21108118022 Сопротивление добавочное ВАЗ-2110,2114,2115 отопителя СОАТЭ — 2110-8118 022 2110-8118022-01
21108118022 Сопротивление добавочное ВАЗ-2110,2114,2115 отопителя СОАТЭ — 2110-8118 022 2110-8118022-01 — фото, цена, описание, применимость. Купить в интернет-магазине AvtoAll.Ru Распечатать9
1
Применяется: ВАЗАртикул: 2110-8118 022еще, артикулы доп.: 2110-8118022-01скрыть
Код для заказа: 065440
Есть в наличии Доступно для заказа — 9 шт.Сейчас в 11 магазинах — >10 шт.Цены в магазинах могут отличатьсяДанные обновлены: 29.07.2021 в 23:30 Доставка на таксиДоставка курьером — 300 ₽Сможем доставить: Завтра (к 31 Июля)
Доставка курьером ПЭК — EasyWay — 300 ₽Сможем доставить: Сегодня (к 30 Июля)
Пункты самовывоза СДЭКВозможен: сегодня c 10:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Люберцах (Красная Горка) — бесплатноВозможен: сегодня c 17:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в поселке Октябрьский — бесплатноВозможен: сегодня c 17:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Сабурово — бесплатноВозможен: сегодня c 19:00
Самовывоз со склада интернет-магазина на Братиславской — бесплатноВозможен: сегодня c 17:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Перово — бесплатноВозможен: сегодня c 17:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Кожухово — бесплатноВозможен: завтра c 11:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Вешняков — бесплатноВозможен: завтра c 11:00
Самовывоз со склада интернет-магазина из МКАД 6км (внутр) — бесплатноВозможен: завтра c 11:00
Самовывоз со склада интернет-магазина в Подольске — бесплатноВозможен: завтра c 11:00
Код для заказа 065440 Артикулы 2110-8118 022, 2110-8118022-01 Производитель СОАТЭ Каталожная группа: . .Отопление и вентиляция кабиныКузов Ширина, м: 0.06
Отзывы о товаре
Где применяется
Сертификаты
Обзоры
Наличие товара на складах и в магазинах, а также цена товара указана на 29.07.2021 23:30.Цены и наличие товара во всех магазинах и складах обновляются 1 раз в час. При достаточном количестве товара в нужном вам магазине вы можете купить его без предзаказа.
Интернет-цена — действительна при заказе на сайте или через оператора call-центра по телефону 8-800-600-69-66. При условии достаточного количества товара в момент заказа.Цена в магазинах — розничная цена товара в торговых залах магазинов без предварительного заказа.
Срок перемещения товара с удаленного склада на склад интернет-магазина.
Представленные данные о запчастях на этой странице несут исключительно информационный характер.
bcbde41c7d4522692fdc525d5697340c
Код для заказа:
Доступно для заказа:
Кратность для заказа:
ДобавитьОтменить
Товар успешно добавлен в корзину
!
В вашей корзине на сумму
Закрыть
Оформить заказРезистор печки ВАЗ 2110 — ремонт (фото)
Причины замены
Одной из распространенных «болезней» автомобилей ВАЗ, особенно – модели 2110 в зимнее время является работа печки. Если у вас вдруг возникла ситуация, когда вентилятор отопителя не поддерживает заданную ему температуру на первой, второй скоростях, а работает только на самой высшей, значит, резистор печки на вашем ВАЗ 2110 пришел в негодность, и его нужно менять.
Резистор печки ВАЗ 2110
Управление скоростями
Для того, чтобы иметь возможность управлять скоростью вентилятора печки, и существует дополнительный резистор, находящийся за вакуумным усилителем, сбоку от отопителя. Он оснащен двумя спиралями: 1-я имеет сопротивление 0,23 Ом и обеспечивает самую низкую, 1-ю скорость вращения вентилятора. Вторая, на 0,82 Ом, дает возможность включать 2-ю скорость. При исправной работе этой детали водитель имеет возможность управлять температурой в салоне, понижая ее или повышая. Если же та вышла из строя, то для отопителя остается только одна скорость – самая высокая. Именно дополнительный резистор ВАЗ, обеспечивает их переключение, кроме последней. Поэтому, собственно, высшая и работает, если он ломается.
Причины поломки
На ВАЗ 2110 устанавливается резистор с маркировкой РДО 2110-8118022-01, имеющий недостаток: там есть предохранитель (на него указывает красная стрелочка), который иногда может отпаяться. В принципе, если его припаять обратно, то замена может и не понадобиться. Но учитывая некоторые неудобства по тому, как подобраться к месту крепления резистора, и его незначительную цену, лучшее решение все же – замена.
Резистор печки ВАЗ 2110 РДО 2110-8118022-01
Как заменить
Алгоритм замены резистора печки таков:
1. Необходимо снять минусовую клемму с аккумулятора;
2. Снять облицовку, затем – накладку рамы ветрового стекла, вынуть обивки для шумоизоляции;
3. Вакуумный усилитель также лучше снять, ради удобства проведения ремонта;
4. Колодку с проводами, находящуюся на резисторе, отсоединить;
5. Чтобы случайно не заменить еще вполне исправное устройство (ведь причина может быть и не в нем), стоит проверить его омметром, поочередно подключая его к контактам. Если есть существенные отличия от нормальных показаний, значит – необходимо менять;
6. Для снятия неисправного резистора отопителя достаточно открутить винт, и удалить испорченную деталь;
7. В обратном порядке производится установка нового. Учтите также, что колодку с проводами можно присоединить лишь в одном положении.
Вот, собственно и все – ваш ВАЗ 2110 может отправляться в путь в холодную погоду. Вы не замерзнете, а также не будете испытывать неудобств из-за усиленной работы печки.
Оцените статью: Поделитесь с друзьями!Блок сопротивления печки ваз 2110
Затем элемент устанавливается в автоматический режим, а нагрев смотрят по градуснику. Сколько можно регулировать блок управления печкой САУО ВАЗ-21102 по времени? Что касается возможности ремонта неисправностей, то блок управления печкой ВАЗ-2110 нового образца ремонту не поддается (впрочем, как и старого).
Чтобы проверить работоспособность отопителя нужно снять центральные дефлекторы. Тут читайте подробнее как менять радиатор.
Первый ее элемент — сам отопитель — блок, отвечающий за подготовку поступаемого воздуха. Следующий элемент — распределитель воздуха, воздуховоды которого расположены в салоне авто на приборной панели. Для десятки производится специальный отопитель «2110-01», который отличается присутствием испарителя в климатической установке. Любая из этих поломок приводит к некорректной работе отопительного прибора. Если из строя вышел контролер отопителя, то может не подаваться команда на выдвижение заслонки. В зимнее время рекомендуется использовать два положения регулировки установленного отопителя.
Замена и доработка печки
При плохом поступлении теплого воздуха по вине воздуховода напрашивается небольшая модернизация печки ВАЗ, каналов для воздуха. Так, достаточно эффективно показали себя отопители 2112-01 и 2112-02. Самостоятельная наладка и доводка печки ВАЗ позволит обеспечить нужный комфорт.
Печка была включенна на первой скорости и когда заводил, видимо вся энергия ушла чтоб завести двигатель, а мотрочик печки не запустился. Вот в итоге и сгорел резистор отопителя печки. Включил 4-тую, работает. Только сразу не запихнув на место под бардачок не включайте, расплавится без обдува. У газели резистор отопителя очень похож на наш, но он трехконтактный и вместо термопредохранителя там впаяна какая-то большая черная квадратная деталька. Думаете блок сопротивлений у меня аналогичный и проблема скорее всего такая же?А по вопросу, рекомендую поискать самовосстанавливающиеся темопредохранители на основе биметалла.
Я такие термопредохранители не раз менял в разных устройствах. То есть он одноразовый.Для чего он тогда нужен,для защиты корпуса печки от плавления? На ВАЗ 2112 2004 года моторчик печки какого образца, нового или старого? Четвертая скорость не работала потому, что появились кольцевые трещины по пайке в блоке САУО. Пропаял и все стало работать. Мерил на снятом двигателе отопителя 2111 так запомнилось.
