно отдать машину в автосервис и попросить мастера адаптировать коробку передач. Либо идти на форумы автолюбителей и искать примеры сброса адаптации своего конкретного автомобиля и автомата. А также в нашем автосервисе вы можете заказать адаптацию коробок по выгодной цене.

 

Адаптация АКПП во Владимире — от Ремонт коробок передач «DSG Service» во Владимире на СКИДКОМ.РФ

Адаптация автоматической коробки передач во Владимире

Автосервис «DSGservice33» успешно работает во Владимире в области ремонта автоматических коробок передач, а также технического обслуживания автомобилей. У нас вы можете заказать адаптацию автоматической коробки передач недорого во Владимире.

 

Наша компания совсем молодая, но на данный момент прочно удерживает лидирующие позиции среди автосервисов города и области, занимающихся диагностикой и ремонтом автоматических коробок передач. Этого удалось достичь благодаря высокому профессионализму сотрудников и современному оснащению технического центра.

 

 

Адаптация автоматической коробки передач

 

Автосервис DSGservice33  проводит адаптацию автоматических коробок передач во Владимире, адаптацию робота во Владимире, а также можете заказать адаптацию вариатора вашего авто во Владимире.

Адаптивные коробки автомат способны обучаться под конкретный стиль вождения, в то время как обычные коробки работают исключительно по запрограммированному алгоритму. Удивительно, но купив машину с адаптивным автоматом, любой автомобилист может обучить устройство «под себя», просто проведя его адаптацию — стиль езды, динамику разгона, манеру торможения.
 

 

 

Услуги автосервиса:

Автосервис DSGservice33 располагает просторными складскими помещениями, совокупная площадь которых позволяет иметь необходимые комплектующие для оперативного и качественного ремонта транспортных средств. У нас вы можете заказать:

 

 

 

«DSG Service33» всегда придет на помощь! Звоните — +7 (4922) 600-035, +7 (920) 920-22-25

 

Адаптация АКПП в Москве +7(495)545-73-77 Дима

Современные автоматические коробки передач существенно отличаются от «предшественниц», работающих на гидромеханическом приводе. Если раньше производитель делал упор на длительный срок службы агрегата, теперь акцент ставится на умении АКПП подстраиваться под стиль вождения водителя. Адаптация коробки – это не что иное, как возможность коробки передач пройти специализированное «обучение» в Москве. Проводимая в нашей компании, она позволяет подстроиться не только под манеру разгона, но и под режим движения, ускорения, торможения автомобиля.


Когда требуется сброс адаптация АКПП Москва и ее настройка?


Существует ряд ситуаций, требующих проведения этой профессиональной технической процедуры. К ним относятся:


• начало эксплуатации нулевого автомобиля;
• покупка транспортного средства с пробегом;
• некорректная работа блоков управления;
• необходимость настройки АКПП после ее ремонта или замены;
• смена режимов езды (в частности, переход с зимнего на летний режим вождения).


После адаптации АКПП Москва подстраивается под новые условия, обеспечивая плавное переключение передач автоматической коробки. В ряде случаев проведение технического мероприятия способствует временному устранению механических изъянов трансмиссии автомобиля.


Стоимость адаптация АКПП и Долгопрудный автомобиля


Цена услуг нашей компании носит индивидуальный характер. При ее расчете принимается во внимание специфика транспортного средства клиента. Тех, кого интересуют базовые расценки на проведение технических работ, просим обращаться с этим вопросам к менеджерам сервисного центра по телефону. Что касается итоговой стоимости адаптации АКПП после замены, то она будет озвучена автовладельцу непосредственно перед проведением планового технического мероприятия.

Адаптация АКПП Москва – как выполняется?


Чтобы ускорить процесс адаптации автоматической коробки передач, настройки подсистемы сбрасываются до заводских установок. Далее, производится:

  • анализ информации о движении и остановках авто, выполняются расчеты;
  • определение оптимальных параметров работы ДВС при смене ступеней;
  • сохранение настроек, обеспечивающих комфорт управления автомобилем в привычных режимах.


Для проведения адаптации АКПП используется специализированное оборудование и ПО. Конечные результаты работы является отражением желаний клиента о качестве езды его автомобиля.

Мета-обучение на основе оптимизации. Эта история касается адаптации к черному ящику… | Qiurui Chen

— общий рецепт разработки алгоритма метаобучения. Источник: слайд курса.

Как упоминалось ранее, если мы хотим вывести все параметры нейронной сети, наличие вывода нейронной сети не является очень масштабируемым способом. Вместо того, чтобы рассматривать функцию (показанную на первом шаге на левом рисунке) как проблему вывода, мы можем рассматривать ее как процедуру оптимизации. Вот тут и приходит на помощь вывод, основанный на оптимизации.

Ключевая идея — получить наши параметры ϕi для конкретной задачи посредством оптимизации . И затем мы будем дифференцировать эту процедуру оптимизации до мета-параметров, чтобы оптимизировать набор мета-параметров, так что процедура оптимизации для ϕi приводит к хорошей производительности.

, разбивающий проблему метаобучения на 2 термина. Источник: слайд курса.

Вы можете по существу разбить задачу мета-обучения на 2 условия, один из них максимизирует вероятность ваших обучающих данных с учетом ваших параметров, специфичных для вашей задачи, а другой оптимизирует вероятность ваших параметров, специфичных для вашей задачи, в ваших мета-параметрах .

тонкая настройка. Источник: курс, слайд.

Ваши мета-параметры служат вашими предыдущими , , какую форму приора мы должны в основном наложить с помощью мета-параметров. Одна очень успешная форма предварительных знаний, которую мы использовали при оптимизации глубокого обучения, — это инициализация . Одна вещь довольно успешная, называется тонкой настройки, , где мы берем некоторый набор начальных параметров, а затем запускаем градиентный спуск на обучающих данных для некоторой новой задачи .Как правило, это не только для одного шага градиента, как показано здесь, но для многих шагов градиента.

Во многих отношениях это действительный подход к проблеме метаобучения, когда вы сначала предварительно обучаете набор параметров в наборе данных метаобучения, а затем настраиваете свой набор данных во время тестирования. А вот где взять свои предтренировочные параметры ? Для проблем со зрением, типичный способ сделать это — пройти предварительное обучение по классификации ImageNet как контролируемое обучение. В языке очень популярным подходом для этого является использование моделей, обученных на большом языковом корпусе, моделей , таких как BERT или Language Models . Или мы могли бы получить параметры предварительной тренировки с помощью других методов обучения без учителя. Вы можете обучить большой и разнообразный набор данных, а затем точно настроить эти параметры для любого набора данных, для которого вы действительно хотите выполнить логический вывод.

Тонкая настройка очень распространена, поэтому существует ряд общих практик для успешного выполнения точной настройки.Это включает в себя такие вещи, как точная настройка с меньшей скоростью обучения, с использованием более низкой скорости обучения для нижних уровней сети. Обычно для многих проблем тонкой настройки, низкоуровневые функции — это то, что нужно менять меньше всего, а высокоуровневые концепции — это то, что нужно изменить больше всего для новой задачи. Вы можете фактически заморозить более ранние уровни сети. Возможно даже установка нулевой скорости обучения для этих слоев.Вы также можете рассмотреть возможность повторной инициализации последнего слоя . И затем обычно люди ищут по этим гиперпараметрам, используя перекрестную проверку . Выбор архитектуры имеет большое значение при выборе способа точной настройки. Например, такие вещи, как остаточная сеть , как правило, довольно хорошо подходят для точной настройки, потому что градиент относительно легко проходит через различные части сети, когда у вас есть остаточные соединения.

Тонкая настройка менее эффективна для очень маленьких наборов данных. Источник: слайд курса.

Тонкая настройка менее эффективна для очень небольшого набора данных. В этом документе показано, как количество обучающих примеров для тестовой задачи меняется (по оси x), как меняется производительность в этой задаче? Синяя линия обозначает обучение с нуля, а оранжевые и зеленые линии обучаются с предварительно обученными параметрами из универсальных языковых моделей или ULM. Разрыв между синей линией и оранжево-зелеными линиями указывает на то, что существует большая разница между обучением с нуля и использованием предварительно обученных параметров. Кроме того, , поскольку у вас меньше примеров в вашем новом наборе тестовых данных, производительность ухудшается , поскольку наша ошибка увеличивается.

Вывод на основе оптимизации. Источник: слайд курса.

Как насчет того, чтобы разработать алгоритм метаобучения с целью точной настройки с небольшими объемами данных во время тестирования? В частности, мы могли бы взять нашу процедуру тонкой настройки и оценить, насколько хорошо эти параметры для конкретной задачи работали на тестовом наборе данных или на новых точках данных, а затем оптимизировать для предварительно обученных параметров, так что точная настройка дает набор параметров которые преуспевают в тестовых точках .Вы можете выполнить эту оптимизацию для всех задач в вашем наборе данных мета-обучения, чтобы точная настройка с небольшими объемами данных приводила к хорошему обобщению. Итак, по сути, будет обучать набор параметров тета для множества различных задач, так что он может эффективно передаваться через тонкую настройку .

Источник: слайд курса.

