Zic сайт производителя: Бренд ZIC — каталог товаров производителя. Купить, цена, фото, заказать — RallySale.ru Продажа спортивных автомобилей, гоночной техники и экипировки для автоспорта. Работа. Аренда и тюнинг машин

Содержание

Официальный дилер ZIC, ЛУКОЙЛ, Kixx(GS), SINTEC, MICHELIN

ГлавнаяМатериалПрограмма импортозамещения в действии

Программа импортозамещения в действии

Российский автомобильный рынок диктует сегодня новые требования к качеству моторных масел. Резкий рост доли импортной техники в отечественном автопарке стимулирует российских производителей ГСМ выходить на уровень транснациональных корпораций, внедрять инновационные технологии и выводить на рынок продукты, которые могут составить конкуренцию импортным маслам.

Разработка и организация производства cовременных гидравлических и индустриальных масел является одной из стратегических задач ООО «ЛЛК-Интернешнл». Соответствующая программа реализуется с 2006 г., к настоящему времени в этом направлении достигнуты значительные результаты. Разработаны масла премиум-класса мирового уровня, обеспечивающие потребности промышленности и транспорта в различных эксплуатационных условиях при более доступной цене в сравнении с зарубежными аналогами.

Индустриальные масла «Лукойл» совместимы с импортными аналогами (см. Таблица эквивалентов масел «ЛУКОЙЛ»), что позволяет многим предприятиям постепенно замещать иностранную продукцию.

С начала 2009 года ОАО «ЛУКОЙЛ» выпускает несколько видов новых высокотехнологических индустриальных масел для широкого спектра промышленного оборудования и автотранспорта:

серия ЛУКОЙЛ ГЕЙЗЕР – гидравлические масла
- ГЕЙЗЕР ЛТ
- ГЕЙЗЕР СТ
- ГЕЙЗЕР ЦФ
- ГЕЙЗЕР ММ
серия ЛУКОЙЛ ВЕРСО 10W30 – трансмиссионно-гидравлическое масло
серия ЛУКОЙЛ ИГС-32, 46, 68 – индустриальное гидравлическое масло
серия ЛУКОЙЛ ИГП — 18, 30, 38, 49, 72, 91,114 – индустриальные масла общего назначения
серия ЛУКОЙЛ СТИЛО — масла для промышленных трансмиссий (редукторные масла)

серия ЛУКОЙЛ СТАБИО – компрессорные масла
серия ЛУКОЙЛ СЛАЙДО – 32, 68, 150, 220 – для смазывания направляющих и стволов скольжения станочного оборудования
серия ЛУКОЙЛ АВАНГАРД – моторные масла
- АВАНГАРД УЛЬТРА
- АВАНГАРД ЭКСТРА
- АВАНГАРД ПРОФЕССИОНАЛ

Новые индустриальные масла ЛУКОЙЛ имеют одобрения и допуски ведущих мировых производителей оборудования и техники, таких как: Denison, Bosch Rexroth, Flender, Caterpillar, Allison, Komatsu, ZF, Cincinnati Machine и Vickers. Каждое такое одобрение означает, что масло прошло полный цикл испытаний на оборудовании производителя.

Высокий уровень качества производства смазочных материалов обусловлен единой системой менеджмента качества на всех предприятиях, сертифицированных по международным стандартам ISO 9001, ISO 14001, OHSAS 18001/

В настоящее время масла «Лукойл» широко применяются как для современного импортного и отечественного оборудования и транспорта, так и для станков и парка техники прежних лет выпуска. Примером эффективного применения современных смазочных материалов «Лукойл» могут служить такие предприятия как Череповецкий металлургический комбинат ОАО «Северсталь», ОАО «УК «Кузбассразрезуголь», ОАО «Качканарский ГОК «Ванадий», ОАО «КАМАЗ», ОАО «Волжский трубный завод», ОАО «АВТОВАЗ» и др.

Производить качественный подбор импортозамещающей продукции для потенциальных клиентов позволяет международная консультационная база данных Британской компании OATS, которая используется компанией «ЛЛК-Интернешнл» с 2009 года. Её программное обеспечение использует большинство мировых производителей масел, в том числе такие гранды как ExxonMobil, Shell, Chevron, Total.

Программа включает в себя базы данных по применению смазочных материалов в различных видах техники, производимой за рубежом, — практически во всех легковых и значительном количестве грузовых автомобилей, индустриальном и технологическом оборудовании. Сформировав запрос по конкретной технике с указанием производителя, модели, года выпуска и модификации, пользователь получает рекомендации по применению смазочных материалов (марке масла, вязкостным характеристикам, объему заливки масел, срокам замены), основанные на требованиях производителей соответствующей техники. Рекомендации могут быть получены в режиме online через Интернет, либо с использованием базы данных на жестком носителе.

Применение программы OATS уже позволило торговым представителям и дилерам «ЛЛК-Интернешнл» провести более десятка результативных переговоров с потребителями, ранее скептически относившихся к отечественной продукции и использовавшими импортные масла.