Система печка имеет 2 заслонки. Поломки заслонки печки могут быть разного характера во-первых часто закусывает заслонку или она клинит, а во-вторых выходит из строя привод заслонки (микромоторедуктор). Поэтому если не слышно как заслонка движется, то можно пошевелить её рукой, сняв дефлектор в центральной панели.
Как проверить датчик температуры воздуха в салоне?
При этом если выставить ручки контроллера системы автоматического управления отопителем в положениях «MIN» и «MAX» в соответствующих точках (синяя и красная), то вентилятор вращаться не должен.
Если механизм работает недостаточно эффективно, первым делом проверяют количество охлаждающей жидкости. Смотрят расширительный бачок: на нем есть советующие отметки, а на блоке системы – индикатор.
Однако чаще можно видеть сломанные выступы на корпусе блока отопителя. В этом случае специалисты рекомендуют выполнить замену мотора печки или его втулки. Иногда вентилятор шумит из-за шайб, с помощью которых устраняют осевые люфты. Элемент нужно снять и почистить.
Блок получает информацию о температуре в салоне от датчика, размещенного на потолке и снабженного микровентилятором. При необходимости блок может задействовать микродвигатель, управляющий заслонками отопителя.
Поломка потолочного датчика температуры. Следовательно, надо проверить, горячий ли радиатор. Сложности с обогревом могут появиться по причине отсутствия жидкости в системе охлаждения двигателя автомобиля. Когда температуру в салоне не удается контролировать, причинами могут стать отклонения в работе блока управления или неисправность заслонки. Доступ к заслонке возникает через отсек двигателя.
ММР (микромоторедутора) (9), информация о положении заслонки отопителя. Если при закрытых дверях и окнах после 15мин в салоне температура не будет соответствовать заданной, тогда блок управления печкой следует отрегулировать. Для этого следует подключить заведомо рабочий блок управления отопителем (взять у друга или в магазине). Устанавливаем регуляторы в положение 0 и снимаем, а затемснимаем с защлок переднюю крышку и стекло. Не редко из-за высокой температурыплата сильно нагревается и контакт отпаивается. Если видимых дефектов нет, тогда искать причину нужно в разберите (указан на фото). Другой причиной может быть плохой контакт в блоке предохранителей.
У меня проблема, видимо пустяковая, но решить не могу. На 2111, 2004г.в (как я понял печка нового образца. Подозрительно нагревается панель около левой колени пассажира и внутри бардачка. САУО 1333.3854 никак не реагирует на положение ММР. Включаешь зажигание — ММР 13 секунд крутится в одну сторону, независимо от положения регулятора температуры. Замерил сопротивление ММР, при вращении плавно меняется от 0 до 5 кОм (и обратно от 5 кОм до 0 при повороте регулятора температуры на холод) — то есть датчик положения в ММР исправен.
Когда приходит зима, вопрос эффективности отопительной системы более актуален. Рассмотрим типичные неисправности, с которыми чаще всего сталкиваются владельцы ВАЗ-2110.
Если вентилятор отопителя работает на 3-й скорости, но не работает на 1-й или на 1-й и 2-й, скорее всего резистор вышел из строя.
Дополнительный резистор установлен сбоку отопителя за вакуумным усилителем:
1 – спираль сопротивлением 0,23 Ом;
2 – спираль сопротивлением 0,82 Ом.
Резистор отопительной системы ВАЗ 2110
В автомобиле ВАЗ 2110 система отопления обеспечивает заданную температуру в салоне. Резистор предназначен для выбора режима в котором будет работать вентилятор.
Особенности устройства системы отопления ВАЗ 2110
Управление узлом отопительной системы осуществляется двумя рукоятками.
Итак:
- Левая задает желаемую температуру в диапазоне от 16 до 28 градусов. Крайние положения рукоятки, обозначенные красной и синей точками, обеспечивают полное открывание или закрывание заслонки отопителя, подачу горячего или холодного воздуха.
- Правая рукоятка устанавливает режим работы вентилятора. При установке в положение 0 – вентилятор включается, положение I– вентилятор имеет среднюю частоту вращения вентилятора, II – малая частота, А – управление вентилятором автоматическое.
- В выводные контролеры поступает информация от:
- датчика контролирующего температуру воздуха внутри салона;
- датчика, регулирующего положение вала микроредуктора привода заслонки отопительной системы – дает информацию о положении заслонки.
- При положении А, переключателя режима работы вентилятора, контролер выполняет еще и управление частотой вращения вентилятора, которая зависит от разности имеющихся температур воздуха задатчика и в салоне.
- Клапан рециркуляции при включении выключателя ускоряет прогрев воздуха в салоне авто ВАЗ 2110. Это происходит за счет перекрывания поступления наружного воздуха в салон, а циркуляция его происходит через отопитель только в салоне.
- Электродвигатель в вентиляторе отопителя имеет возбуждение от постоянных магнитов.
- Встроенный дополнительный резистор служит для создания малой частоты вращения. В устройстве две спирали: сопротивление одной 0,23 Ом, другой 0,82 Ом.
- Если в цепи включены обе спирали это обеспечивает первую скорость вращения вентилятора.
- Спираль 0,23 Ом обеспечивает вторую скорость.
- Отключение резистора обеспечивает вращение вентилятора с максимальной третьей скоростью, величина которой – 4100 об/мин.
Совет: Если в автомобиле ВАЗ 2110 неисправный электродвигатель отопителя, его лучше заменить новым. Ремонту может подлежать только зачистка коллектора.
Замена резистора в системе отопления ВАЗ 2110
Если вентилятор в отопительной системе работает только на третьей скорости, но не переключается на первую и вторую, причина скорее всего в выходе со строя резистора, которому нужназамена. Резистор отопителя ВАЗ показан на фото.
За вакуумным усилителем, сбоку отопителя установлен дополнительный резистор.
В нем:
- первая спираль имеет сопротивление 0,23 Ом;
- вторая с величиной сопротивления равной 0,82 Ом.
Заменить резистор можно своими руками. Несложная инструкция подскажет водителю как правильно выполняется замена дополнительного резистора отопителя ВАЗ 2110.
Итак:
- От аккумуляторной батареи отсоединяется провод от минусовой клеммы.
- Снимается облицовка, накладка ветрового стекла и обивка, предохраняющая от шума.
- Для более удобной работы лучше снять вакуумный усилитель.
- Отсоединяется от контактов на дополнительном резисторе колодка с проводами.
- С помощью омметра проверяется исправность устройства. Снимать резистор для проверки не обязательно.
Омметр поочередно подсоединяется к контактам резистора. При показании сопротивления на устройстве сильно отличающемся от номинального, необходима замена резистора отопителя ваз 2110.
Схема проверки исправности дополнительного резистора
- Отворачивается винт, который крепит резистор и деталь вынимается из автомобиля.
Замена резистора на отопителе ВАЗ 2110
- Новый резистор, цена которого невысокая, устанавливается в порядке обратном снятию. К резистору колодка подсоединяется лишь в одном положении.
Как выполняется замена дополнительного резистора отопителя на ВАЗ 2110 можно посмотреть на видео.
Исправно работающие отопление и вентиляция в салоне любого автомобиля создают комфорт пассажирам и водителю в любое время года. Помимо этого они обеспечивают хороший обзор изнутри салона через стекла, что очень важно для безопасности движения авто по дорогам.
Ваз 2110: замена резистора отопителя своими руками — инструкция
Резистор отопительной системы ВАЗ 2110
В автомобиле ВАЗ 2110 система отопления обеспечивает заданную температуру в салоне. Резистор предназначен для выбора режима в котором будет работать вентилятор.
Особенности устройства системы отопления ВАЗ 2110
Управление узлом отопительной системы осуществляется двумя рукоятками.
Итак:
- Левая задает желаемую температуру в диапазоне от 16 до 28 градусов. Крайние положения рукоятки, обозначенные красной и синей точками, обеспечивают полное открывание или закрывание заслонки отопителя, подачу горячего или холодного воздуха.