На более интуитивном уровне θ — это мета-параметры, а ϕi * — это оптимальный вектор параметров для задачи i. Затем вы можете рассматривать процесс мета-обучения этой оптимизации как толстую черную линию, где, когда вы находитесь в этой точке во время процесса мета-обучения и делаете шаг градиента по отношению к задаче 3, вы довольно далеки от оптимума. для задачи 3. В то время как в конце процесса мета-обучения вы берете градиент по отношению к задаче 3, вы довольно близки к оптимуму. А также для ряда других задач. Мы называем это алгоритмом метаобучения , не зависящим от модели, в том смысле, что он внедряет эту процедуру оптимизации таким образом, который не зависит от используемой модели и используемой функции потерь, если оба они поддаются оптимизации на основе градиента .Эта диаграмма интуитивно понятна, но также вводит в заблуждение. Во-первых, обычно параметры нейронной сети не существуют в двух измерениях. Кроме того, зачастую не существует единого оптимума, а фактически существует целое пространство оптимумов для параметров нейронной сети.

вывод на основе оптимизации. Источник: слайд курса.

Давайте рассмотрим алгоритм. Сначала мы берем алгоритм для подхода черного ящика, а затем адаптируем его к метаобучению на основе оптимизации. По сути, вы сначала пробуете задачу, вы можете пробовать свои наборы данных.Затем вместо вычисления параметров вашей задачи с помощью нейронной сети вы будете вычислять их, используя один или несколько шагов тонкой настройки. А затем вы обновляете свои мета-параметры, дифференцируя эти шаги тонкой настройки с исходным набором параметров.

Об этом алгоритме стоит упомянуть то, что вызывает производную второго порядка , потому что мы оптимизируем для набора мета-параметров. Существует градиент, косвенно вычисляющий тета, и внутри индуктивного члена ϕi мы также имеем градиент, который необходимо вычислить.Было бы сложно вычислить полный гессиан нейронной сети. Что, если вам нужно более одного интегрированного шага, дает ли это нам производные более высокого порядка? Чтобы ответить на эти вопросы, нам нужно посмотреть, как выглядит обновление мета-градиента.

Источник: слайд курса

Здесь u обозначает правило обновления, и это будет функцией theta и вашей тренировочной точки D train. `d` обозначает полные производные, символ набла обозначает частные производные. Результат показывает, что нам не нужно вычислять полный гессиан нейронной сети вместо векторного произведения Гессе. И есть гораздо более эффективные способы вычисления векторных произведений Гессе с помощью обратного распространения ошибок для нейронных сетей, и это не требует от вас построения всего Гессе нейронной сети. Это единственный шаг внутреннего цикла. Что, если у нас есть несколько шагов внутреннего градиента во внутреннем цикле?

Источник: слайд курса

Что делать, если у нас есть 2 ступени градиента. Приятно то, что у нас нет показа высокопоставленных терминов. В основном вычисления с дополнительными обратными проходами без необходимости в основном строить какие-либо полные гессианы или без необходимости вычислять производные более высокого порядка, что хорошо.

Адаптация. — Box Office Mojo

— -22,3% 149 — $ ,195 ложь $ 9052 12146 ложь 9095 ,26 ложный % 400 ложный % 146 146 % — $ 2274
Дата DOW Рейтинг Daily % ± ярд % ± LW Театры Ср. На сегодняшний день День Приблизительно
6 декабря 2002 г. пятница 17 123,305 $ 7 $ 17,615 $ 123,305 1 ложь 17 149 476 долл. США +21.2% 7 21 353 $ 272 781 $ 2 ложный
8 декабря 2002 г. 15 956 долл. США 384 478 долл. США 3 ложь
9 декабря 2002 г. понедельник 16 51 522 долл. США -53,9%
10 декабря 2002 г. вторник 16 52 956 долл. США +2.8% 7 7,565 долларов США 488 956 долларов США 5 ложные
11 декабря 2002 г. 6,710 $ $ 535,927 6 ложный
12 декабря 2002 г. четверг 16 44,944 долл. США -4,3% ложный
13 декабря 2002 г. пятница 17 $ 74 700 +66.2% -39,4% 7 10 671 долл. США 655 571 долл. США 8 ложный
14 декабря 2002 г. 7 $ 16,273 $ 769,487 9 ложный
15 декабря 2002 г. воскресенье 17 $ 88,568 $ % -22,3% 10 ложный
16 декабря 2002 г. понедельник 18 $ 35,785 -59.6% -30,5% 7 5,112 долл. США 893,840 долл. США 11 ложный
17 декабря 2002 г. 7 $ 5,528 $ 932,542 12 ложный
18 декабря 2002 г. среда 18 $ 33,847 % -12,5% 13 ложный
19 декабря 2002 г. четверг 18 32,055 $ -5.3% -28,7% 7 4579 долл. США 998 444 долл. США 14 ложные
20 декабря 2002 г. 109 $ 2,745 $ 1,297,661 15 ложный
21 декабря 2002 г. суббота 15 $ 456,700 $ % 16 ложный
22 декабря 2002 г. воскресенье 15 $ 352,115 -22.9% + 297,6% 109 3,230 $ $ 2,106,476 17 ложный
23 декабря 2002 г. 109 $ 1,766 $ 2,298,984 18 ложный
24 декабря 2002 г. вторник 14 $ 201,804 % 1,8% 19 ложный
25 декабря 2002 г.

Рождество

среда 17 $ 259 807 +28.7% + 667,6% 109 $ 2,383 $ 2,760,595 20 ложный
26 декабря 2002 г. 109 $ 2,573 $ 3,041,109 21 ложный
27 декабря 2002 г. пятница 19 $ 305 379 $ %
22 ложный
28 декабря 2002 г. суббота 19 $ 400,190 + 31% -12.5% $ 4,074,984 24 ложный
30 декабря 2002 г. понедельник 18 $ 237,470 -27,7% $ + 23,4% 9014,454
31 декабря 2002 г.

Канун Нового года

Вторник 18 $ 239,101 +0.7% + 18,5% 109 2193 долл. США 4551555 долл. США 26 ложь
1 января 2003 г.

Новый год

78146 186 186 + 64% 109 $ 3,909 $ 4,977,717 27 ложный
2 января 2003 г. $ 2 006 $ 5 196 444 28 ложный
3 января 2003 г. пятница 17 $ 261 314 +19.5% -14,4% 109 2397 долларов 5 457 758 долларов 29 ложные
4 января 2003 г. 109 $ 3,661 $ 5,856,876 30 ложный
5 января 2003 г. воскресенье 16 $ 243,495 $ -39% 9014,196 -39% 9014,196 31 ложный
6 января 2003 г. понедельник 16 97 547 долл. США -59.9% -58.9% 109 894 долларов 6 197 918 долларов 32 ложный
7 января 2003 г. 109 $ 1,083 $ 6,316,025 33 ложный
8 января 2003 г. среда 16 $ 117,059 $ 6,316,059 $ % -0,9% 9014,46 109145 -0,9% 9014,46 109145 -0,9% 34 ложный
9 января 2003 г. четверг 16 $ 116 993 -46.5% 109 $ 1,073 $ 6,550,077 35 ложный
10 января 2003 г. $ 7,354,585 36 ложный
11 января 2003 г. суббота 12 $ 1,169,005 + 45,3% + 192,9% 46 ложь
12 января 2003 г. воскресенье 14 $ 663,411 -43.3% 560 $ 373 $ 9 396 235 39 ложный
14 января 2003 г. вторник 12 $ 239 110 $ 40 ложный
15 января 2003 г. среда 12 $ 212,136 -11.3% + 81,2% 560 378 долл. США 9 847 481 долл. США 41 ложный
16 января 2003 г. четверг 12 146 906,051 560 $ 371 $ 10,055,532 42 ложный
17 января 2003 г. пятница 17 $ 496 855 % 43 ложный
18 января 2003 г. суббота 17 $ 831 269 +67.3% -28,9% 564 1,473 $ 11,383,656 $ 44 ложный
19 января 2003 г. 564 $ 881 $ 11,880,773 45 ложный
20 января 2003 г.

MLK Day

понедельник 18 $ 426,393 % +8% 564 756 долл. США 12 307 166 долл. США 46 ложное
21 января 2003 г. вторник 15 долл. США $ 12,501,023 47 ложный
22 января 2003 г. среда 14 $ 166,123 -14,3% -21,7% 564 $
23 января 2003 г. четверг 15 $ 178 611 +7.5% -14,2% 564 $ 316 $ 12 845 757 49 ложный
24 января 2003 г. 564 $ 765 $ 13 277 672 50 ложный
25 января 2003 г. Суббота 19 $ 717 530 $ % 66146 51 ложный
26 января 2003 г. воскресенье 16 $ 256 945 -64.2% -48,3% 564 455 долл. США 14 252 147 долл. США 52 ложный
27 января 2003 г. понедельник 18 564 $ 197 $ 14 363 537 53 ложный
28 января 2003 г. вторник 18 $ 126 685 $ %
% 54 ложный
29 января 2003 г. среда 18 $ 121 799 -3.9% -26,7% 564 215 $ 14 612 021 $ 55 ложный
30 января 2003 г. 564 $ 227 $ 14,740,257 56 ложный
31 января 2003 г. пятница 19 $ 310,194 % 141.9144-58 57 ложный
1 фев.2003 г. суббота 20 531,174 $ +71.2% -26% 528 $ 1,006 $ 15,581,625 58 ложный
2 февраля 2003 г. 528 $ 559 $ 15 877 024 59 ложный
3 февраля 2003 г. Понедельник 19 75 400 $ -74,5% 9014,46 -74,5% 9014,46 -9014 60 ложный
4 февраля 2003 г. вторник 17 $ 91 612 +21.5% -27,7% 528 $ 173 $ 16044036 61 ложный
5 февраля 2003 г. 528 $ 159 $ 16,128,203 62 ложный
6 февраля 2003 г. четверг 17 $ 88,463 $ % 63 ложный
7 февраля 2003 г. пятница 20 $ 199 062 + 125% -35.8% 415 479 долларов 16 415 728 долларов 64 ложные
8 февраля 2003 г. $ 16,763,925 65 ложь
9 февраля 2003 г. воскресенье 20 $ 204,019 -41,4% -30,9%
10 февраля 2003 г. понедельник 20 50 827 долл. США -75.1% -32,6% 415 $ 122 $ 17,018,771 67 ложный
11 февраля 2003 г. вторник 19 $ 72,174 415 $ 173 $ 170 68 ложный
12 февраля 2003 г. среда 18 $ 81 899 $ % 9014,16 69 ложный
13 февраля 2003 г. четверг 18 $ 77 508 -5.4% -12,4% 415 $ 186 $ 17 250 352 70 ложный
14 февраля 2003 г. 672 $ 449 $ 17,552,276 71 ложный
15 февраля 2003 г. суббота 19 $ 494,918 $ % 6714146 72 ложный
16 февраля 2003 г. воскресенье 19 333 638 долл. США -32.6% + 63,5% 672 $ 496 $ 18 380 832 73 ложный
17 февраля 2003 г.