Компания моторных масел «Ойл Групп» готова сотрудничать с предприятиями Амурской области и республики Саха (Якутия) в качестве надежного поставщика смазочных материалов «Лукойл» нового поколения, обеспечивать своих партнеров не только высокотехнологичным продуктом, но и предоставлять послепродажный сервис, а именно: обучающие программы (семинары) для технических специалистов предприятия, консультации по подбору масла импортозамещающих продуктов для техники и оборудования совместно со специалистами ОАО «ЛЛК-Интернешнл».

Для получения компетентных рекомендаций OATS по применению смазочных материалов «Лукойл» для Вашего оборудования или техники заполните АНКЕТУ.

	ЛУКОЙЛ ГЕЙЗЕР ЛТ		ЛУКОЙЛ СТИЛО
	ЛУКОЙЛ ГЕЙЗЕР СТ		ЛУКОЙЛ СТАБИО
	ЛУКОЙЛ ГЕЙЗЕР ЦФ		ЛУКОЙЛ СЛАЙДО
	ЛУКОЙЛ ГЕЙЗЕР ММ		ЛУКОЙЛ АВАНГАРД УЛЬТРА
	ЛУКОЙЛ ВЕРСО		ЛУКОЙЛ АВАНГАРД ЭКСТРА
	ЛУКОЙЛ ИГС		ЛУКОЙЛ АВАНГАРД ПРОФЕССИОНАЛ
	ЛУКОЙЛ ИГП

Тяжелая техника и оборудование должны безотказно работать каждый день, иногда в очень суровых условиях.

Простои техники обходятся очень дорого и ломают ритм работы предприятия. Вот почему так важен выбор качественных смазочных материалов, которые могут гарантировать надежность.

Ножи ЗИК (Златоустовские Именные Клинки)

Добро пожаловать в интернет-магазин рабочих и украшенных ножей компании «Златоустовские Именные Клинки» (ЗИК)! На сайте представлены более сорока моделей сертифицированных ножей, отправка по всей территории Российской Федерации, а также в Республику Казахстан и Беларусь!

Работаем с ассортиментом сталей: 95Х18, кованая Х12МФ, дамаск ZDI-1016 ,110Х18МШД.

Наш многолетний опыт и личное участие во всех производственных процессах позволяет на выходе получить качественные изделия, которые по достоинству оценит каждый наш покупатель. Каждое изделие имеет сертификат о том, что не является холодным оружием.

На сайте можно выбрать как готовую модель, так и заказать что-то для себя любой комплектации. Для вашей кухни у нас есть наборы кухонных ножей, так же можно заказать и по отдельности Шеф нож и универсальные.

Выбирайте, звоните, пишите! Регистрируйтесь на сайте для удобства заказа, подписывайтесь на нашу группу ВКОНТАКТЕ

Ножи «ЗИК» – Качество. Эстетика. Практичность.

Качественные ножи из Златоуста от производителя «ЗИК»

4 600р.

(1)

Нож разведчика (граб)

4 800р.

(1)

Финка Вачинская (кожа,алюминий)

4 300р.

(2)

Финка Тайга ( граб,алюминий)

4 200р.

(1)

Куница с долами (береста, алюминий)

4 900р.

(3)

Кондор (орех, алюминий)

4 200р.

(1)

Кондор-2 (орех, алюминий)

4 200р.

(3)

Лесной (орех,текстолит с ввертышем)

6 600р.

(1)

Перо (рукоять люкс-1)

4 200р.

(1)

Таежный-1 (орех,алюминий)

Член семейства Zic 5 способствует выживанию клеток рака поджелудочной железы и холангиокарциномы человека

Список журналов
Представитель Biochem Biophys
т.31; 2022 сен
PMC9166430

Biochem Biophys Rep. 2022 Сентябрь; 31: 101289.

Опубликовано в сети 2 июня 2022 г. doi: 10.1016/j.bbrep.2022.101289

Reiko Satow, ^∗ Информация об авторских правах и лицензии Отказ от ответственности

Дополнительные материалы

Заявление о доступности данных

Аденокарцинома протоков поджелудочной железы (PDAC) и холангиокарцинома (CCA) являются злокачественными опухолями с плохим прогнозом из-за ограниченной молекулярной эффективности и малой эффективности традиционной химиотерапии. агенты. Здесь мы определили основные роли члена семьи Zic 5 ( ZIC5 ) в выживании клеток PDAC и CCA. Результаты показали, что ZIC5 сильно экспрессируется в тканях PDAC и CCA, в то время как экспрессия ZIC5 почти не наблюдается в большинстве нормальных тканей взрослого человека. Кроме того, экспрессия ZIC5 связана с плохим прогнозом у пациентов с PDAC. Нокдаун ZIC5 с помощью малой интерферирующей РНК снижал фосфорилирование преобразователя сигнала и активатора транскрипции 3 (STAT3), белка, который связан с агрессивностью PDAC и CCA. Однако Нокдаун ZIC5 вызывал гибель клеток независимо от активации STAT3, чему способствует интерлейкин (IL)-6, фактор, связанный с воспалением. Кроме того, нокдаун ZIC5 в клетках PDAC и CCA аддитивно или синергически индуцировал апоптоз с противораковым препаратом гемцитабином. Таким образом, ZIC5 представляет собой потенциальную терапевтическую мишень для лечения PDAC и CCA.