- Правая рукоятка устанавливает режим работы вентилятора. При установке в положение 0 – вентилятор включается, положение I– вентилятор имеет среднюю частоту вращения вентилятора, II – малая частота, А – управление вентилятором автоматическое.
- В выводные контролеры поступает информация от:
- датчика контролирующего температуру воздуха внутри салона;
- датчика, регулирующего положение вала микроредуктора привода заслонки отопительной системы – дает информацию о положении заслонки.
- При положении А, переключателя режима работы вентилятора, контролер выполняет еще и управление частотой вращения вентилятора, которая зависит от разности имеющихся температур воздуха задатчика и в салоне.
- Клапан рециркуляции при включении выключателя ускоряет прогрев воздуха в салоне авто ВАЗ 2110. Это происходит за счет перекрывания поступления наружного воздуха в салон, а циркуляция его происходит через отопитель только в салоне.
- Электродвигатель в вентиляторе отопителя имеет возбуждение от постоянных магнитов.
- Встроенный дополнительный резистор служит для создания малой частоты вращения. В устройстве две спирали: сопротивление одной 0,23 Ом, другой 0,82 Ом.
- Если в цепи включены обе спирали это обеспечивает первую скорость вращения вентилятора.
- Спираль 0,23 Ом обеспечивает вторую скорость.
- Отключение резистора обеспечивает вращение вентилятора с максимальной третьей скоростью, величина которой – 4100 об/мин.
Совет: Если в автомобиле ВАЗ 2110 неисправный электродвигатель отопителя, его лучше заменить новым. Ремонту может подлежать только зачистка коллектора.
Замена резистора в системе отопления ВАЗ 2110
Если вентилятор в отопительной системе работает только на третьей скорости, но не переключается на первую и вторую, причина скорее всего в выходе со строя резистора, которому нужназамена. Резистор отопителя ВАЗ показан на фото.
Дополнительный резистор
За вакуумным усилителем, сбоку отопителя установлен дополнительный резистор.
В нем:
- первая спираль имеет сопротивление 0,23 Ом;
- вторая с величиной сопротивления равной 0,82 Ом.
Заменить резистор можно своими руками. Несложная инструкция подскажет водителю как правильно выполняется замена дополнительного резистора отопителя ВАЗ 2110.
Итак:
- От аккумуляторной батареи отсоединяется провод от минусовой клеммы.
- Снимается облицовка, накладка ветрового стекла и обивка, предохраняющая от шума.
- Для более удобной работы лучше снять вакуумный усилитель.
- Отсоединяется от контактов на дополнительном резисторе колодка с проводами.
- С помощью омметра проверяется исправность устройства. Снимать резистор для проверки не обязательно.
Омметр поочередно подсоединяется к контактам резистора. При показании сопротивления на устройстве сильно отличающемся от номинального, необходима замена резистора отопителя ваз 2110.
Схема проверки исправности дополнительного резистора
- Отворачивается винт, который крепит резистор и деталь вынимается из автомобиля.
Замена резистора на отопителе ВАЗ 2110
- Новый резистор, цена которого невысокая, устанавливается в порядке обратном снятию. К резистору колодка подсоединяется лишь в одном положении.
Как выполняется замена дополнительного резистора отопителя на ВАЗ 2110 можно посмотреть на видео.
Исправно работающие отопление и вентиляция в салоне любого автомобиля создают комфорт пассажирам и водителю в любое время года. Помимо этого они обеспечивают хороший обзор изнутри салона через стекла, что очень важно для безопасности движения авто по дорогам.
Как заменить резистор печки ВАЗ-2110
Автомобили концерна ВАЗ пользуются значительной популярностью среди водителей благодаря достойным техническим характеристикам, соответствию цены и качества, отличной ремонтопригодности. Большинство неисправностей, которые случаются во время эксплуатации, водителя могут исправить самостоятельно без помощи профессионалов.
В этой статье речь пойдёт о ремонте отопителя транспортного средства, который является одним из слабых мест в автомобилях отечественного производства, а именно рассмотрим, как заменить вышедший из строя резистор печки ВАЗ-2110.
Функции и назначение резистора
Резистор часто применяется во многих электросхемах транспортного средства. Основная его функция — это контроль и распределение подаваемого тока к элементу его потребления, в этом случае к печке машины.
В автомобилях источником подачи тока является аккумулятор, который вырабатывает необходимый электрический заряд для функционирования всех электроэлементов транспортного средства. Резистор, в свою очередь, трансформирует ток в нужные пределы величины напряжения для бесперебойной работы той или иной детали. Если преобразователь тока приходит в негодность, то на печку будет подаваться напряжение больше, чем требуется для её работы, и система отопления салона работать не будет. А также от большого напряжения может произойти перегорание деталей отопителя, которые работают на токе.
Схема функциональности детали простая. Изначально ток вырабатывается в аккумуляторе машины и подаётся на резистор печки. Он трансформирует его в необходимую величину напряжения для качественной работы отопителя.
Причинами выхода из строя преобразователя могут быть большие нагрузки на него в случае длительной эксплуатации печки на максимальных оборотах, неисправность проводки. А также качество резистора и соответствие месту назначения влияет на срок его службы.
Способы диагностики исправности резистора печки
Бывают случаи, когда отопитель транспортного средства перестаёт работать на пониженных скоростях и функционирует только в усиленном режиме. Это и есть главный показатель выхода из строя резистора.
Дело в том, что ВАЗ-2110 оборудован преобразователем тока, который оснащён двумя спиралями. Первая из них имеет сопротивление 0,23 Ом и отвечает за работу печки на первой скорости, вторая спираль с сопротивлением 0,82 Ом обеспечивает возможность включать среднюю скорость печки. При неисправности детали включается только максимальный режим отопления салона.
Дополнительный резистор транспортного средства напрямую отвечает за возможность переключения скоростей отопителя, потому, если печка вашего автомобиля работает только на максимальном режиме, значит, необходимо заменить преобразователь тока.
Замена резистора отопителя ВАЗ-2110 своими руками
Для того чтобы заменить резистор, важно понимать, где именно он располагается. Деталь находится с правой стороны от печки за вакуумным усилителем. Первым делом перед началом работы надо отсоединить аккумулятор от питания, для этого снимается минусовый провод с клеммы.
Дальнейшие работы производятся в салоне автомобиля. Изначально необходимо демонтировать облицовку и накладку лобового стекла. После этого снимается звукоизоляционная обивка с правой стороны панели машины. Для получения хорошего доступа к преобразователю надо демонтировать вакуумный усилитель.
Обзору открылся дополнительный резистор отопителя. Дальше следует отсоединить колодку с проводкой от контактов преобразователя. Запомните, каким именно образом она подключена, чтобы правильно осуществить сборку по окончании работы. Подсоединить колодку можно только в одном положении.
Прежде чем приступить к замене изделия, необходимо проверить его работу с помощью омметра. Для проверки функциональности детали снимать её нет необходимости. Последовательно соедините контакты преобразователя и омметра сначала на первой спирали, потом на второй. Если показатели сопротивления значительно отличаются от оптимального значения для корректной работы устройства, значит, изделие подлежит обязательной замене.
Часто причиной выхода из строя детали является отсоединение предохранителя, находящегося на плате резистора. Теоретически, продлить жизнь элемента можно, припаяв контакты предохранителя на место. Однако такая работа отличается значительными трудностями, так как к креплению контактов предохранителя очень неудобно добираться за счёт очень маленького расстояния между платой и самим преобразователем.
Цена на качественный резистор не очень высокая, потому правильным решением будет его замена новой деталью. Предварительно перед заменой приобретите новое изделие в специализированном магазине. Не покупайте детали с рук или на стихийных рынках. Только качественное изделие может гарантировать бесперебойную работу отопительной системы салона автомобиля. На ВАЗ-2110 устанавливается изделие с идентификационным значением РДО 2110-8118022-01. Приобретайте изделия, которые соответствуют вашей марке автомобиля, это обеспечит правильное преобразование тока и корректную работу системы отопления салона.