День президентов

понедельник 1945 + 256% 672 269 долларов 18 561 778 долларов 74 ложные
18 февраля 2003 г.8% 672 $ 155 $ 18666295 75 ложный
19 февраля 2003 г. $ 18,756,442 76 ложный
20 февраля 2003 г. четверг 19 $ 95,873 + 6,4% $ 9015 672 ложь
21 февраля 2003 г. пятница 22 $ 157,866 +64.7% -47,7% 390 $ 404 $ 19010,181 78 ложный
22 февраля 2003 г. 390 $ 669 $ 19 271 146 79 ложный
23 февраля 2003 г. Воскресенье 22 $ 156 252 $ -4014,1% -4014,1% 80 ложный
24 февраля 2003 г. понедельник 21 43366 долл. США -72.2% -76% 390 $ 111 $ 19 470 764 81 ложный
25 февраля 2003 г. 390 $ 126 $ 19 519 936 82 ложный
26 февраля 2003 г. среда 20 $ 49 109 % 9014,56 % 9014,56 % 9014,56 83 ложный
27 февраля 2003 г. четверг 20 $ 49 547 +0.9% -48,3% 390 $ 127 $ 19 618 592 84 ложный
28 февраля 2003 г. 300 $ 422 $ 19,745,343 85 ложный
1 марта 2003 г. суббота 22 $ 228,429 $ % 801461 % 86 ложный
2 марта 2003 г. воскресенье 22 $ 132,478 -42% -15.2% 300 441 долл. США 20 106 250 долл. США 87 ложное
3 марта 2003 г. $ 20,145,807 88 ложный
4 марта 2003 г. вторник 22 $ 42,704 + 8% $
5 марта 2003 г. среда 22 $ 38 913 -8.9% -20,8% 300 $ 129 $ 20,227,424 90 ложный
6 марта 2003 г. четверг 22 $ 3914,176 300 $ 130 $ 20 266 600 91 ложный
7 марта 2003 г. пятница 24 90 697 $ % 92 ложный
8 марта 2003 г. суббота 22 $ 169000 +86.3% -26% 234 $ 722 $ 20 526 297 93 ложный
9 марта 2003 г. 234 $ 420 $ 20,624,783 94 ложный
10 марта 2003 г. понедельник 23 $ 33,833 $ -65,6% -65,6% 95 ложный
11 марта 2003 г. вторник 24 $ 38,850 +14.8% -9% 234 $ 166 $ 20 697 466 96 ложный
12 марта 2003 г. 234 $ 160 $ 20,735,056 97 ложный
13 марта 2003 г. четверг 22 $ 38,667 $ % 146 98 ложный
14 марта 2003 г. пятница 24 $ 86 711 +124.3% -4,4% 190 456 долл. США 20 860 434 долл. США 99 ложное
15 марта 2003 г. суббота 23 146 190 $ 840 $ 21 020 087 100 ложный
16 марта 2003 г. воскресенье 25 81 676 $ % 9014,16 101 ложный
17 марта 2003 г. понедельник 24 25850 долл. США -68.4% -23,6% 190 $ 136 $ 21,127,613 102 ложный
18 марта 2003 г. вторник 24 $ 3514,363 190 $ 186 $ 21 162 976 103 ложный
19 марта 2003 г. среда 23 33,466 $ -5,4% 46 -5,4% 46 -9011 104 ложный
20 марта 2003 г. четверг 23 $ 37 085 +10.8% -4,1% 190 $ 195 $ 21 233 527 105 ложный
21 марта 2003 г. 169 $ 494 $ 21,317,156 106 ложный
22 марта 2003 г. суббота 24 $ 151,550 $ % 8114146 107 ложный
23 марта 2003 г. воскресенье 26 55 226 долл. США -63.6% -32,4% 169 326 долл. 21 523 932 долл. 108 ложный
24 марта 2003 г. 169 $ 165 $ 21,551,945 109 ложный
25 марта 2003 г. вторник 25 $ 32,459 $ 192 % 110 ложный
26 марта 2003 г. среда 24 30 394 долл. США -6.4% -9,2% 169 $ 179 $ 21 614 798 111 ложный
27 марта 2003 г. 169 $ 178 $ 21 644 960 112 ложный
28 марта 2003 г. пятница 30 $ 68 807 $ % 9014,76 146 113 ложный
29 марта 2003 г. суббота 31 $ 109 317 +58.9% -27,9% 149 733 долл. США 21 823 084 долл. США 114 ложное
30 марта 2003 г. воскресенье 30 149 375 долларов 21 878 965 долларов 115 ложный
4 апреля 2003 г. пятница 36 37 982 долл. 120 ложный
5 апреля 2003 г. суббота 34 $ 65 501 +72.5% -40,1% 97 $ 675 $ 22 044 363 121 ложный
6 апреля 2003 г. 97 $ 348 $ 22,078,169 122 ложный
7 апреля 2003 г. Понедельник 40 $ 8,140 $ -75.9% -75.9% — 123 правда
8 апреля 2003 г. вторник 40 11310 долл. США +38.9% 97 $ 116 $ 22097610 124 true
9 апреля 2003 г. 102 $ $ 22,107,570 125 true
10 апреля 2003 г. четверг 38
11 апреля 2003 г. пятница 43 19 395 долл. США +81.1% -48,9% 72 $ 269 $ 22,137,688 127 ложный
12 апреля 2003 г. суббота 3214,018 9014,190 72 $ 444 $ 22,169,706 128 ложный
13 апреля 2003 г. Воскресенье 46 $ 15,029 $ % -53,1% 9014,155 129 ложный
18 апреля 2003 г. пятница 51 $ 14,784 -23.8% 39 379 $ $ 22 220 678 134 ложный
19 апреля 2003 г. $ 22 236 826 135 ложный
20 апреля 2003 г.

Пасхальное воскресенье

Воскресенье 52 $ 9,035 $ -44% -1414,96 136 ложный
25 апреля 2003 г. пятница 61 $ 6,101 -58.7% 39 $ 156 $ 22 283 102 141 true
26 апреля 2003 г. $ 22,292,961 142 true
27 апреля 2003 г. воскресенье 62 $ 3,658 -62,9% -59,5% правда
2 мая 2003 г. пятница 65 $ 2,806 -54% 9 $ 311 $ 22,299,425 4145 мая 2003 г. Суббота 65 4396 долл. США +56.7% -55,4% 9 488 долл. США 22 303 821 долл. США 149 ложный
4 мая 2003 г. воскресенье 66 9 $ 252 $ 22 306 095 150 ложный

Ящик для инструментов адаптации CVI | Пути к грамотности

Как TVI, работая со студентами с корковыми нарушениями зрения, я весь день трачу на адаптацию CVI.Хотя каждый студент уникален, я разработал набор инструментов для адаптации CVI с некоторыми из основных материалов, которые могут быть полезны для адаптации материалов для всех этапов CVI. Как здорово собрать это в начале нового учебного года!

Что находится в ящике для инструментов CVI?

Я стараюсь регулярно держать под рукой следующие предметы:

  • Стопка желтой бумаги
  • Черные папки с файлами:
    • Сделайте свою собственную папку с играми!
  • Черный картон:
    • Отлично подходит для закрытия одной строки в книге или на листе.
    • Сложите их пополам, чтобы получился черный фон.
  • Металлические кольца для скрепления страниц, открыток и других материалов
  • Карточки однотонных цветов для изготовления карточек
  • Полоски для приговоров
    • Отлично подходит для отработки предложений или словарного запаса
  • Маркеры для выделения или подчеркивания
    • Шарпи или 20-20 маркеров
    • Карандаши, которые нужно разворачивать по ходу дела, поскольку маркеры иногда растекаются через
  • Клейкие стикеры сплошных ярких цветов
  • Рулон цветной клейкой ленты для маркировки дверных проемов или краев ступеней.
    • Обсудите со специалистом по ориентации и мобильности.
  • Пухлая краска
  • Неровные наклейки (точки, войлок или липучка)
  • Клей
  • Ножницы
  • Счетчики или манипуляторы для сложения и вычитания
    • Наклейте их на стикеры, чтобы они не двигались.
    • При подсчете попросите их снять их и положить в другое место.
  • Наклейки
  • Мелки
  • Список приложений
  • Папка с файлами игр или обычных занятий

Поэкспериментируйте и посмотрите, что лучше всего подходит для вашего ученика!