Ключевые слова: ZIC5, аденокарцинома протоков поджелудочной железы, холангиокарцинома, STAT3, апоптоз, гемцитабин

PDAC: pancreatic ductal adenocarcinoma
CCA: cholangiocarcinoma
IL: interleukin
STAT3: signal transducer and activator of transcription 3
ZIC5: Zic family member 5

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC ) и холангиокарцинома (ХКА) являются одними из самых летальных злокачественных новообразований; существует несколько эффективных методов лечения этих заболеваний. Несмотря на успехи в понимании биологии рака PDAC и CCA, клинические исходы обоих этих заболеваний все еще плохи [1]. Поскольку у большинства пациентов на момент постановки диагноза заболевание уже прогрессирует, а эффективность традиционной химиотерапии ограничена, срочно необходима разработка эффективных молекулярных терапевтических агентов, обладающих активностью против этих заболеваний.

Ранее в ходе нашего скрининга член семейства Zic 5 (ZIC5) был идентифицирован как критический транскрипционный фактор для лекарственной устойчивости меланомы [2]. ZIC5 активирует преобразователь сигнала и активатор транскрипции 3 (STAT3), стимулируя экспрессию тромбоцитарного фактора роста D (PDGFD), делая клетки меланомы устойчивыми к ингибиторам BRAF и цитотоксическим реагентам [2]. Экспрессия ZIC5 также повышена и связана с патологической стадией опухоли при колоректальном раке и раке предстательной железы, в то время как Экспрессия ZIC5 редко выявляется в соответствующих неопухолевых тканях [3]. В клеточных линиях колоректального рака и рака предстательной железы ZIC5 положительно регулирует экспрессию PDGFD, активацию STAT3, пролиферацию, выживаемость и первичную лекарственную устойчивость. Кроме того, ZIC5 регулирует злокачественный фенотип раковых клеток не только путем регуляции экспрессии PDGFD и STAT3, но также путем регуляции экспрессии других факторов, таких как ингибитор циклинзависимой киназы 1B (CDKN1B) и член семейства белков теплового шока 1 (HSPD1). ) [3].

ZIC5 сильно экспрессируется при многих других типах рака (как видно из базы данных TCGA). Было показано, что ZIC5 способствует развитию злокачественного фенотипа при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ), гепатоцеллюлярной карциноме (ГЦК) и глиоме [[4], [5], [6]]. При НМРЛ нокдаун ZIC5 значительно ингибирует как пролиферацию (вызывая остановку клеточного цикла), так и рост опухоли in vivo [4]. При HCC ZIC5 способствует пролиферации, миграции и инвазии клеточных линий HCC, регулируя передачу сигналов β-catenin [5]. При глиоме 9Было показано, что 0031 ZIC5 является мишенью miR-761, которая ингибируется hsa_circ_0007534, кольцевой РНК, высоко экспрессируемой в тканях глиомы [6]. Однако, насколько нам известно, роль ZIC5 в PDAC и CCA не выяснена. Поэтому в настоящем исследовании мы исследовали роль ZIC5 в PDAC и CCA.

2.1. Клетки и культуры

Клеточные линии AsPC-1, PANC-1 и MiaPaca-2 (PDAC) были получены из Американской коллекции типовых культур (Манассас, Вирджиния, США). Клеточная линия RBE (CCA) была получена из банка клеток RIKEN (Цукуба, Япония). Клетки поддерживали при 37 °C в среде с 5 % CO 9 .0093 2 увлажненная атмосфера в среде RPMI 1640 (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки.

2.2. Выделение РНК, синтез кДНК и количественная ПЦР в реальном времени

Их проводили, как описано ранее [3]. Количественную ПЦР в реальном времени (кПЦР) проводили с использованием следующих праймеров: ZIC5 , F: AACCTCAAGATCCACAAGCGT и R: CACTGGTGTGGACATGGGAA; ACTB , F: GCCCTGGCACCCAGCACAAT и R: GGAGGGGCCGGACTCGTCAT; и GAPDH , F: AGC CTC CCG CTT CGC TCTCT и R: CCA GGC GCC CAA TAC GACCA. ACTB (кодирующий β-актин) и GAPDH (кодирующий протеин глицеральдегидфосфатдегидрогеназу домашнего хозяйства) использовали в качестве внутреннего контроля для нормализации уровней транскриптов.

2.3. Малая интерферирующая РНК (миРНК) и трансфекция плазмид

Отрицательный контроль миРНК и миРНК для ZIC5 был описан ранее [2]. Транзиторные трансфекции миРНК выполняли с использованием Lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen) в соответствии с протоколом производителя. В каждом эксперименте общее количество трансфицированной миРНК корректировали с помощью соответствующей отрицательной контрольной миРНК. Вектор экспрессии ZIC5 был таким, как описано ранее [2]. Для получения стабильных клеток трансфицированные клетки отбирали с помощью 1 мг/мл G418 (10131035, Thermo) в течение 12 дней, а полученную массу клеток анализировали.