Для демонтажа изделия необходимо открутить с помощью крестовой отвёртки саморез крепления. Аккуратно вынимается деталь, вышедшая из строя, и на её место устанавливается новый преобразователь. На этом замену можно считать выполненной. Остаётся только подключить колодку и разъёмы на место, произвести монтаж облицовки ветрового стекла в обратном порядке.
И ещё один важный совет
Проводите замену резистора сразу же после выявления его неисправности.
Эксплуатация печки машины после поломки дополнительного преобразователя тока может повлечь за собой очень серьёзные проблемы. При выходе из строя детали отопитель очень часто продолжает функционировать на максимальных оборотах. В холодное время года водителя могут не придавать значения неисправности и использовать печку, несмотря на поломку преобразователя.
Длительная работа отопителя на усиленных оборотах может стать причиной перегорания мотора печки или возгорания проводки автомобиля вследствие прохождения высокого напряжения через устройства, которые работают от силы тока.
Подведём итоги
Одним из важных элементов, который влияет на функциональность печки автомобиля, является резистор. Он выполняет важную функцию по распределению силы тока от аккумулятора к электроэлементам отопителя. При выявлении проблемы с функционированием преобразователя тока изделие подлежит обязательной замене.
Не игнорируйте неисправность деталей, которые имеют отношение к току, — это может быть небезопасно для вашей жизни. Сразу же после выявления неполадки устраняйте её причину.
Где находятся резисторы отопителя ваз 2110 – АвтоТоп
Резистор электродвигателя отопителя на автомобиле Ваз 2110 отвечает за работу двигателя в различных режимах (минимальные обороты, средние и максимальные). Резистор снимается для замены в случае выхода из строя. Для выполнения ремонтных работ подготовьте стандартный набор инструментов и проделайте следующую последовательность действий:
- Обесточьте автомобиль, отсоединив клемму минус от аккумуляторной батареи.
- Снимите декоративную облицовку и накладку ветрового окна.
- Снимите правую шумоизоляционную обивку.
- Отсоедините электрический разъем потенциометра микромотора привода заслонки управления отопителем.
- Далее отсоедините разъем от самого резистора электродвигателя.
- Крестовой отверткой выкручиваем винт крепления резистора и снимаем его.
Выполните его замену, после чего установку проведите в обратной последовательности.
Печка ВАЗ 2110 пожалуй самый проблемный и капризный механизм, во всей конструкции автомобиля. Без печки или неисправного радиатора отопителя салона на ВАЗ 2110 не обойтись, учитывая наш холодный климат. Если летом неработающая печка может вас и не беспокоить, то с наступлением холодного времени года часто выясняется, что печка на ВАЗ-2110 дует холодным воздухом. Сегодня постараемся очень подробно рассказать о устройстве, ремонте и замене отопителя на “десятке”. Текст для наглядности дополним фотографиями и видео.
Сразу скажем, что конструкция системы отопления на “десятке” принципиально отличается от того, что было на старых моделях ВАЗ. Самая главная особенность и отличие отопителя салона, это то что радиатор печки ВАЗ 2110 и его вентилятор находится не в салоне, а в моторном отсеке. У такой конструкции есть свои преимущества, например для замены радиатора отопителя или вентилятора печки не нужно полностью разбирать переднюю панель (торпедо).
Еще одно важное отличие, это электронное управление климатическими процессами в салоне. Для этого на ВАЗ 2110 установлена так называемая система автоматического управления отопителем (САУО). Фотография блока САУО далее.
Кстати, блок САУО на “десятках” разного года выпуска различается. С 1996 года производилось 4 типа контроллера САУО. Стоит это учитывать при покупке блока в качестве запасной части. Именно этот прибор и управляет температурой в салоне и работой вентилятора. Возможна установка температуры от 16 до 28 градусов.
Но как же работает этот чудо прибор? На потолке салона “десятки” стоит температурный датчик или потолочный датчик воздуха со встроенным (очень небольшим) вентилятором, для циркуляции воздуха. Именно этот датчик и отправляет сведения о реальной температуре в салоне, а блок САУО дает команду микро моторедуктору (ММР), он в свою очередь открывает или закрывает основную заслонку, которая отвечает за доступ горячего воздуха в салон. При изменении температуры в салоне, потолочный датчик дает новый сигнал, срабатывает микро моторедуктор поворачивая заслонку, закрывая или открывая доступ горячего воздуха в салон. Таким образом автоматически поддерживается заданный температурный режим. Далее фотография схемы воздуховодов отопителя ВАЗ 2110.
ВАЗ 2110 печка дует холодным, почему?
Многие владельцы “десяток” жалуются на то, что в какой то момент печка постоянно дует холодным воздухом и никакие повороты рукояток системы автоматического управления отопителем, никак не спасают ситуацию. Проблем и неисправностей может быть масса. Например, неисправен сам контроллер САУО, потолочный датчик или микро моторедуктор, который просто не открывает или не закрывает заслонку. Еще одна причина, это воздух (воздушная пробка) в радиаторе отопителя, который просто не способен нагревать проходящий через него воздух. Далее схематичное изображение устройства отопителя ВАЗ 2110.
Заслонки печки ваз 2110
Часто причиной плохой работы отопителя “десятки” становится заслонка печки ваз 2110. Заслонка может не плотно закрываться или плохо открываться. Сама заслонка отопителя изготовлена из пластика, который может со временем деформироваться и плохо работать. Многие автовладельцы покупают металлическую заслонку и меняют её своими силами. Как проверить работоспособность и оценить состояния заслонки печки? Все довольно просто, снимаете центральный дефлектор воздуховода и вот она заслоночка! Смотрим на фото.
Дальше внимательно осматриваете заслонку, включаете печку, поворачиваете регуляторы на блоке САУО и смотрите работает ли заслонка вообще. Как она перемещается, плотно ли прилегает. Если она не реагирует на команды, значит проблема может быть вовсе и не в ней. За одно можете посмотреть, работает ли рычаг перенаправления воздушного потока от стекла к ногам.
Вентилятор печки ваз 2110
Определить работоспособность вентилятора печки довольно просто, по шуму. Если моторчик вентилятора сгорел, то работать он естественно уже не будет. Правда прежде чем бросаться менять вентилятор печки, необходимо убедится, что не сгорел предохранитель. Как мы уже писали выше вентилятор печки ВАЗ 2110 расположен не в салоне, а в подкапотном пространстве. Что бы до него добраться, вам необходимо будет снимать специальный фартук, который отделяет моторный отсек от корпуса отопителя, вакуумного усилителя тормозов и механизма стеклоочистителей. Собственно фото для наглядности ниже.
Вот мы и добрались до вентилятора печки, сняв фартук и кожух отопителя. Кстати, рядом вы увидите салонный фильтр, в кожухе чуть левее. Его необходимо вытащить и почистить. Если никто до вас фильтр не менял, за долгие годы эксплуатации он серьезно забит мусором и препятствует нормальной циркуляции воздуха, который засасывается в салон ВАЗ 2110.
Радиатор отопителя ваз 2110
Радиатор печки “десятки” расположен там же, где и вентилятор, то есть под капотом (см фото выше). Что бы его снять вам необходимо сначала вытащить из кожуха отопителя вентилятор. Если вы замечаете в салоне странный запах, поднимите половички, если там лужицы из тосола или антифриза, значит радиатор печки ВАЗ 2110 потек. Хотя возможно уже не держат хомуты… в любом случае придется разбирать и выяснять причину протечки. Далее предлагаем пару видео роликов демонстрирующих процесс разборки, снятия фартука, вентилятора печки, салонного фильтра и радиатора отопителя.
Замена радиатора отопителя (печки) ВАЗ 2110 видео
Видео замены радиатора печки “десятки” старого образца.
Видео замены радиатора печки нового образца.
Кстати, при замене печки отопителя можно воспользовавшись случаем заменить и салонный фильтр ВАЗ 2110, что бы потом все заново не разбирать. Это поможет ощутить в салоне свежий воздух и теплоту отремонтированной печки ВАЗ 2110.