Посмотрите это видео, знакомящее с содержанием инструментария CVI Adaptations Tool Box!

Посетите наш сайт Seeing Sadie и CVI, чтобы получить больше идей!

Следуйте за нами в Instagram, YouTube и Facebook.

Адаптация. (2002) — IMDb

После феноменального успеха «Быть ​​Джоном Малковичем» в 1999 году сценаристу Чарли Кауфману было поручено адаптировать для экрана документальный роман Сьюзан Орлеан «Похититель орхидей». Однако ему не потребовалось много времени, чтобы понять, что книгу Орлеана нельзя было снимать, ее обширный и тяжелый рассказ лишен какой-либо четкой структуры или последовательности. После нескольких месяцев безуспешных попыток написать сценарий к роману, сценарий Кауфмана необъяснимым образом превратился в историю попытки писателя адаптировать неподходящий роман.Законченный сценарий Кауфмана был представлен его спонсорам с некоторым трепетом, но, как сообщается, им он так понравился, что они решили отказаться от первоначального проекта и снять его сценарий. Спайк Джонз, который также был режиссером «Быть ​​Джоном Малковичем», вернулся к постановке «Адаптации», причудливого, извилистого, самореференциального фильма, получившего почти всеобщее признание критиков. Подобно классическому фильму Федерико Феллини «8½» 1963 года, в котором Кауфман почти наверняка черпал вдохновение, «Адаптация» рассказывает историю своего собственного творчества.

Николас Кейдж играет Чарли Кауфмана, одинокого, небезопасного и социально неуклюжего сценариста, которого нанимают для адаптации «Вора орхидей» по сценарию Сьюзан Орлеан, которую играет Мерил Стрип. Сам роман касается истории Джона Лароша (которого играет Крис Купер), самодовольного торговца растениями, арестованного в 1994 году за браконьерство редких орхидей в государственном заповеднике Факахатчи-Странд. Пока Кауфман изо всех сил пытается написать сценарий, его проблемы усугубляются присутствием его брата-близнеца Дональда (которого также играет Николас Кейдж), который является полной противоположностью Чарли: безрассудным, беззаботным, самоуверенным и, возможно, даже немного тусклым.Сценарий «Адаптации» перемещается между разными моментами времени, либо фиксируя подвиги Кауфман в написании экрана, либо переживания Орлеана при написании своего романа. В нескольких моментах истории происходят более драматические воспоминания: мы видим, как Чарльз Дарвин впервые пишет свои теории эволюции и адаптации, краткую историю мрачной деятельности охоты на орхидей, и в одном особенно впечатляющем эпизоде ​​мы возвращаемся назад. миллиарды лет до начала жизни, чтобы проследить, как Чарли Кауфман оказался здесь сегодня.

Несмотря на то, что события фильма якобы основаны на реальных событиях, события фильма сильно беллетризованы, и история всегда идет за тонкую грань с реальностью, при этом зрители никогда не уверены, является ли событие реальным или нет (в контексте фильма ) или просто плод воображения Чарли (или даже Дональда). Чарли Кауфман (реальный писатель, а не персонаж) часто получает больше всего похвал за фильм, но именно режиссер Спайк Джонз разделяет идею воплотить «Адаптацию» на экране.Его подход к созданию фильмов всегда оригинален и смел, он никогда не пытается попробовать что-то уникальное ради фильма, даже если это может оскорбить вкусы аудитории, которая не привыкла ни к чему, кроме обыденных клише современных фильмов, которые ежедневно выпускаются голливудскими студиями. Если это не было полностью очевидно после странного, запутанного, увлекательного «Быть ​​Джоном Малковичем», то «Адаптация» развеяла все оставшиеся сомнения. Режиссер, который начал свою карьеру как режиссер музыкальных клипов, похоже, разделяет исключительное понимание с писателем Кауфманом и взаимное согласие относительно того, что на самом деле пытается сказать фильм.

Помимо умной истории, «Адаптация» содержит некоторые из лучших актеров 2000-х годов, демонстрируя отличный выбор закаленных талантов на вершине своих игр. Возможно, в самой большой роли (ах) в своей карьере Николас Кейдж феноменален как Чарли и Дональд Кауфман, братья-близнецы, полная полярность которых поразительно очевидна в исполнении их соответствующих сценариев фильмов. Чарли, когда пишет свою адаптацию, полон решимости избежать обычных клише и построить фильм без какого-либо традиционного сюжета, написать фильм «просто о цветах».Однако Дональд, блаженно не обращая внимания на свою неоригинальность как писателя, выпускает банальный психологический триллер под названием «Тройка», в котором серийный убийца, его заложница и полицейский — одно и то же лицо. судьбы банальное обращение с Дональдом превозносится как шедевр, что еще больше усугубляет несоответствие, уже ощущаемое его разочарованным братом. Кейдж великолепен, а зачастую и абсолютно весел, поскольку оба персонажа придают каждому брату особое отношение и индивидуальность, так что он можно сразу сказать, что есть что, даже если их внешний вид точно такой же.

Мерил Стрип столь же превосходна, как Сьюзан Орлеан, журналист журнала «The New Yorker», которая исследует Джона Лароша и пытается мельком увидеть знаменитую и очень редкую Призрачную Орхидею, хотя бы для того, чтобы понять, что значит быть страстным. что-то. Крис Купер, возможно, крадет все шоу как харизматичный и загадочный Ларош, чья жизнь, охваченная трагедиями, посвящена освоению многочисленных малоизвестных областей (таких как сбор орхидей или рыб), каждая из которых время от времени отбрасывается и навсегда забывается как как только почувствует, что пора двигаться дальше, «приспосабливаться» к другому хобби.Из четырех номинаций на премию Оскар только Купер ушел со статуей. Примечательно, что сценарий Чарли Кауфмана также был номинирован на «Оскар». Поскольку сценарий был приписан и Чарли Кауфману, и Дональду Кауфману, последний стал единственным полностью вымышленным человеком в истории, который был номинирован на премию Оскар.

Короче говоря, «адаптация» — это все о неудачах. Чарли Кауфман полон решимости написать оригинальный сценарий, не вдаваясь в «секс, оружие или автомобильные погони», или персонажи, усвоившие жизненные уроки, растущие, полюбившие друг друга или преодолевшие препятствия, чтобы в конце концов добиться успеха.»Однако после того, как он в конце концов попросил Дональда закончить сценарий для него, все сводилось именно к этому. Посещение семинара по написанию сценариев Роберта Макки (запомнилось, что его сыграл Брайан Кокс), который известен тем, что решительно предостерегает от Deus Ex Machina. — используется именно так. Чарли Кауфман, герой, с треском проваливает свой сценарий, но, по иронии судьбы, Чарли Кауфман, писатель, преуспевает так великолепно! ‹CrimeReads

Автору С. потребовалось двадцать лет.Дж. Бокса, но наконец-то появилась экранизация одного из его криминальных бестселлеров. Big Sky , адаптация (в основном) триллера Box’s 2013 The Highway , выйдет в эфир 17 ноября на канале ABC. Автор сценария — известный продюсер Дэвид Э. Келли. Десятисерийный сериал показывает Кайли Банбери и Райан Филип в роли главных героев Бокса Кэсси Дьюэлл и Коди Хойт, а Кэтрин Винник играет персонажа, придуманного для Big Sky .

Box наиболее известен своей давней и пользующейся спросом серией с участием инспектора игры из Вайоминга Джо Пикетта, которая дебютировала в 2001 году с Open Season и продолжает появляться каждый год, а Long Range — в 2020 году.Книги Кэсси Дьюэлл выходят два раза в год.

Вместе эти две серии получили Box такие награды, как награда Western Heritage Award в области литературы от Национального музея ковбоев, премии Барри, Энтони, Гамшу и Макавити и премия «Шпора» от западных писателей Америки за лучший современный роман. Его первый автономный триллер «Голубые небеса» получил премию Эдгара как лучший роман 2008 года.

Родился в Каспере, Си-Джей «Чак» Бокс сейчас живет в Саратоге, Вайоминг, со своей женой Лори и их лошадьми.Его бывший публицист в Патнэме Майкл Барсон поймал Бокса между рыбалками, чтобы спросить его о появлении на телевидении сериала Big Sky .

Статья продолжается после рекламы

Для этого слайд-шоу требуется JavaScript.

Майкл Барсон: Вы уже были успешным автором своей серии о Джо Пикетте, которая ежегодно публиковалась Putnam, когда вы решили написать Back of Beyond , первую книгу, в которой Коди Холт будет вашим новым главным героем. .Что вы думали, когда запускали еще один криминальный сериал в 2011 году?

C.J. Box: На самом деле, Коди Хойт был представлен в отдельном триллере под названием Three Weeks To Say Goodbye в 2009 году, но он был довольно второстепенным персонажем. Как вы говорите, он вышел на передний план в Back of Beyond , а затем в The Highway .

Я никогда не собирался писать вторую серию, и мне все еще нравится думать, что я этого не делал. Я просмотрел каждую из этих книг — за ней следуют Badlands , Paradise Valley и The Bitterroots — в которых Кэсси Дьюэлл изображена как отдельные персонажи с перекрывающимися персонажами, как если бы это была эстафета с одним персонажем, передающим эстафету. к другому от книги к книге.Однако сейчас трудно утверждать, что это не сериал.