2.4. Анализ клеточной пролиферации

Анализ клеточной пролиферации проводили, как описано ранее [2].

2.

5. Анализы апоптоза

Клетки инкубировали с реагентом CellEvent Caspase-3/7 Green Detection Reagent (Invitrogen) и Hoechst33342 (Dojindo) в течение 30 мин, после чего клетки анализировали с помощью In Cell Analyzer 2000 с 4′,6-диамидино-2. фильтры из фенилиндола (DAPI) и флуоресцеинизотиоцианата (FITC). Соотношение клеток, положительных по каспазе-3/7, и клеток, положительных по Hoechst33342, определяли с помощью программного обеспечения In Cell Analyzer Workstation 3.7 (GE Healthcare). Опыты проводили не менее 3-х раз.

2.6. Реагенты

Гемцитабин (ChemScene, Monmouth Junction, NJ) использовали в указанных концентрациях для обработки клеток PDAC или CCA.

2.7. Вестерн-блоттинг

Вестерн-блоттинг проводили, как описано ранее [3]. Использовали первичные антитела к STAT3 (BD Biosciences), GAPDH (Santa Cruz Biotechnology) и фосфо-STAT3 (Tyr705) (Cell Signaling, Дэнверс, Массачусетс, США). GAPDH и β-актин использовали в качестве контроля нагрузки. Изображения были получены с использованием LuminoGraph I (ATTO, Токио, Япония). Интенсивность сигнала количественно определяли с использованием анализатора CS (ATTO).

2.8. Статистический анализ

Значение экспрессии ZIC5 в тканях PDAC и CCA было получено из данных о последовательности мРНК в базе данных The Cancer Genome Atlas (TCGA) (http://cancergenome.nih.gov/), а статистический анализ был выполнен с использованием двусторонний критерий Манна-Уитни U или точный критерий Фишера. Анализ Каплана-Мейера и другие статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения JMP (Pro 15.1.0) или пакета статистического программного обеспечения R (v. 4.0.3). Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (SD) на гистограммах, если не указано иное. Блочные диаграммы суммируют медиану и значения между 25-м и 75-м процентилями. Значимость различий определяли статистическими тестами, указанными в подписях к отдельным рисункам. P < 0,05 считалось статистически значимым.

3.1.

Экспрессия ZIC5 в PDAC, CCA и нормальных тканях взрослого человека.

Данные Seq из базы данных TCGA (A). Сводки клинико-патологических параметров пациентов с PDAC или CCA и экспрессией ZIC5 показаны в дополнительных таблицах 1 и 2. Экспрессия ZIC5 коррелировала с патологической стадией PDAC (дополнительная таблица 1).

Открыть в отдельном окне

Экспрессия ZIC5 в PDAC, CCA и нормальных тканях человека. (A) Значения последовательности РНК экспрессии ZIC5 в тканях аденокарциномы поджелудочной железы (слева; PDAC) и холангиокарциномы (справа; CCA), а также в соответствующих неопухолевых тканях были получены из базы данных The Cancer Genome Atlas (TCGA) . Статистические сравнения между больными и нормальными тканями (для каждого заболевания) были выполнены с использованием двустороннего критерия Манна-Уитни 9.0031 У тест. (B) Взаимосвязь между экспрессией ZIC5 и выживаемостью была определена и нанесена на график с использованием метода Каплана-Мейера. Общие показатели выживаемости для пациентов с обнаруживаемой экспрессией ZIC5 или без нее представлены красной и синей линиями соответственно. (C) Значения RNA-Seq экспрессии ZIC5 в нормальных тканях взрослого человека были получены из базы данных Protein Atlas. (D) Экспрессию ZIC5 оценивали с помощью количественной ПЦР с обратной транскрипцией с образцами кДНК из нормальных тканей человека и из клеточных линий AsPC-1, PANC-1, MiaPaca-2 (PDAC) и RBE (CCA). Значения нормированы на экспрессию (в соответствующих образцах) гена домашнего хозяйства 9.0031 ГАПДХ . (Для интерпретации ссылок на цвет в легенде к этому рисунку читатель отсылается к веб-версии этой статьи.)

Сообщалось, что ZIC5 является мишенью miR-761, которая ингибируется circ_0007534 [6]. ], а экспрессия circ_0007534 повышается в тканях PDAC [7]. Более того, как миР-625, так и миР-892b, которые входят в состав circ_0007534, подавляются в опухолевых тканях PDAC по сравнению с таковыми в парных нормальных тканях [7]. Чтобы оценить, участвует ли миР-761 в Супрессия ZIC5 при PDAC и/или CCA экспрессию miR-761 оценивали на основании базы данных OncoMir Cancer [8]. Экспрессия миР-761 существенно не отличалась между нормальными и опухолевыми образцами как в PDAC, так и в CCA. Более того, экспрессия miR-761 не коррелировала с экспрессией ZIC5 (база данных OncoMir Cancer). На основании этих данных мы предполагаем, что ни miR-761, ни circ_0007534 не участвуют в регуляции ZIC5 в этих опухолях.