Добавить комментарий
Отменить ответДля отправки комментария вам необходимо авторизоваться.
Автомобили концерна ВАЗ пользуются значительной популярностью среди водителей благодаря достойным техническим характеристикам, соответствию цены и качества, отличной ремонтопригодности. Большинство неисправностей, которые случаются во время эксплуатации, водителя могут исправить самостоятельно без помощи профессионалов.
В этой статье речь пойдёт о ремонте отопителя транспортного средства, который является одним из слабых мест в автомобилях отечественного производства, а именно рассмотрим, как заменить вышедший из строя резистор печки ВАЗ-2110.
Функции и назначение резистора
Резистор часто применяется во многих электросхемах транспортного средства. Основная его функция — это контроль и распределение подаваемого тока к элементу его потребления, в этом случае к печке машины.
В автомобилях источником подачи тока является аккумулятор, который вырабатывает необходимый электрический заряд для функционирования всех электроэлементов транспортного средства. Резистор, в свою очередь, трансформирует ток в нужные пределы величины напряжения для бесперебойной работы той или иной детали. Если преобразователь тока приходит в негодность, то на печку будет подаваться напряжение больше, чем требуется для её работы, и система отопления салона работать не будет. А также от большого напряжения может произойти перегорание деталей отопителя, которые работают на токе.
Схема функциональности детали простая. Изначально ток вырабатывается в аккумуляторе машины и подаётся на резистор печки. Он трансформирует его в необходимую величину напряжения для качественной работы отопителя.
Причинами выхода из строя преобразователя могут быть большие нагрузки на него в случае длительной эксплуатации печки на максимальных оборотах, неисправность проводки. А также качество резистора и соответствие месту назначения влияет на срок его службы.
Способы диагностики исправности резистора печки
Бывают случаи, когда отопитель транспортного средства перестаёт работать на пониженных скоростях и функционирует только в усиленном режиме. Это и есть главный показатель выхода из строя резистора.
Дело в том, что ВАЗ-2110 оборудован преобразователем тока, который оснащён двумя спиралями. Первая из них имеет сопротивление 0,23 Ом и отвечает за работу печки на первой скорости, вторая спираль с сопротивлением 0,82 Ом обеспечивает возможность включать среднюю скорость печки. При неисправности детали включается только максимальный режим отопления салона.
Дополнительный резистор транспортного средства напрямую отвечает за возможность переключения скоростей отопителя, потому, если печка вашего автомобиля работает только на максимальном режиме, значит, необходимо заменить преобразователь тока.
Замена резистора отопителя ВАЗ-2110 своими руками
Для того чтобы заменить резистор, важно понимать, где именно он располагается. Деталь находится с правой стороны от печки за вакуумным усилителем. Первым делом перед началом работы надо отсоединить аккумулятор от питания, для этого снимается минусовый провод с клеммы.
Дальнейшие работы производятся в салоне автомобиля. Изначально необходимо демонтировать облицовку и накладку лобового стекла. После этого снимается звукоизоляционная обивка с правой стороны панели машины. Для получения хорошего доступа к преобразователю надо демонтировать вакуумный усилитель.
Обзору открылся дополнительный резистор отопителя. Дальше следует отсоединить колодку с проводкой от контактов преобразователя. Запомните, каким именно образом она подключена, чтобы правильно осуществить сборку по окончании работы. Подсоединить колодку можно только в одном положении.
Прежде чем приступить к замене изделия, необходимо проверить его работу с помощью омметра. Для проверки функциональности детали снимать её нет необходимости. Последовательно соедините контакты преобразователя и омметра сначала на первой спирали, потом на второй. Если показатели сопротивления значительно отличаются от оптимального значения для корректной работы устройства, значит, изделие подлежит обязательной замене.
Часто причиной выхода из строя детали является отсоединение предохранителя, находящегося на плате резистора. Теоретически, продлить жизнь элемента можно, припаяв контакты предохранителя на место. Однако такая работа отличается значительными трудностями, так как к креплению контактов предохранителя очень неудобно добираться за счёт очень маленького расстояния между платой и самим преобразователем.
Цена на качественный резистор не очень высокая, потому правильным решением будет его замена новой деталью. Предварительно перед заменой приобретите новое изделие в специализированном магазине. Не покупайте детали с рук или на стихийных рынках. Только качественное изделие может гарантировать бесперебойную работу отопительной системы салона автомобиля. На ВАЗ-2110 устанавливается изделие с идентификационным значением РДО 2110-8118022-01. Приобретайте изделия, которые соответствуют вашей марке автомобиля, это обеспечит правильное преобразование тока и корректную работу системы отопления салона.
Для демонтажа изделия необходимо открутить с помощью крестовой отвёртки саморез крепления. Аккуратно вынимается деталь, вышедшая из строя, и на её место устанавливается новый преобразователь. На этом замену можно считать выполненной. Остаётся только подключить колодку и разъёмы на место, произвести монтаж облицовки ветрового стекла в обратном порядке.
И ещё один важный совет
Проводите замену резистора сразу же после выявления его неисправности.
Эксплуатация печки машины после поломки дополнительного преобразователя тока может повлечь за собой очень серьёзные проблемы. При выходе из строя детали отопитель очень часто продолжает функционировать на максимальных оборотах. В холодное время года водителя могут не придавать значения неисправности и использовать печку, несмотря на поломку преобразователя.
Длительная работа отопителя на усиленных оборотах может стать причиной перегорания мотора печки или возгорания проводки автомобиля вследствие прохождения высокого напряжения через устройства, которые работают от силы тока.
Подведём итоги
Одним из важных элементов, который влияет на функциональность печки автомобиля, является резистор. Он выполняет важную функцию по распределению силы тока от аккумулятора к электроэлементам отопителя. При выявлении проблемы с функционированием преобразователя тока изделие подлежит обязательной замене.
Не игнорируйте неисправность деталей, которые имеют отношение к току, — это может быть небезопасно для вашей жизни. Сразу же после выявления неполадки устраняйте её причину.
Смотрите все объявления в архиве |
Признаки неисправности датчика дроссельной заслонки и ее проверка. Признаки неисправности датчика положения дроссельной заслонки Как прозвонить датчик положения дроссельной заслонки
Владельцам автомобилей ВАЗ-2110 часто приходится ремонтировать свой автомобиль. Следствием ремонтных работ могут быть как значительные поломки, так и мелкие неисправности. В каком виде поломки неисправен датчик положения дроссельной заслонки? Что эта деталь отвечает в машине? Как определить, что именно этот элемент перестает правильно работать? Об этом читайте в нашей статье.
Что это за ДПДЗ в автомобиле ВАЗ-2110
Сокращенный датчик положения дроссельной заслонки принято среди автомобилистов называть ДПДЗ. Этот элемент используется в нескольких типах двигателей:
- Бензиновый впрыск.
- Тип МОНОВПРИСК.
- Дизельные двигатели.
DPDZ еще известен как потенциометр дроссельной заслонки. Это связано с тем, что датчик предназначен для работы в качестве переменного резистора. Сам датчик установлен в подкапотном пространстве — легенда фиксации — сопло дроссельной заслонки.Механизм датчика следующий: в зависимости от того, в каком положении и степени открытия находится дроссельная заслонка, изменяется и изменяется сопротивление. То есть уровень величины такого сопротивления зависит от нажатия педали газа. Если педаль не нажимать, дроссельная заслонка будет закрыта, и сопротивление будет наименьшим. С открытым клапаном наоборот. Соответственно, нагрузка на ДПДЗ, которая прямо пропорциональна сопротивлению, также изменится.
Управлением такими изменениями занимается электронная система Control, именно она принимает все сигналы от ДПДЗ и подает топливо с помощью топливной системы.
Итак, при максимальном напряжении сигнального контакта датчика положения дроссельной заслонки топливная система автомобиля ВАЗ-2110 будет отдавать наибольшую порцию топлива.
Таким образом, чем точнее показатели с ДПДЗ, тем лучше электронная система ВАЗ-2110 настраивает работу двигателя на правильный режим его работы.