Зачем это нужно? Я не знаю. Я не планирую эти вещи стратегически. Достаточно сказать, что некоторые идеи и места, о которых я хочу написать, просто не подойдут для книг Джо Пикетта. Они * должны * стоять в одиночестве из сериала Джо Пикетта. Как вы знаете, автономные игры проходят в Колорадо, Монтане и Северной Дакоте. Ни одно из них не происходит в Вайоминге, где живет Джо Пикетт.

Статья продолжается после рекламы

Большинство читателей считают, что книги Коди Хойта и Кэсси Дьюэлл темнее романов Джо Пикетта.Это, безусловно, верно для The Highway .

МБ: Кэсси Дьюэлл, одна из главных героинь в Шоссе , вскоре возьмет на себя то, что начиналось как сериал с Коди в главной роли. Это был смелый шаг с вашей стороны … Но какие отзывы вы получили от своих читателей? Большинство из них, должно быть, были глубоко удивлены внезапной сменой направления сериала… Я знаю, что был!

CJB: Не планировалось. Я начал писать «Шоссе », и мне пришлось отложить его более чем на шесть месяцев, пока я закончил книгу Джо Пикетта.Когда я вернулся к этому повороту, который вы упомянули, мне пришло в голову. Я думал, никто не будет готов к тому, что будет дальше. За прошедшие годы я слышал много-много комментариев от читателей об этом повороте. Большинство говорят, что они прочитали эту основную страницу три или четыре раза, чтобы убедиться, что это действительно произошло. Некоторые читатели просто рассердились на меня, и они все еще злятся на меня. Ну что ж.

Для меня важно, чтобы мои читатели были начеку и чтобы в романах могло произойти все, что угодно. Думаю, это усиливает напряжение.

Статья продолжается после рекламы

Я тоже влюбился в Кэсси Дьюэлл. Я хотел написать о ней больше, чем о других персонажах. Оглядываясь назад, я думаю, что это был правильный выбор.

МБ: Интересно, что первой телеадаптацией одной из ваших книг будет Big Sky, телеканала ABC TV, продюсер Дэвид Э. Келли и основанный на сериале «Шоссе» и Кэсси Дьюэлл. Вы и ваши представители, должно быть, много говорили о самом продаваемом сериале Джо Пикетта с продюсерами фильмов и телевидения за последние десять лет или около того … Вы удивлены, что никто еще не выбрал сериал Джо Пикетта?

CJB: Это знакомая история, которую я слышал от многих других авторов.По книгам Джо Пикетта, по крайней мере, трижды предлагали сделать телесериал, но ни один из них так и не был снят. Причин много. И для автора это совсем не плохо, когда продюсеры выбирают работу, присылают чек, а затем не делают плохое телешоу.

В одном случае мы с женой увидели, что люди, ответственные за серию Джо Пикетта, хотели пойти в том направлении, в котором мы категорически не хотели этого, поэтому мы выбрались. Фильм или телесериал — это не все для автора, которым он когда-то мог быть.Лучше ничего не транслировать, чем что-то небрежное и грязное.

Статья продолжается после рекламы

Когда позвонил Дэвид Келли, я сразу же установил с ним взаимопонимание. Он блестящий писатель, любит писателей. Из того первоначального разговора я знал, что книги Коди / Кэсси будут в надежных руках.

А что касается сериала о Джо Пикетте… этой зимой будут большие новости. Я взволнован. Но у меня есть договоренность с ответственными людьми, что я не буду ничего говорить, пока они не сделают официальное заявление.

МБ: Как исполнительный продюсер на Big Sky , вы, вероятно, консультировались по некоторым решениям, которые принял Дэвид Келли, чтобы расширить оригинальную историю в определенных направлениях … Не могли бы вы поделиться примером сюжетной точки, в которой вы, возможно, помогли ему разрешить?

CJB: Я действительно не могу. Дэвид поделился со мной оригинальным пилотным сценарием, и я подумал, что он великолепен. На самом деле, это напугало меня, когда я прочитал это, хотя я знал, что должно было произойти. Я указал на пару пунктов, и он их исправил.

Статья продолжается после рекламы Изменения будут внесены. В этом разница между одиночной греблей на лодке и круизным лайнером.

Я прекрасно понимаю разницу между написанием романа, в котором я могу все контролировать, и передачей этого романа большой команде продюсеров, сценаристов, актеров, съемочной группы, руководителей сетей и так далее. Изменения будут внесены. В этом разница между одиночной греблей на лодке и круизным лайнером. Я надеюсь, что серия будет настолько хороша, насколько я думаю, и что она побудит читателей проверить книги.Фактически, это уже происходит.

Я вообще не занимаюсь повседневной съемкой. Я бы не смог, даже если бы захотел, потому что сериал снимается в Канаде, и из-за пандемии я не могу посетить съемочную площадку.

Тем не менее, мое участие довольно велико — я предоставил исходный материал!

МБ: Если Big Sky подходит для ABC, указал ли Келли вам, какой роман Кэсси Дьюэлл он хотел бы назначить для своей следующей адаптации?

CJB: Мы уже говорили об этом.Дэвид купил все романы Кэсси Дьюэлл для адаптации. В начальном сезоне Big Sky будут элементы как минимум двух из них. Куда это дальше пойдет, я пока не знаю.

Статья продолжается после рекламы

МБ: В 2020 году вам исполняется 20 лет. Более десяти лет вы входите в национальные списки бестселлеров каждый год, а иногда и два раза в год. Каковы ваши надежды на сериал о Джо Пикетте и Кэсси Дьюэлл в ближайшие десять лет?

CJB: Честно говоря, я надеюсь, что все книги и дальше будут продаваться так же хорошо, как и раньше.Я рад сообщить, что все 27 романов все еще печатаются, и каждая новая книга продается лучше предыдущей. Мне нравится эта тенденция.

Но я никогда не думаю дальше следующей книги. Я чувствую, что, когда авторы так поступают, они утаивают вещи в текущем романе, который они пишут, — что я не считаю справедливым по отношению к читателю. Поэтому я стараюсь писать каждый роман как отдельный роман, а когда он будет готов, я придумываю следующий.

Регуляторная модуляция гена Т-бокса Tbx5 связывает развитие, эволюцию и адаптацию грудины

Значимость

Переход от плавника к конечности и приобретение грудины были критическими этапами в эволюции четвероногих, но, несмотря на важность грудина в обеспечении четвероногого передвижения и полета птиц, механизмы, контролирующие приобретение и эволюционную адаптацию грудины, не изучены.Более того, механизмы, лежащие в основе развития грудины и ее дефектов, неизвестны. Мы описываем функцию гена фактора транскрипции T-box Tbx5 в формировании грудины, как нарушение TBX5 вызывает дефекты грудины человека и как модуляция Tbx5 была ключом к приобретению и адаптации грудины у позвоночных. Мы также демонстрируем количественную корреляцию между размерами грудины и использованием передних конечностей у видов птиц.

Abstract

Грудная кость расположена на вентральной средней линии грудной клетки, где она обеспечивает критическое прикрепление грудных мышц, которые позволяют передним конечностям поднимать тело от земли.У четвероногих морфология грудины коррелирует с способом передвижения: у летающих птиц есть брюшное расширение или киль на грудины, который обеспечивает увеличенную площадь для прикрепления летающих мышц. Грудина срастается с прикрепляющимися с обеих сторон ребрами; однако, в отличие от ребер, предшественники грудины не происходят из сомитов. Несмотря на решающую роль грудины в перемещении четвероногих, ее приобретению, эволюции и эмбриологическому развитию уделялось мало внимания.Мы демонстрируем существенную роль гена фактора транскрипции T-box Tbx5 в формировании грудины и передних конечностей и показываем, что обе структуры имеют общее эмбриологическое происхождение в латеральной пластинке мезодермы. В соответствии с этим общим происхождением и ролью Tbx5 , дефекты грудины являются характерной особенностью синдрома Холта-Орама (OMIM 142900), вызываемого мутациями в TBX5 . Мы демонстрируем связь между размером грудины и использованием передних конечностей у птиц и предоставляем доказательства того, что модуляция экспрессии Tbx5 лежит в основе уменьшения размера грудины и крыла у нелетающей птицы эму.Мы демонстрируем, что Tbx5 является общим узлом в генетических путях, регулирующих развитие передних конечностей и грудины, обеспечивая специфическую адаптацию этих особенностей, не затрагивая другие элементы скелета, а также может объяснить взаимосвязанную адаптацию морфологии грудины и передних конечностей, коррелирующую с режимом передвижения.

Эволюционный переход от плавников к конечностям во время колонизации суши был ключевым нововведением, сделавшим возможным расширенное излучение клады позвоночных. Изменения формы и положения костей конечности и плечевого пояса во время этого события были тщательно исследованы, но мало внимания уделялось приобретению грудины, функции, которая считается характерной практически для всех наземных позвоночных и является обязательной. для передвижения четвероногих (1).