Чтобы определить, влияет ли экспрессия ZIC5 на прогноз, мы оценили экспрессию гена у пациентов с PDAC или CCA и построили кривые выживаемости с использованием метода Каплана-Мейера. Частота общей выживаемости была значительно ниже у пациентов с PDAC с опухолями с экспрессией ZIC5 по сравнению с пациентами без определяемой экспрессии ZIC5 (B). У пациентов с ССА показатели общей выживаемости существенно не отличались между этими двумя группами (данные не представлены).

Данные RNA-Seq предполагают, что экспрессия ZIC5 в нормальных тканях взрослого человека ограничена в семенниках и коре головного мозга (Атлас белков человека) [9] (C). Чтобы подтвердить это наблюдение, кДНК из нормальных тканей человека (Human Multiple Tissue cDNA Panels I и Human Immune System MTC Panel; TaKaRa, Япония) оценивали на экспрессию ZIC5 с использованием анализа КПЦР. Транскрипт ZIC5 был обнаружен в головном мозге, а также в клеточных линиях PDAC и CCA, но не в костном мозге, печени плода, лимфатических узлах, лейкоцитах, селезенке, тимусе, миндалинах, сердце, плаценте, легких, печени, гладких мышцах, почках или поджелудочной железы (D). Эти результаты показали, что Транскрипт ZIC5 проявляет сильную специфичность экспрессии в PDAC и CCA.

3.2.

ZIC5 положительно регулирует пролиферацию клеток PDAC и CCA

Чтобы выяснить роль ZIC5 в клетках PDAC и CCA, мы провели siRNA-опосредованный нокдаун ZIC5 в нескольких клеточных линиях (A и дополнительная рис. 1A). Анализ пролиферации клеток показал, что нокдаун ZIC5 значительно снижает количество клеток клеточных линий PDAC (AsPC-1, PANC-1 и MiaPaca-2) и CCA (RBE) (B и дополнительная рис. 1B) по сравнению с эффектом контрольная миРНК. Эти результаты показали, что ZIC5 положительно регулирует рост этих клеток.

Открыть в отдельном окне

ZIC5 положительно регулирует выживаемость клеток PDAC и CCA. PANC-1 (клеточная линия PDAC) и RBE (клеточная линия CCA) трансфицировали отрицательным контролем (siNeg) или ZIC5 (siZIC5) siRNA. Последовательность-мишень siRNA различалась между № 1 и № 2. (A) Через 2 дня после трансфекции экспрессию мРНК ZIC5 оценивали с помощью количественной ПЦР. Относительный уровень экспрессии был нормализован к уровню гена домашнего хозяйства 9.0031 ACTB в качестве внутреннего контроля. Статистический анализ проводился с использованием критерия множественного сравнения Даннетта. (B) Пролиферацию клеток оценивали в указанные моменты времени. Относительное количество жизнеспособных клеток на 4 или 5 день (по сравнению с днем 0) из трех независимых экспериментов указано на гистограммах. Статистический анализ проводили с использованием критерия множественного сравнения Даннетта средних (***P < 0,001, **P < 0,01, *P < 0,05). (C) Клетки PANC-1 и RBE трансфицировали отрицательным контролем (siNeg) или ZIC5 (siZIC5) миРНК. Через 24 часа клетки обрабатывали гемцитабином (Gem) (0,2 мкМ), как указано. Через 2 дня клетки инкубировали с зеленым реагентом для обнаружения каспазы-3/7 (зеленый) и Hoechst33342 (синий). Определяли процент каспаз-позитивных клеток из трех независимых экспериментов. Статистический анализ проводили с использованием теста множественных сравнений Тьюки (***P < 0,001, **P < 0,01, *P < 0,05). (D) После 14 дней обработки гемцитабином (0,1 мкМ) клетки окрашивали раствором Гимзы. Окрашенную площадь количественно определяли с использованием изображения J. Статистический анализ проводили с использованием теста множественного сравнения Тьюки (***P < 0,001). (E) Клетки MiaPaca-2 со стабильной гиперэкспрессией ZIC5 и контрольные клетки (вектор) обрабатывали гемцитабином (Gem) (0,2 мкМ) в течение 2 дней, а затем проводили анализы апоптоза. Статистический анализ проводили с использованием двустороннего непарного t-критерия Стьюдента (*P < 0,05). (Для интерпретации ссылок на цвет в легенде к этому рисунку читатель отсылается к веб-версии этой статьи.)

3.3.