Связь дроссельной заслонки с другими автомобильными системами ВАЗ-2110
Дроссельная заслонка автомобиля ВАЗ-2110 является составной частью системы впуска двигателя и напрямую связана с большим количеством других систем автомобиля.К ним относятся следующие системы:
- курсовая работа;
- антиблокировочная;
- антимонопольный;
- abosput;
- круиз-контроль.
Кроме того, есть те системы, которые управляются электроникой коробки передач. Ведь именно эта дроссельная заслонка регулирует подачу воздуха в систему автомобиля и отвечает за качественный состав топливно-воздушной смеси.
Дизайн ДПДЗ.
Датчик положения дроссельной заслонки бывает двух типов:
- пленка;
- магнитный или бесконтактный.
По своей конструкции он напоминает воздушный клапан — в открытом положении давление соответствует атмосферному, в закрытом — опускается до состояния вакуума. В ДПДЗ входят резисторы постоянного и переменного тока (сопротивление каждого 8 Ом). Процесс открытия и закрытия заслонки контролируется контроллером, после чего регулируется подача топлива.
Если проявляется хотя бы один признак неисправности в системе функционирования этого датчика, то топливо может быть подано как в избытке, так и в недостаточности.Подобные неисправности двигателя отражаются на двигателе автомобиля ВАЗ-2110 и его коробке передач.
Характерные признаки неисправного состояния ДПДЗ
Благодаря правильному функционированию датчика положения дроссельной заслонки топливная система двигателя автомобиля ВАЗ-2110 работает с сглаживающим эффектом. То есть автомобиль движется плавно, и педаль газа хорошо отзывается на нажатие. Поэтому неисправность ДПДЗ практически сразу можно увидеть по следующим признакам:
- Неудачный запуск двигателя.
- Заметное увеличение расхода топлива.
- Автомобиль движется с перебоями.
- Заметный холостой ход Двигатель в запущенном состоянии.
- Загорится сигнал на приборной панели Check E
- Автомобиль плохо разгоняется из-за задержек в разгоне.
- Каттон во впускном коллекторе.
Конечно, эти признаки неисправного состояния датчика могут наблюдаться не все сразу. Но даже если вы заметили только один из этих признаков, стоит провести компьютерную диагностику автомобиля в сервисном центре.
Проблемы ДПДЗ и их диагностика
Как известно вечные запчасти на авто еще не придумали. И может быть предусмотрена разбивка ДПДЗ, для этого нужно спросить возможные причины Неисправность этой детали. Вот основные из них:
- Истирание напыляемого слоя основы, служащего для перемещения ползуна (результат — неверные результаты показаний ДПДЗ).
- Вытекание сердечника катящегося типа (следствие — износ контактов ползуна и резистивного слоя).
Как то само непонимание с этим датчиком? Для этого вы можете провести самостоятельную диагностику своего диагноза:
- Слушайте двигатель ВАЗ-2110 на холостом ходу:
- поломка очевидна, если вы заметите, что его обороты находятся в «плавающем» состоянии;
- Резко сбросить педаль газа:
- неисправность присутствует, если после этого действия двигатель остановится.
- Наберите скорость:
- Проблема ДПДЗ в том, что автомобиль начинает двигаться с рывками, что свидетельствует о нерегулярной подаче топлива в систему.
Специалисты утверждают, что датчик часто выходит из строя при сильном загрязнении резистивной дорожки или ее полного обрыва. Для уверенности нужно проверить рабочее состояние ДПДЗ.
Проверка датчика положения дроссельной заслонки
Чтобы самостоятельно проверить ДПДЗ, не нужно вызывать электрика для консультации. Для этого нужен мультиметр или вольтметр. Далее специалистам предлагаются пошаговые инструкции Проверка датчиков.
Шаг первый — нужно повернуть ключ в замке зажигания, убрать индикаторы напряжения между контактом ползунка датчика и «минусом».В нормальном состоянии показатель будет до 0,7 В.
Шаг второй — нужно перевернуть пластиковый сектор и открыть заслонку, после чего опять замеры. В нормальном состоянии датчика прибор покажет результат от 4 В.
В представленной статье будет рассмотрен датчик положения дроссельной заслонки, диагностика и признаки неисправности DPDZ , а также его ремонт.
Датчик положения дроссельной заслонки
Итак, если вам интересно, как устроен датчик положения дроссельной заслонки, то стоит рассмотреть принцип его работы.
Датчик положения дроссельной заслонки относится к типу датчиков резистивного типа. Это название определяет принцип его работы, а именно, если этот датчик разбирать, то внутри мы обнаруживаем подвижный элемент в виде ползунка, который скользит по траектории в виде дуги или подковы. На один из концов этой дорожки подается напряжение питания, другой конец дорожки подключается к массе, а выходной сигнал снимается с подвижного ползуна.
Неисправность датчика положения дроссельной заслонки:
Какие неисправности датчика положения дроссельной заслонки чаще всего встречаются на практике? При сбрасывании неисправностей связанные с подвесными проводами подходят к датчику и тому подобное.Вы можете выделить основную и наиболее частую неисправность датчиков этого типа, а именно это износ резистивного слоя на дорожках, по которым скользит ползун. Как правило, наблюдается износ на начальном участке движения слайдера из-за наиболее частого использования этого сайта. Если разобрать датчик дроссельной заслонки, то в большинстве случаев при визуальном осмотре будет заметен износ резистивного слоя, как на представленном фото.
Напряжение подается на датчик 5В. с автомобильным компьютером, однако при измерении напряжения вы увидите, что на датчике напряжение изменилось от 0,3-0,5. В одном положении и выше 3,7-4,8 В при полностью открытом положении дроссельной заслонки. Это делается для того, чтобы ЭБУ определил неисправность в цепи датчика, будь то короткое замыкание.
В отдельных моделях автомобилей могут применяться датчики положения дроссельной заслонки с обратной характеристикой выхода , то есть напряжение при закрытии дроссельной заслонки будет максимальным, а при открытии дроссельной заслонки будет падать.
Также следует отметить, что на автомобилях, где положение дроссельной заслонки устанавливается с помощью электропривода (в народе называется «электронная педаль»), в указанных моделях положение дроссельной заслонки определяется единицей, и сразу два потенциометра , которые объединены в одно устройство. Неважно, установлена ли электронная педаль только в режиме холостого хода или во всем диапазоне. Один из двух потенциометров имеет обратную выходную характеристику, а второй — прямую выходную характеристику.На таких системах также можно встретить концевой микровыключатель, который срабатывает в момент, когда педаль акселератора полностью отпускается водителем.
Как определить неисправность датчика положения дроссельной заслонки без разборки датчика и снять его с автомобиля:
Неисправность датчика положения дроссельной заслонкилегко определить с помощью сканера , motorTeter или простого мультиметра . В этой статье мы рассмотрим пример обнаружения неисправности с помощью сканера.
Обратите внимание, что все устройства, кроме MotorTesther, не смогут обнаружить неисправность в износе резистивного слоя, кроме очень сильных и протяженных участков, т.к., как правило, только MotorTeter успевает отобразить диаграмму в правильном виде. , сканер из-за низкой скорости обмена с ЭБУ не сможет обнаружить поврежденные участки с малой продолжительностью занятия на графике с десятых секунд.
Итак, перейдите к сканеру, чтобы удалить параметры в реальном времени, затем перейдите в раздел Удаление точки положения дроссельной заслонки в процентном соотношении или напряжении на датчике, затем запустите медленно Откройте дроссельную заслонку и следите за выходными сигналами из сканер.Эти показания удобнее всего удалять в режиме осциллограммы, если, конечно, ваш сканер не поддерживает эту функцию. Данные с сенсора должны расти медленно, без скачков и резких перепадов. Если нарастание сигнала имеет резкие сбои или рост, это свидетельствует об износе резистивного слоя на дорожках сенсора.
Не обращайте внимания на незначительные изменения осциллограммы, это может быть вызвано дрожью вашей руки. Также следует отметить, что при невысокой скорости обмена веществ между сканером и компьютером автомобиля имеется пропускающий слой резистивной дорожки, если он очень короткий, но это скорее исключение, чем правило.