Грудина — это тонкая плоская кость, лежащая на вентральной средней линии грудной клетки, которая обеспечивает важное место прикрепления грудных мышц, позволяя передним конечностям поднимать тело над землей. Грудина образует прямые связи с ключицами и дистальными кончиками ребер и, таким образом, укрепляет грудную клетку и помогает защитить внутренние органы, такие как сердце и легкие. На хвостовой конечности мечевидный отросток является местом прикрепления сухожилий диафрагмы.Среди четвероногих есть различия в морфологии грудины и четкая связь между морфологией грудины и используемым способом передвижения. Эта корреляция особенно хорошо проявляется у птиц, поэтому мы выбрали их для дальнейшего изучения. Например, птицы, которые используют свои передние конечности (крылья) для полета, имеют приспособление к грудине в виде большого брюшного удлинения, известного как киль, который обеспечивает увеличенную площадь поверхности для прикрепления летных мышц (2). Однако у нелетающих птиц и крылья, и грудина уменьшены в размерах, а грудной киль уплощен.

Несмотря на его критическую роль в передвижении четвероногих, механизмы, контролирующие развитие грудины, не изучены. У мышей грудина сначала видна как две конденсирующиеся мезенхимальные полоски в вентролатеральной стенке тела в эмбриональный день (E) 12 (3). Эти полосы движутся к средней линии и сливаются вместе, при этом ребра прикрепляются с обеих сторон. Первоначально предполагалось, что грудина формируется из дистальных концов ребер, которые происходят из сомитов, но эксперименты с эксплантами показали, что предшественники грудины вместо этого происходят из латеральной пластинки мезодермы (LPM) (1).Грудина поэтому необычна тем, что ее предшественники перемещаются медиально от латерального положения к своему окончательному положению на средней линии, где они сливаются с осевыми тканями, происходящими из отдельного эмбриологического происхождения.

Относительно поздно возникающие дефекты грудины были зарегистрированы на моделях трансгенных мышей и у людей, такие как нарушение сращения стернального кольца, которое может вызвать выпячивание сердца из груди (ectopia cordis) (4, 5). Кроме того, грудина может выступать (pectus carinatum) или впадать (pectus excatum) (6).Происхождение этих дефектов было приписано нарушению правильного сращения грудных связок по средней линии. Однако более ранние этапы формирования грудины не были изучены, в частности, как формируются грудные связки и откуда они возникают.

Мы демонстрируем важную роль гена фактора транскрипции T-box Tbx5 в формировании грудины и передних конечностей и показываем, что обе структуры имеют общее эмбриологическое происхождение в LPM. В соответствии с этой двойной функцией дефекты грудины являются характерной особенностью синдрома Холта-Орама (HOS; OMIM 142900), вызванного мутациями в TBX5 (4⇓⇓ – 7).Мы демонстрируем связь между размером грудины и использованием передних конечностей у птиц и предоставляем доказательства того, что модуляция экспрессии Tbx5 лежит в основе уменьшения размера грудины и крыла у нелетающей птицы эму. Мы демонстрируем, что Tbx5 является обычным генетическим узлом в молекулярных путях, регулирующих развитие передних конечностей и грудины, что делает возможной адаптацию именно этих функций, не затрагивая задние конечности или другие элементы скелета.

Результаты

Размеры грудины птиц коррелируют с использованием передних конечностей.

Сила, прилагаемая передними конечностями для отрыва тела от земли, создается грудными мышцами, которые прикрепляются к грудины. Морфология грудины коррелирует со способом передвижения, особенно яркий пример — птицы. Вентральный выступ, грудинный киль, обеспечивает увеличенную площадь поверхности для прикрепления крупных летных мышц, тогда как у нелетающих птиц крылья и грудина уменьшены (1, 8). Мы количественно исследовали взаимосвязь между использованием передних конечностей и размером грудины, измеряя грудину в ряде скелетов птичьих видов с использованием различных форм передвижения.Образцы из семейств птиц были отобраны на основании общих предположений об их летной способности. Например, колибри ( Trochilidae ) были выбраны как примеры узкоспециализированных летчиков, которые генерируют высокочастотные взмахи крыльями, могут парить и летать назад. С другой стороны, были выбраны нелетающие наземные птицы, такие как додо ( Raphus cucullatus ) и моа ( Dinornis sp.). В качестве примеров птиц со средними летными способностями были выбраны виды певчих птиц и голубей.Были произведены измерения длины, ширины и высоты киля грудины, которые были нормализованы по размеру птицы. Мы наблюдали сильную положительную корреляцию между длиной, шириной и высотой киля грудины, причем эти размеры увеличивались в соответствии с нашей оценкой увеличения летной способности. Вместе эти результаты количественно демонстрируют связь между использованием передних конечностей при передвижении и размерами грудины, и в частности высотой киля, адаптацией грудины, обнаруживаемой у большинства птиц.Эти результаты демонстрируют связь между использованием передних конечностей и размерами грудины (рис. 1, рис. S1, таблица S1 и обсуждаются более подробно в SI Results ) и предполагают, что эти две структуры могут иметь общие механизмы в их формировании.

Рис. 1.

Длина грудины и высота киля коррелируют с режимом передвижения у птиц. ( A ) Точечная диаграмма измерений длины грудины и высоты киля, нормализованных по размеру птицы путем деления на длину грудной клетки, для ряда групп птиц.Каждая точка на графике представляет один вид. По возможности, для каждого вида измеряли несколько экземпляров. Планки погрешностей показывают SE между измерениями нескольких образцов. Летающие виды представлены ромбами; нелетающие виды в виде треугольников. Грудные скелеты летучего баклана ( Phalacrocorax carb ) с указанным килем (белая стрелка) ( B ) и нелетающего баклана ( Phalacrocorax harissi ) с указанным уменьшенным килем (черная стрелка) ( C ).

Картирование судьбы клеток-предшественников грудины.

Помимо функциональной связи между грудиной и передними конечностями, мы исследовали эмбриологические взаимоотношения, лежащие в основе образования обеих этих структур. В то время как клетки-предшественники передних конечностей происходят из LPM (3), происхождение предшественников грудины и путь, по которому они достигают вентральной средней линии, не установлены. Эксперименты по трансплантации продемонстрировали, что стернальные предшественники не находятся в сомитах, что привело к предположению, что они могут происходить из LPM (3).Мы создали карту судьбы клеток-предшественников грудины, используя краситель-индикатор клонов (DiI) для маркировки участков в LPM внутри и вокруг зачатка передних конечностей у куриных эмбрионов Гамбургера и Гамильтона (HH) 20 (рис. 2 A и B). ). DiI-меченные клетки LPM вентральнее от зачатка конечности на уровне сомитов 14–21 приводили к DiI внутри грудины на стадии Hh46, как видно на всем образце и подтверждено на срезе (рис. 2 C H и рис. . S2 A G и J ).Маркировка участков рострально или каудально по отношению к этой области или внутри самого зачатка конечности не привела к обнаружению DiI по средней линии, демонстрируя, что популяция предшественников грудины не простирается рострально или каудально LPM рядом с сомитами 14–21 и не распространяется в собственно зачаток конечности (рис. 2 В ). Из этого местоположения предшественники грудины перемещаются медиально, чтобы сформировать стернальные тяжи, которые сливаются по средней линии с помощью Hh46 (данные не показаны). В качестве дополнительного подхода, чтобы подтвердить отсутствие предшественников грудины в собственно зачатке передних конечностей, мы выполнили гомотипические трансплантаты целых зачатков передних конечностей от трансгенных эмбрионов, экспрессирующих Hh30 GFP, в хозяева дикого типа на той же эмбриологической стадии (9).У оперированных эмбрионов на Hh46 GFP-положительные клетки присутствовали в конечностях и грудных мышцах, но не в грудины, демонстрируя, что предшественники стерна не присутствуют в зачатке передних конечностей на Hh30 (Рис. S2 H и I ; n = 5).

Рис. 2.

Клетки-предшественники грудины располагаются в LPM, вентральнее зачатка передних конечностей. ( A ) Схема поперечного сечения цыпленка Hh30, показывающая подразделение LPM на соматический и внутренний домены.( B ) Схема участков инъекции DiI и прилегающих сомитов с выделенной популяцией предшественников грудины (синий). Общий вид вентральной части ( C ) и поперечный разрез эмбрионов Hh30, показывающий DiI-метку (стрелки) ( D ) после инъекции в участок 4. Зачаток конечности обозначен LB; дорсальная аорта обозначается DA. ( E G ) Общий вид вентральной части собранных эмбрионов Hh46 со снятой шкурой, показывающих DiI-меченные клетки по средней линии (границы популяции показаны белыми стрелками) после инъекции в эмбрионы Hh30 на участках 2, 4 и 6 , соответственно.( H ) Поперечный разрез собранного эмбриона, показывающий DiI-метку в грудины (стрелка). S, грудина.

Необходимое раннее требование для

Tbx5 при развитии грудины.

Ген Т-бокса, Tbx5 , имеет ограниченный домен экспрессии в ростральном LPM у амниот (10) и необходим для формирования передних конечностей (11). Мы условно удалили Tbx5 в этой области у мышей с помощью трансгена Prx1Cre , который активен в областях LPM, включая зачатки конечностей и домены предшественников грудины (12, 13). Tbx5 lox / lox ; Prx1Cre мыши полностью лишены обеих передних конечностей и грудины (рис. 3 B и E ). При отсутствии грудины грудная клетка не закрывается и часто возникает связанная грыжа внутренних органов и нарушение закрытия брюшной стенки (рис. 3 H и K ). Этот поразительный фенотип демонстрирует, что Tbx5 играет важную роль в развитии как грудины, так и передних конечностей, и раскрывает Tbx5 как общее генетическое звено в программах, регулирующих формирование передних конечностей и грудины.

Рис. 3.