ZIC5 положительно регулирует выживаемость клеток PDAC и CCA

Чтобы определить, участвует ли ZIC5 в выживании клеток PDAC и CCA, мы затем оценили индукцию апоптоза через ZIC5 нокдаун. Нокдаун ZIC5 индуцировал уровень апоптоза примерно на 15–30% в этих клеточных линиях на 3-й день после трансфекции (C и дополнительная рис. 1C). Когда клетки также обрабатывали гемцитабином, терапевтическим препаратом, используемым в клинических условиях для лечения PDAC и CCA, нокдаун ZIC5 аддитивно или синергически индуцировал апоптоз примерно до 30–60% через 48 ч после обработки гемцитабином (C и дополнительная рис. 1C). Для дальнейшей оценки выживших клеток и их роста мы культивировали клетки в течение 14 дней после обработки низкими дозами гемцитабина. Окрашивание по Гимзе показало, что клетки PANC-1 и RBE были уничтожены за 9Только нокдаун 0031 ZIC5 (D), в то время как AsPC-1 и MiaPaca-2 были уничтожены только комбинацией гемцитабина и нокдауна ZIC5 (дополнительная рис. 1D). При сверхэкспрессии ZIC5 индуцированный гемцитабином апоптоз снижался в MiaPaca-2 (E), однако сверхэкспрессия ZIC5 в клетках PANC-1 или RBE не влияла на их выживаемость (данные не показаны). Мы предположили, что эффект сверхэкспрессии ZIC5 не был очевиден, поскольку экспрессия ZIC5 на эндогенном уровне в этих клетках была достаточной для проявления его биологических эффектов. Эти результаты показали, что эндогенный ZIC5 способствует выживанию клеток PDAC и CCA, а подавление ZIC5 делает раковые клетки более восприимчивыми к противоопухолевым препаратам. Повышение чувствительности к лекарствам важно для предотвращения лекарственной устойчивости раковых клеток.

3.4.

ZIC5 Нокдаун снижает фосфорилирование STAT3 в клетках PDAC и CCA

Активация STAT3 способствует экспрессии антиапоптотических генов и связана с агрессивными фенотипами PDAC и CCA [[10], [11], [12], [13 ]]. Ранее мы сообщали, что ZIC5 участвует в активации STAT3 в клетках меланомы, колоректального рака и рака предстательной железы [2,3]. Поэтому, чтобы определить, способствует ли ZIC5 активации STAT3 в клетках PDAC и CCA, исследовали уровень фосфорилирования STAT3. Из-за низкой экспрессии STAT3 в клетках AsPC-1 [10] мы провели дальнейшие эксперименты с использованием клеток PANC-1, MiaPaca-2 и RBE. 9Нокдаун 0031 ZIC5 значительно снизил количество фосфорилированного STAT3 (Tyr705) в клетках PANC-1, MiaPaca-2 и RBE (A и дополнительная рис. 2A). Эти результаты и наше предыдущее исследование показали, что ZIC5 регулирует активность STAT3 в большинстве протестированных линий раковых клеток (A и дополнительная рис. 2A) [2,3]. Учитывая, что нокдаун ZIC5 индуцировал апоптоз в клетках AsPC-1, которые имеют очень низкое фосфорилирование STAT3 [10], ZIC5-регулируемые факторы, отличные от STAT3, должны быть важны для выживания клеток AsPC-1.

Открыть в отдельном окне

ZIC5 положительно регулирует фосфорилирование STAT3, хотя нокдаун ZIC5 снижает выживаемость клеток PDAC и CCA, несмотря на опосредованную интерлейкином (IL)-6 активацию STAT3. (A) Уровни фосфорилированного STAT3 (Tyr705) (pSTAT3), а также общего количества STAT3 и GAPDH определяли в клетках PANC-1 и RBE, трансфицированных отрицательным контролем (siNeg) или ZIC5 (siZIC5) siRNA. Количественная оценка уровней фосфорилированного STAT3, нормализованная по отношению к общему STAT3, показана как среднее ± SD (n = 3) на гистограммах. Статистический анализ проводили с использованием двустороннего непарного критерия Стьюдента (**P < 0,01, *P < 0,05). (B) Клетки PANC-1 и RBE трансфицировали siNeg или siZIC5. Через 2 дня после трансфекции клетки обрабатывали 1% FBS с IL-6 (20 нг/мл) или IL-22 (50 нг/мл) или без них. Через 24 часа клетки собирали для оценки фосфорилирования STAT3. (C) Относительное количество клеток определяли через 6 дней обработки IL-6 (20 нг/мл) с гемцитабином (гем) (0,1 мкМ) или без него в трех независимых экспериментах. Статистический анализ проводили с использованием двустороннего критерия множественного сравнения Тьюки (***P < 0,001, **P < 0,01, *P < 0,05).

Известно, что ZIC5 регулирует экспрессию PDGFD в клеточных линиях меланомы, колоректального рака и рака предстательной железы [2]. Поэтому мы также оценили экспрессию PDGFD в клетках, подвергнутых нокдауну ZIC5 . Однако уровень про-PDGFD не был значительно снижен при нокдауне ZIC5 в клеточных линиях PDAC и CCA (данные не показаны). Кроме того, экспрессия E-кадгерина, CDKN1B и HSPD1, каждый из которых, как было показано, регулируется ZIC5 при меланоме или раке предстательной железы [2,3], также не изменилась в клеточных линиях PDAC и CCA (данные не показаны), что свидетельствует о различные гены-мишени для ZIC5 в различных раковых клетках.

3.5.

ZIC5 Нокдаун подавляет выживание клеток PDAC и CCA, несмотря на опосредованную интерлейкином (IL)-6 активацию STAT3 -22 вовлечены в прогрессирование PDAC и CCA [[11], [12], [13], [14]]. Поскольку и IL-6, и IL-22 вызывают активацию STAT3, мы затем исследовали, ослабляет ли нокдаун ZIC5 фосфорилирование STAT3 и выживаемость раковых клеток даже в присутствии IL-6 или IL-22.