При снятии датчика с автомобиля не лишним будет промыть дроссельный узел, отложения на стенках которого тоже могут помешать нормальной работе датчика.
Ремонт датчика положения дроссельной заслонки
Восстановить изношенный резистивный слой на гусеницах, в бытовых условиях невозможно , значит, единственный Метод ремонта без замены датчика или дорожек — это возможность смещения резистивных дорожек в некоторых датчиках относительно ползуна.Для этого в датчике предусмотрен специальный винт, фиксирующий то или иное положение дорожек относительно ползуна, так что, допустим, при сильном износе резистивного дорожного слоя мы можем, ослабив винт, сместить его в недоступную для ползунка область. и таким образом избежать замены датчика положения дроссельной заслонки.
Признаки датчика положения дроссельной заслонки
В случае износа резистивного слоя в зависимости от места износа автомобиль может вести себя по-разному. Может наблюдаться нестабильная работа Автомобиль на холостом ходу, машина может просто трепать на холостом ходу, либо при нажатии на педаль акселератора могут возникать сбои в движении или наоборот, рывки и грохот.
Также в некоторых случаях при замене штатного датчика положения дроссельной заслонки на некачественный аналог может наблюдаться зависимость датчика от температуры, то есть по мере нагрева корпуса DPDP выходное значение будет меняться. Например, на холодном двигателе датчик имеет выходное напряжение около 500 мВ ЭБУ поддерживает это значение как положение закрытого дросселя и приступает к стабилизации скорости холостого хода. После нагрева корпуса датчика выходное значение меняется на 560 мВ , ЭБУ не понимает, что это напряжение холостого хода.он сохранил 500 мВ и не стабилизирует холостой ход.
При этой неисправности может на короткое время помочь выключить зажигание с последующей переобучением двигателя, чтобы компьютер сохранил новое выходное значение как положение закрытой дроссельной заслонки.
Вы можете установить наличие неисправности датчика положения дроссельной заслонки, измерив выходное значение на холодном двигателе (который не проработал не менее 2,5 часов) и на прогретом двигателе. Если значение сильно отличается, то есть место, где может быть этот дефект и датчик необходимо поменять на лучший.
Статья о том, как проверить ДПДЗ и РЧЧ, а также их проводку, не снимая дроссельный узел с автомобиля. Попутно проводим общую диагностику состояния дроссельного узла в целом.
Очень много в последнее время обращается к вопросам о перекрестках Лачетти в различных режимах работы двигателя. Чаще всего эта проблема проявляется при нажатии или отпускании педали газа. Соответственно, под подозрение сразу попадает дроссельный узел. Поэтому меня озадачил вопрос — как помочь братьям Лачеводам в проверке этого узла.Кстати, это актуально не только для Лачетти, но и для других автомобилей.
Все манипуляции проводились на моем Лачетти 1.6, поэтому подходят и на Лачетти 1.4. Так как у них такая же конструкция дроссельного узла, в отличие от Лачетти 1.8. Но суть проверки аналогична полностью, могут отличаться только цифры замеров.
Как известно, на Шевроле Лачетти 1.4 и 1.6 датчик положения дроссельной заслонки и регулятор холостого хода собираются одним целым числом в дроссельном узле и соответственно меняют сборку, что очень дорого.Следовательно, вам нужно в основном диагностировать неисправность.
Как проверить DPDZ и RHX
Проверить работу дроссельной заслонки тремя способами:
- замена заведомо хорошей — это самый точный способ
- омметр.
- компьютер диагностический
Первый способ рассматривать не будем, так как он настолько очевиден. Остановимся на втором и третьем.
Как проверить датчик положения дроссельной заслонки мультиметром
Глядя на схему, в левом верхнем углу видим нужный нам объект «Регулятор холостого хода»
Перед нами простейшая схема, состоящая из двойного ризостата (переменное сопротивление), переключателя и электродвигателя.Говоря простым языком, суть работы этого чудо-устройства такова: когда мы нажимаем педаль газа, то сразу открывается переключатель режима ХХ (обычный конфликт) и двигатель переходит в другой режим работы в зависимости от степень открытия дроссельной заслонки. Эта степень открытия ЭБУ определяется изменяющимся сопротивлением реостата. Когда отпускаем педаль газа, выключатель снова замыкается и дает понять ЭБУ, что нужно включить режим холостого хода.Компьютер переходит в режим ХХ и регулирует его с помощью электродвигателя, который открывает дроссельную заслонку на определенный угол для поддержания заданных оборотов. При этих значениях наблюдается вторая часть реостата.
Какие поломки могут возникнуть в этом простом механизме:
- выключатель неисправности
- трещины и истирание токопроводящего слоя референта
- напротив Переостата
- цепь, обрыв или увеличение сопротивления проводки
- неисправность двигателя
Для быстрой проверки всех этих возможных неисправностей необходимо снять разъем с ЭБУ.Как это сделать, описано в статье
Для проверки DPDZ необходимо подключить омметр к 74 и 79 Plug Contact ECU
.Видим сопротивление чуть больше 700 Ом
Теперь плавно поворачиваем дроссельную заслонку и смотрим на омеме. Они тоже должны плавно увеличиваться. Вы даже можете использовать стрелочный прибор для более точного измерения плавности изменений.
Скачков быть не должно. Если есть скачки — значит, токопроводящее покрытие загрязнено или имеет трещины, или ваша рука переживает
После того, как вы запустите демпфер до упора, значение должно увеличиться более чем на 1200 Ом
Внимание! В самом конце можно подскочить сопротивление примерно до 1300 Ом, а затем выставить показания на значение примерно 1200 Ом.Они этого не боятся.
Так как щуп не покрывается контактами ЭБУ, я подключил щуп по проводам. А то мне пришлось держать их одной рукой, второй крутить заслонку, а на третьей фото
Учтите, что провода и зонд должны быть тонкими! В противном случае существует опасность демонтажа контактов в блоке ЭБУ!
В общем, датчик ДПДЗ Проверил. Теперь проверьте положение датчика регулятора ХХ. Для этого подключите омметр к 43- и 79-контактному разъему ЭБУ.Видим похожие показания
Показания сопротивления датчика положения ПЧ при вращении не могут быть изменены, а сопротивление может незначительно отличаться от моего. Потому что, поворачивая дроссельную заслонку, мы не влияем на положение регулятора RXH. Чтобы повернуть этот регулятор, необходимо снять крышку с дроссельного узла. Здесь главное наличие сопротивления порядка 600 — 650 Ом, что говорит об отсутствии обрыва в цепи датчика положения РСХ.Если есть обрыв, то придется отдельно заезжать провода и при их целостности — разбирать дроссельный узел. Но бывает крайне редко.
Теперь проверьте переключатель холостого хода. Для этого подключите омметр к контактам 19 и 55 EBU
.При отпускании педали газа сопротивление должно стремиться к 0 — контакт замкнут, а при нажатии на педаль сопротивление должно быть бесконечным — контакт размыкается.
Если с этими размерами проблем нет, значит, механизм должен быть добротным.
Советую при проверке этого переключателя проверить жгут проводов от ЭБУ к двигателю, так как здесь часто можно встретить
Как проверить компьютерную диагностику ДПДЗ
В этом случае все намного проще. Что вам понадобится для такой диагностики, указано в товарной позиции
.В программе нам нужно всего два параметра:
- положение дроссельной заслонки
- дроссельная заслонка открыта / закрыта
Для проверки датчика положения дроссельной заслонки необходимо медленно и плавно нажать на педаль газа.При этом график положения ДЗ также должен быть плавным и без сбоев расти. Без сбоев и скачков
При полном нажатии на педаль газа степень открытия дроссельной заслонки должна быть не менее 70%. Хотя показаний встретил чуть меньше. Самый минимальный, который я видел, было 66%, хотя все было нормально и правильно настроено. Поэтому ориентируйтесь на значения 66% -73%.