Грудинные связки и передние конечности не формируются в отсутствие Tbx5 . Вид снизу на контроль ( A и D ), условный мутант Tbx5 ( Tbx5 lox / lox ; Prx1Cre ) ( B и E и mutant E ) ( Fgf10 — / — ) ( C и F ) эмбрионы на E17.5. В цельномонтажных ( A C ) и Alcian Blue / Alizarin Red ( D F ) препаратах скелета.На контрольном изображении обрезаны самые дистальные структуры передних конечностей. ( G L ) Виды вентральной части экспрессии Runx1 в предшественниках грудины (стрелки) на E12.5 и E13.5 в контроле, Tbx5 lox / lox ; Prx1Cre и Fgf10 — / — эмбрионов мыши. Грыжа внутренних органов после неудачного закрытия стенки тела, присутствующая в H и K . ( M O ) Вид с вентролатеральной стороны, демонстрирующий экспрессию Tbx5 в передней конечности и вентральной стенке тела, обнаруженную с помощью гибридизации in situ в E10.5, 11,5 и 12,5 эмбрионов мыши. ( P ) Вид с вентролатеральной стороны цыпленка Hh32, демонстрирующий экспрессию Tbx5 в зачатке передних конечностей (FL) и LPM вентрально по отношению к зачатку конечности (черная стрелка). ( Q и R ) Виды вентролатеральных эмбрионов эму на eqHh32 и eqHh33 соответственно, демонстрирующие экспрессию Tbx5 в малом зачатке передних конечностей (FL) и LPM вентральнее зачатка конечности (черные стрелки).

Следующей целью Tbx5 в передней конечности является Fgf10 (14, 15), но этот фактор не требуется для развития грудины, поскольку Fgf10 мутантных мышей ( Fgf10 — / — ) образуют нормальную грудину, несмотря на отсутствие передних конечностей (рис.3 C и F ), указывая на то, что в своей роли (-ях) в формировании грудины Tbx5 должен действовать через нижестоящие цели, отличные от Fgf10 . Мы исследовали связь между передними конечностями и грудиной далее, исследуя экспрессию Tbx5 в эмбрионах мышей на стадии зачатка конечностей. Полная гибридизация in situ показывает, что домен экспрессии Tbx5 простирается вентрально за зачаток передних конечностей от E10.5 и далее (рис. 3 M O ) в область предшественника грудины, как определено у цыплят (рис. .2 В ). Напротив, экспрессия Fgf10 ограничена только зачатками конечностей и не распространяется в грудную клетку (16), что согласуется с тем, что Fgf10 не действует ниже Tbx5 в развитии грудины. Эквивалентный паттерн экспрессии также наблюдался у цыплят (фиг. 3 P ).

Для визуализации того, что происходит с предшественниками грудины в отсутствие Tbx5 , мы использовали Runx1 в качестве маркера грудных связок. Runx1 играет роль в окостенении грудины, но не требуется для развития грудины до этого шага (17).Полная гибридизация in situ для Runx1 в контрольных эмбрионах мыши показывает специфическое окрашивание в стернальных полосах по обе стороны грудной клетки на E12.5, которые перемещаются ближе к средней линии на E13.5 (Рис. 3 G и Дж ). У условных мутантных эмбрионов Tbx5 ( Tbx5 lox / lox ; Prx1Cre ) стернальные тяжи не образуются (рис.3 H и K ). Однако на ст. E12.5 в передней брюшной стенке тела виден участок из Runx1 -положительных клеток (рис.3 H ; n = 4), указывая на то, что указаны некоторые предшественники грудины. К ст. E13.5 не обнаруживаются Runx1 -положительных клеток (рис. 3 K ; n = 5), что указывает на то, что на этой стадии предшественники грудины либо потеряны из-за гибели клеток, либо больше не экспрессируют Runx1. .

Формирование зачатков передних конечностей полностью блокируется у мышей Fgf10 — / — , но грудина формируется нормально, и экспрессия Runx1 не затрагивается (рис.3 I и L ), демонстрируя, что программа формирования грудины может работать независимо от программы передних конечностей, несмотря на то, что обе они зависят от Tbx5 . Наши генетические данные демонстрируют, что Tbx5 действует на ранней стадии развития грудины, возможно, он необходим для миграции предшественников грудины с образованием грудинных тяжей.

Модуляция экспрессии

Tbx5 сопровождает сокращение передних конечностей и грудины эму.

Птицы, утратившие способность летать, имеют меньшую грудину и крылья по сравнению с летающими птицами (рис.1 и рис. S1). Механизмы, которые управляют этими изменениями в ходе эволюции, неясны, но, вероятно, это связано с адаптациями регуляторных путей, которые действуют во время эмбрионального развития. Мы использовали эму, Dromaius novaehollandiae , в качестве модели нелетающей птицы и курицу, Gallus gallus , в качестве летающей птицы для сравнения, чтобы изучить генетические механизмы, лежащие в основе уменьшения размеров передних конечностей и грудины. Передние конечности и грудина меньше (относительно) у эмбрионов эму на поздних стадиях по сравнению с цыпленком (рис.4 E и J ). Зачаток передних конечностей страуса эму задерживается по сравнению с задними конечностями (18), в отличие от цыплят, у которых передняя конечность выходит немного впереди задней (19). Это обращение гетерохронии указывает на то, что изменения возникли на ранних этапах программы развития передних конечностей эму, поэтому мы исследовали модуляцию экспрессии Tbx5 как кандидата для управления этими адаптациями.

Рис. 4.

Модуляция экспрессии Tbx5 сопровождает адаптацию передних конечностей и грудины у эму.( A I ) Гибридизация in situ, показывающая экспрессию Tbx5 в области формирования передних конечностей (скобка), передних конечностей (FL) и сердца (*) цыплят ( A D ) и эму ( F I ) эмбрионы. ( K N ) Гибридизация in situ, показывающая экспрессию Pitx1 в области формирования задних конечностей эму (скобка) и задних конечностей (HL). ( E и J ) Боковой вид скелетов цыплят и эму, окрашенных альциановым синим / ализариновым красным, на 10-й и 27-й дни соответственно, с выделением передних конечностей (желтый) и грудины (оранжевый).( A M ) Вид сбоку. ( N и Inset ) Виды сверху.

Мы проанализировали экспрессию Tbx5 у эму и цыплят по сравнению с экспрессией маркера инициации задних конечностей, Pitx1 (20). Поскольку не существует установленной нормальной системы стадирования эму, эмбрионы были поставлены в соответствии с морфологией задних конечностей и головы, сопоставлены с эквивалентными стадиями Гамбургера / Гамильтона цыплят (19) и назначены стадии эквивалента Гамбургера / Гамильтона (eqHH).До eqHh29 Tbx5 не выражается в LPM эму, хотя обнаруживается в сердце (рис. 4 F и G ). На тех же стадиях экспрессия Pitx1 уже может быть замечена в области формирования задних конечностей и на ранней стадии зачатка задних конечностей (рис. 4 K и L ), а у цыплят Tbx5 отчетливо обнаруживается в передней конечности. -формирование ЛПМ на Нх26 (рис. 4 А ). Tbx5 Экспрессия впервые обнаруживается в LPM, формирующем передние конечности эму, на eqHh30, где она охватывает ростро-каудальный домен сопоставимого размера с таковым у цыпленка Hh26 (рис.4 H ). По eqHh33, Tbx5 и Pitx1 выражаются в передних и задних конечностях эму, соответственно (рис. 4 I и N ). Начиная с Hh32 (и eqHh32) и далее, экспрессия Tbx5 как у цыплят, так и у страуса эму распространяется за переднюю конечность эму и в брюшную стенку тела (рис. 3 P R ), охватывая область, в которой прекурсоры находятся, как показано на примере цыпленка (рис. 2 B ). Однако зачаток передних конечностей эму уменьшился в размерах и составляет всего 2.От 5 до 3 сомитов по сравнению с 6 сомитами, когда зачаток передних конечностей цыпленка впервые появляется (Рис. 4 I ) (19). Следовательно, отсроченное начало экспрессии Tbx5 , но не уменьшение размера домена экспрессии Tbx5 , сопровождает уменьшение размера крыла эму и грудины по сравнению с цыпленком.

Обсуждение

Переход от плавника к конечности и приобретение грудины были критическими этапами в эволюции четвероногих. Однако, несмотря на важность грудины в обеспечении движения на четвероногих и полета птиц, приобретение и адаптация грудины часто упускаются из виду.Здесь мы демонстрируем общее эмбриологическое происхождение передних конечностей и грудины и выявляем общую потребность в активности Tbx5 для развития передних конечностей и грудины. Далее, мы показываем, что Tbx5 представляет собой общий регуляторный узел в молекулярных путях, регулирующих развитие передних конечностей и грудины, обеспечивая механистическое объяснение того, как эти структуры согласованно адаптировались в разных клонах четвероногих.

Мы устанавливаем грудину как компонент аппендикулярного скелета, берущий свое начало в LPM.Другие элементы грудного и тазового пояса также происходят из LPM, такие как таз, ключица и большая часть лопатки (11). Клетки-предшественники грудины дифференцируются в среде соединительной ткани, происходящей из LPM, помещая грудину в абаксиальный домен формирования паттерна вместе с грудной мышцей и конечностью (21). Действуя как скоба для осевого скелета, грудина расположена на латерально-сомитной границе, образуя поверхность раздела с грудинными ребрами, которые принадлежат первичной области формирования паттерна, дифференцировавшись внутри сомитного компартмента (за исключением первого ребра). ) (11).Эта граница между первичным и абаксиальным доменами часто является местом эволюционных модификаций (21, 22).