В клетках PANC-1 и RBE Нокдаун ZIC5 не оказывал значительного влияния на уровень фосфорилирования STAT3, индуцированного IL-6 (B), при этом снижая уровень индуцированного IL-6 или IL-22 фосфорилирования STAT3 в MiaPaca-2 (дополнительная рис. 2B) . Кроме того, нокдаун ZIC5 значительно снижал выживаемость клеток PANC-1 и RBE, подвергнутых воздействию IL-6, а также 10% FBS (C). Поскольку нокдаун ZIC5 не может подавлять фосфорилирование STAT3, индуцированное IL-6 (B), в то время как подавляет индуцированное 10% FBS в клетках PANC-1 и RBE (A), Нокдаун ZIC5 вызывал гибель клеток независимо от активации STAT3. ZIC5-регулируемые факторы, отличные от STAT3, также должны быть важны для выживания этих клеток.

В настоящем исследовании мы продемонстрировали, что ZIC5 способствует выживанию клеток PDAC и CCA посредством неизвестных механизмов. Недавно было показано, что на активность ZIC влияет WNT-зависимое SUMOylation во время развития нервного гребня [15]. В среде с высоким содержанием WNT ZIC5 подвергается SUMOилированию, что снижает образование фактора транскрипции 7, подобного корепрессорному комплексу 2/ZIC, и сдвигает баланс в сторону функции фактора транскрипции ZIC [15]. Т.о., клеточный контекст (например, посттранскрипционная регуляция и кофакторы) может сделать различные регуляторные мишени транскрипции доступными для ZIC5. Тем не менее Нокдаун ZIC5 показал аддитивные или синергетические эффекты в индукции апоптоза при лечении гемцитабином во всех протестированных клеточных линиях, что позволяет предположить, что ZIC5 может служить привлекательной терапевтической мишенью для лечения PDAC и CCA.

В этом исследовании мы подтвердили, что ZIC5 сильно экспрессируется в тканях PDAC и CCA, тогда как экспрессия ZIC5 почти не наблюдается в большинстве нормальных тканей взрослого человека. Нокдаун ZIC5 индуцировал гибель клеток PDAC и CCA. Кроме того, нокдаун ZIC5 и противораковый препарат гемцитабин аддитивно или синергически индуцировали апоптоз в клетках PDAC и CCA. Таким образом, ZIC5 представляет собой потенциальную терапевтическую мишень для лечения PDAC и CCA.

Авторы заявляют, что у них нет известных конкурирующих финансовых интересов или личных отношений, которые могли бы повлиять на работу, представленную в этой статье.

Эта работа была поддержана грантом для молодых ученых (грант № 17H05056 Японского общества содействия науке KAKENHI) R.S. Это исследование также было поддержано Японским агентством медицинских исследований и разработок под номером гранта JP21cm0106176h0002. Эта работа также была поддержана исследовательскими грантами Фонда исследования рака принцессы Такамацу для Р.С.

^{Приложение A} Дополнительные данные к этой статье можно найти в Интернете по адресу https://doi.org/10.1016/j.bbrep.2022.101289.

Ниже приведены дополнительные данные к этой статье:

Мультимедийный компонент 1:

Щелкните здесь для просмотра. ^{(12K, xlsx)} Мультимедийный компонент 1

Мультимедийный компонент 2:

Щелкните здесь для просмотра. ^{(13K, xlsx)} Мультимедийный компонент 2

Мультимедийный компонент 3:

Нажмите здесь для просмотра. ^{(17K, docx)} Мультимедийный компонент 3

Мультимедийный компонент 4:

Щелкните здесь для просмотра. ^{(1.1M, pdf)} Мультимедийный компонент 4

figs1:

Щелкните здесь для просмотра. ^{(1.4M, jpg)} фиг.1

фиг.2:

Нажмите здесь для просмотра. ^{(920K, jpg)} figs2

Я поделился данными в https://data.mendeley.com/datasets/wyhj26s4ny/draft?a = cf2878d2-3d20-4310-9дфа-5f1e4e8f58c4.

1. Като С. Независимая от опухоли терапия рака поджелудочной железы и рака желчевыводящих путей. Диагностика. 2021; 11 doi: 10.3390/diagnostics11020252. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

2. Satow R., Nakamura T., Kato C., Endo M., Tamura M., Batori R., Tomura S., Murayama Y. , Fukami K. ZIC5 стимулирует агрессивность меланомы за счет опосредованной PDGFD активации FAK и STAT3. Рак рез. 2017; 77: 366–377. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-16-0991. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]

3. Satow R., Inagaki S., Kato C., Shimozawa M., Fukami K. Идентификация белка цинковых пальцев мозжечка 5 как фактора выживания клеток рака предстательной железы и колоректального рака. Онкологические науки. 2017;108:2405–2412. doi: 10.1111/cas.13419. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

4. Sun Q., Shi R., Wang X., Li D., Wu H., Ren B. Сверхэкспрессия ZIC5 способствует пролиферации в не- мелкоклеточный рак легкого. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 2016:479. doi: 10.1016/j.bbrc.2016.090,098. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

5. Liu L., Hu X., Sun D., Wu Y., Zhao Z. ZIC5 способствует росту гепатоцеллюлярной карциномы посредством активации Wnt/β-катенинового пути. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 2018; 503 doi: 10.1016/j.bbrc.2018.08.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

6. Li G.F., Li L., Yao ZQ., Zhuang S.J. Регуляторная петля Hsa_circ_0007534/miR-761/ZIC5 модулирует пролиферацию и миграцию клеток глиомы. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 2018;499 doi: 10.1016/j.bbrc.2018.03.219. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

7. Hao L., Rong W., Bai L., Cui H., Zhang S., Li Y., Chen D., Meng X. Повышенная регуляция кольцевой РНК circ_0007534 указывает неблагоприятный прогноз при аденокарциноме протоков поджелудочной железы и регулирует пролиферацию клеток, апоптоз и инвазию путем губчатой миР-625 и миР-892b. Дж. Селл. Биохим. 2019;120:3780–3789. doi: 10.1002/jcb.27658. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

8. Wong N. W., Chen Y., Chen S., Wang X. OncomiR: онлайн-ресурс для изучения дисрегуляции микроРНК панрака. Биоинформатика. 2018; 34: 713–715. дои: 10.1093/биоинформатика/btx627. [PMC free article] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

9. Улен М., Улен М., Фагерберг Л., Халльстрем Б.М., Халльстрем Б.М., Линдског К., Оксволд П., Мардиноглу А., Сивертссон А., Сивертссон А., Кампф К., Шёстедт Э., Шостедт Э., Асплунд А., Олссон И., Эдлунд К., Лундберг Э., Навани С., Сигьярто К.А.-К., Одеберг Дж., Джурейнович Д., Таканен Дж.О., Хобер С., Альм Т., Эдквист П.Х., Эдквист П.-Х., Берлинг Х., Тегель Х., Малдер Дж., Рокберг Дж., Нильссон П., Швенк Дж.М., Хэмстен М. , фон Фейлитцен К., фон Фейлитцен К., Форсберг М., Перссон Л., Йоханссон Ф., Цвален М., фон Хейне Г., фон Хейне Г., Нильсен Дж., Понтен Ф., Понтен Ф. Протеомика. Тканевая карта протеома человека. Наука. 2015:347. 1979. [PubMed] [Google Scholar]

Обратная корреляция передачи сигналов STAT3 и MEK опосредует устойчивость к ингибированию пути Ras при раке поджелудочной железы. Рак рез. 2018; 78: 6235–6246. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-18-0634. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

11. He W., Wu J., Shi J., Huo Y.M., Dai W., Geng J., Lu P., Yang M.W., Fang Y., Wang W., Zhang Z.G., Habtezion A., Sun YW, Xue J. Передача сигналов IL22RA1/STAT3 способствует стволовости и туморогенности при раке поджелудочной железы. Рак рез. 2018;78:3293–3305. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-17-3131. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

12. Фукуда А., Ван С.С., Моррис Дж.П., Фолиас А.Е., Лиу А., Ким Г.Э., Акира С., Буше К.М., Фирпо М.А., Малвихилл С.Дж., Хеброк М. Stat3 и MMP7 способствуют возникновению и прогрессированию аденокарциномы протоков поджелудочной железы. Раковая клетка. 2011;19:441–455. doi: 10.1016/j.ccr.2011.03.002. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

13. Isomoto H., Mott J.L., Kobayashi S., Werneburg N.W., Bronk S.F., Haan S., Gores G.J. Устойчивая передача сигналов IL-6/STAT-3 в клетках холангиокарциномы из-за эпигенетического молчания SOCS-3. Гастроэнтерология. 2007; 132: 384–39.6. doi: 10.1053/j.gastro.2006.10.037. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

14. Fouassier L., Marzioni M., Afonso M.B., Dooley S., Gaston K., Giannelli G., Rodrigues C.M.P., Lozano E., Mancarella С., Сегатто О., Вакеро Дж., Марин Дж.Дж.Г., Кулуарн С. Сигнальные сети при холангиокарциноме: молекулярный патогенез, таргетная терапия и лекарственная устойчивость. Печень инт. 2019;39:43–62. doi: 10.1111/liv.14102. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

15. Ali R.G., Bellchambers H.M., Warr N., Ahmed J.N., Barratt K.S., Neill K., Diamand K.E.M., Arkell R.M. WNT-отзывчивое SUMOylation ZIC5 способствует развитию клеток нервного гребня мышей, оказывая множественное влияние на транскрипцию. Дж. Клеточные науки. 2021; 134 doi: 10.1242/jcs.256792. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Статьи по биохимии и отчеты по биофизике предоставлены здесь Elsevier

CRRC TEIC UK | Компоненты для электромобилей и гибридных транспортных средств

У нас большой опыт разработки продуктов для железнодорожной отрасли, уделяя особое внимание электропоездам, локомотивным системам и метрополитенам.