Наши данные показывают, что Tbx5 требуется на самых ранних стадиях развития грудины, потому что у Tbx5 lox / lox ; Prx1Cre эмбрионов мышей и мыши условная делеция после E11.5 не вызывает дефектов грудины. Эти наблюдения имеют клиническое значение для объяснения этиологии дефектов грудины HOS, которые вызваны мутациями в TBX5 .Было высказано предположение, что TBX5 может регулировать формирование паттерна грудины посредством Connexin 40 ( Cx40 ), и что дефекты HOS возникают в результате снижения уровней Cx40 (23). Однако Cx40 экспрессируется в стернальных полосах, начиная с E13.5, что указывает на то, что любые изменения в экспрессии Cx40 будут возникать слишком поздно, чтобы объяснить дефекты грудины HOS. Другой потенциальной целью ниже по течению Tbx5 во время образования грудины является Fgf10 .В конечности Tbx5 активирует сигнальную петлю обратной связи FGF, которая управляет разрастанием конечностей (13⇓ – 15). Мы показываем, что Fgf10 не требуется для образования грудины и поэтому его можно исключить в качестве кандидата Tbx5 в этом процессе. Прямая цель (и) ниже по течению Tbx5 в развитии грудины еще предстоит идентифицировать.

Мы не оцениваем напрямую, является ли потребность в Tbx5 в развитии грудины автономной по отношению к предшественникам грудины.Использование линии Prx1Cre генерирует эмбрионы, в которых отсутствует Tbx5 во всех тканях, полученных из LPM, включая предшественники грудины и окружающую соединительную ткань. Присутствие Runx1 -экспрессирующих клеток у Tbx5 мутантных мышей предполагает, что (по крайней мере, некоторые) предшественники грудины изначально определены в отсутствие Tbx5 , что указывает на неавтономную роль Tbx5 в инструктировании или прокладывании пути. для миграции предшественников грудины.Мы описали роль Tbx5 , действующего в соединительной ткани конечностей для формирования структуры мышц и сухожилий (24), что подтверждает модель, в которой Tbx5 действует в абаксиальной грудной соединительной ткани во время развития грудины.

Несмотря на очевидное расхождение в нижележащих целях Tbx5 в развитии грудины и передних конечностей, наша работа предполагает, что модуляция экспрессии Tbx5 позволяет вносить изменения конкретно в программы развития передних конечностей и грудины, не затрагивая задние конечности или другие Структуры, производные от LPM.Предыдущая работа также предложила модуляцию Tbx5 как механизм, чтобы генерировать специфичные для типа конечностей морфологические изменения в эволюционном масштабе (25). Эксперименты на цыплятах продемонстрировали, что рекрутирование клеток мезодермы боковой пластинки для инициации образования зачатков конечностей происходит во время временного окна компетентности. Наши результаты согласуются с задержкой экспрессии Tbx5 , приводящей к привлечению предшественников грудины и конечностей только в последней части этого окна.Эта задержка ведет к привлечению меньшего пула предшественников, который в конечном итоге может поддерживать образование только меньшей грудины и меньших элементов конечностей с отсутствующими пальцами. Наши результаты также предполагают, что временная модуляция Tbx5 может объяснять адаптацию программ крыльев и грудины и, в частности, сдерживая действие Tbx5 в рекрутировании зачатков передних конечностей и предшественников грудины, эта модуляция может привести к связанному снижению элементы конечностей и грудины.

Вместе наши результаты обеспечивают эмбриологическую и генетическую основу для понимания происхождения дефектов грудины. В частности, в случае HOS, наша генетическая делеция у мыши и картирование судьбы у цыпленка указывают на то, что связанные аномалии грудины возникают в результате нарушенной миграции предшественников, а не из-за неспособности определить эту популяцию клеток или из-за нарушения сращение грудины. В более широком смысле, наши результаты предсказывают, что причиной может быть нарушение миграции предшественников грудины или субстрата, по которому они перемещаются.

Методы

Мышиные линии.

Эмбрионы мышей были стадированы по Кауфману (26). В полдень того дня, когда была обнаружена вагинальная пробка, было принято значение E0,5 развития. Tbx5 lox / lox мышей (27) были скрещены с Tbx5 lox / + ; Prx1Cre (12). Описано Fgf10 — / — мышей (15).

Птичьи эмбрионы и операции.

Оплодотворенные куриные яйца (Winter’s Farm) и трансгенные куриные яйца, повсеместно экспрессирующие GFP (Roslin Institute), инкубировали при 38 ° C и подвергали стадиям согласно Гамбургеру и Гамильтону (HH) (19).Оплодотворенные яйца эму (Denbury Farm и Leicestershire Emus and Rheas) инкубировали при 37,5 ° C, вращая на 90 ° два раза в день. Яйца страуса эму были обработаны с помощью дрели Dremel 8000.

Эмбрионы обнажали путем вскрытия яйца и удаления мембран с помощью щипцов. CM-DiI (молекулярные зонды) в концентрации 2 мг / мл в 100% EtOH разбавляли 1/10 в свежем 15% (мас. / Об.) Растворе сахарозы. Раствор DiI вводили в желаемое место пипеткой из рта с помощью вытянутой стеклянной иглы и добавляли 50 мкл антибиотика ручки / стрептококка (Gembio).

Для трансплантатов зачатков конечностей Hh30 зачатки передних конечностей дикого типа удаляли in ovo с помощью вольфрамовой иглы. Соответствующий зачаток конечности от согласованного по стадиям эмбриона GFP затем был трансплантирован на место с помощью штифта, сделанного из платиновой проволоки диаметром 0,08 мм (Goodfellow). Эмбрионы фотографировали с помощью микроскопа Olympus MVX10 с камерой Hamamatsu C4742-95 и программным обеспечением Openlab.

Полная гибридизация in situ.

Гибридизацию проводили по существу, как описано (28). Все использованные зонды для цыплят и мышей были описаны следующим образом: cPitx1 (29), cTbx5 (29), mRunx1 (30) и mTbx5 (13).Зонды эму были получены путем амплификации фрагментов эму Tbx5 и Pitx1 из препарата кДНК эмбриона эму на стадии зачатка конечности с использованием наборов праймеров, разработанных на основе выравнивания птичьих последовательностей ортологичных генов.

Иммунофлуоресценция.

Обнаружение скелетных мышц на замороженных срезах проводили с мышиным анти-my32 (1: 800; Sigma), как описано (31). Срезы окрашивали DAPI (1:15 000), монтировали с использованием среды DAKO (DAKO) и фотографировали с помощью микроскопа Zeiss Axioimager M1 с камерой Axiocam MRc и программным обеспечением Axiovision.

Подготовка скелета.

Препараты скелета мышей, цыплят и эму окрашивали альциановым синим и ализариновым красным, в основном, как описано (13).

Измерения скелета.

Скелеты птиц в Музее естественной истории в Тринге и Зоологическом музее Университета в Кембридже были измерены с помощью штангенциркуля. Были измерены длина грудины, ширина, высота киля и длина грудной клетки (расстояние от первого до последнего грудного позвонка).По возможности, для каждого вида было измерено до четырех образцов и рассчитана SE.

Благодарности

Мы благодарим Джо Купера (Музей естественной истории в Тринге) и Роберта Ашера и Мэтта Лоу (Музей зоологии Кембриджского университета) за предоставление их коллекций скелетов птиц и полезные советы; Колину Мидоусу (Ферма Денбери), Маргарет Довер (Эму и нанду из Лестершира) и Питеру Фарли (Детский научно-исследовательский институт Мердока) за предоставление яиц и эмбрионов ратита; Марелла де Брейн и Эндрю Джарратт (Институт молекулярной медицины Уизералла) для клона Runx1 ; Сью Миллер за техническую помощь; и Анн Берк и Вероник Дубок за критическое прочтение рукописи.Эта работа финансировалась грантом Совета медицинских исследований MC_PC_13052.

Доступен бесплатно в режиме онлайн через опцию открытого доступа PNAS.

Скачать бесплатно STL файл Адаптация Lego Box • Модель для 3D-печати ・ Cults

?

Творчество: 5,0 / 5 (1 голос-голосов)

Оценка участников по пригодности для печати, полезности, уровню детализации и т. Д.

Ваш рейтинг: 0/5 Удалить

Ваш рейтинг: 0/5

  • 767 Просмотры
  • 2 нравится
  • 29 загрузки

Описание 3D модели

Информация о файле 3D-принтера

  • Формат 3D-дизайна : STL Сведения о папке Закрывать
    • Табличка_1.stl
    • Round_1.stl
    • Round_2.stl
  • Дата публикации : 2021.02.18 в 20:11

Лицензия

CCBYNC

Теги

Создатель


Бестселлеры категории Game


Хотели бы вы поддержать культы?

Вы любите Культы и хотите помочь нам продолжить приключение самостоятельно ? Обратите внимание, что мы небольшая команда из 3 человек , поэтому очень просто поддержать нас поддерживать деятельность и создавать будущие разработки .Вот 4 решения, доступные всем:

  • РЕКЛАМА: Отключите блокировщик баннеров AdBlock и нажимайте на наши рекламные баннеры.

  • ПРИСОЕДИНЕНИЕ: Делайте покупки в Интернете, нажимая на наши партнерские ссылки здесь Amazon или Aliexpress.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.