При резком нажатии и отпускании график должен повторить ваши действия.Это не должно быть
Вот очевидные горячие / зависание дроссельной заслонки.
Проверка переключателя холостого хода осуществляется попеременным нажатием / отпусканием педали газа. График в параметре «Throttle Clamp» должен четко реагировать на ваши действия, не пропуская их.
А теперь остановимся на проверке регулятора холостого хода, т.е. на электродвигателе в дроссельном узле. Это тоже можно косвенно проверить.
На нашем форуме обсуждается очень интересный случай с RXX, связанный с.Было очень странно, что этот мотор сохранился, что было видно по диагностическим журналам.
Для проверки проводки, щеток и обмоток двигателя нужно подключить внутреннюю часть омметра к 61-му и 62-му
Показания амперметра должны составлять 3-5 Ом
В моем случае показания были 4,4 Ом (1 Ом — сопротивление самих щупов). Если сопротивление выходит за эти пределы, необходимо прозвонить отдельно два провода питания мотора RXX — от 61-го контакта блокировки ЕС до 1-го контакта дроссельной заслонки и от 62-го контакта блоков ЭБУ. до 5-го контакта дроссельного узла.
Мне нравится 22+Участников, которым понравился этот пост.
Для обнаружения неисправности датчика дроссельной заслонки начнем с самого устройства. Не секрет, что этот элемент работает в тесном взаимодействии с двигателем автомобиля, поэтому находится в непосредственной близости от него. Сначала найдите сопло дроссельной заслонки, а это оставьте самому ДПДЗ. Датчик одной стороной закреплен на патрубке, а другой соединен с осью дроссельной заслонки дроссельной заслонки.
Как распознать поломку: основные симптомы
Автовладелец должен знать, как определить неисправность ДПДЗ.Сделать это несложно, но для точного определения неисправности стоит знать ее симптомы и своевременно на них реагировать. К основным признакам неисправности датчика следует отнести:
- Имеются проблемы на ХХ при работе мотора (качающиеся обороты).
- Двигатель глохнет в момент перевода селектора КПП (при отключении оборотов во время движения).
- Увеличивает расход топлива.
- Имеется нестабильность оборотов ХХ вне зависимости от режима работы мотора.
- Заметно уменьшена мощность двигателя.
- Стержень войлочный, при разгоне и при движении на малой скорости.
- Двигатель глохнет при отпускании педали акселератора (на холостом ходу).
В некоторых случаях неисправности, связанные с выходом из строя датчика дроссельной заслонки, проявляются обращением к контрольной лампе «Check Engine», расположенной на панели приборов и сигнализирующей о наличии проблем с двигателем. При этом лампочка может периодически загораться (с этим моментом разберемся ниже).Каким бы ни был симптом неисправности, он может указывать на проблему и необходимость принятия соответствующих мер по ее устранению. В такой ситуации важно сразу выполнить некоторую работу (об этом ниже).
На фото где находится ДПДЗ
Как проверить работоспособность датчика?
Если во время работы появляется один или несколько признаков, упомянутых выше, можно предположить, что DPDC неисправен. В первую очередь необходимо проверить ДПДЗ в исправном состоянии.Выполнение данных работ не требует от автовладельца специальной подготовки. Главное, четко представлять последовательность действий и иметь под рукой многофункциональный прибор (мультиметр).
Стоит напомнить, что лампочка Check Engine предназначена для напоминания водителю о наличии проблем с двигателем. Когда загорает, стоит обратиться к сотне или самостоятельно выявить неисправность. При отсутствии ошибок лампа загорается в момент запуска мотора, а после завершения диагностики сразу гаснет.Если этого не произошло (лампочка продолжает светиться), значит, в системе проблема, и без опытного мастера не получится.
Кстати, приведенная выше информация носит скорее общий характер. Что касается неисправности датчика ДПДЗ (дроссельной заслонки), то здесь требуется действовать по такому алгоритму:
- Прежде всего выключите зажигание. Осуществите приборную панель и убедитесь, что лампочки Check Engine отсутствуют. Как уже отмечалось, эта лампа является прямым напоминанием водителю о наличии проблем.Если он вымер, откройте капот, чтобы получить доступ к ДПДЗ, и проверьте устройство.
- Подготовьте мультиметр, с помощью которого будет производиться дальнейшая поверка.
- Проверить наличие «минуса».
- Если нет желания отливать каждую проволоку, облегчите — проткните нужные провода и замерьте. Аналогичные шаги для поиска «Масса». Зажигание, в процессе проверки, не требуется.
После подготовительных работ ваша задача — проверить факт подачи питания на ДПДЗ.Стоит исходить из того, что напряжение напрямую зависит от модели автомобиля. Для одних машин это 5 вольт, а для других — 12. Для определения неисправности ДПДЗ действовать по следующему алгоритму:
- Включите зажигание и попеременно протыкайте провод нужной цепи. На дисплее мультиметра должен появиться параметр 0,7 В.
- Откройте дроссель дроссельной заслонки вручную и посмотрите на прибор. Теперь напряжение должно быть выше 4 вольт.
- Выключите зажигание и выбросьте один разъем. Сразу после этого подключите мультиметр dipstream — между оставшимся проводом и выводом с ползунка.
- Прокрутите сектор вручную и следите за показаниями прибора. Если они растут без резких скачков, датчик дроссельной заслонки работает исправно, неисправностей нет. В противном случае можно говорить об образовании лома (поломки) на дорожке резистора.
Указанные выше показатели важны, так как напрямую влияют на правильную работу блока ЭБУ.Задача этого электронного устройства — управление основными процессами мотора, в том числе подача топлива к форсункам. Если блок управления получает неверные номера, то и их решения ошибочны. Например, дроссельная заслонка полностью открыта, а блок управления двигателем все еще видит ее в закрытом положении. При наличии подобных симптомов неисправность ДПДЗ очевидна и прибор необходимо заменить.
Датчик положения дроссельной заслонки
Описанных процедур для выявления поломки не всегда достаточно.В некоторых случаях могут потребоваться дополнительные проверки для устранения неисправностей в будущем. При выявлении одной из следующих проблем датчик лучше заменить. К тому же стоимость устройства невысока, и после замены такая долговременная стабильность появится в работе мотора.
Обратите внимание на следующие моменты:
- Состояние переменного резистора пленочного типа. Если на дорожках устройства ДПДЗ есть поломки или потертости, электронный блок Control получает ошибочные параметры.
- Происходит ли нормальное размыкание контактов ХХ.
Съел по результатам проверки, все-таки удалось выявить факт неисправности, и вы заменили датчик дроссельной заслонки, то в дополнительной настройке прибора (после завершения установки) нет нет необходимости. Нулевая метка для детали находится на холостом ходу, когда дроссельная заслонка заблокирована. Следовательно, привлекать к работе специалиста необязательно — справитесь самостоятельно.
ПОЧЕМУ может сломаться датчик ДПДЗ?
Важно понимать, что это может привести к повреждению рассматриваемого датчика. Конечно, полностью устранить неисправность невозможно, но снизить проблемы до минимума вполне реально.
Причины неисправности ДПДЗ:
- Ползунок теряет контакт с резистивным слоем. Причина — поломка наконечника, из-за чего на подложке появляются стили, а потом выходят из строя и остальные элементы.При этом датчик может продолжать работать (правда, с отказами) — до того момента, пока резистивный слой не будет возведен вообще. В итоге ядро ломается окончательно. Заметить такую неисправность на ДПДЗ не всегда удается, поэтому проблема может и дальше маскироваться под другие неприятности. Например, у автовладельца могут возникнуть подозрения на некачественное топливо или другие проблемы.
- Линейного увеличения выходного напряжения не происходит. Это возможно при стирании устройства до основания, в точке начала движения ползунка.
Обратите внимание, что при такой неисправности дополнительных сигналов, свидетельствующих о наличии проблем датчика дроссельной заслонки, не предусмотрено. Следовательно, единственное, в чем должен ориентироваться автовладелец — устойчивость мотора в различных режимах.
Видео: Как проверить датчик дроссельной заслонки Дэу Матиз
Видео: Как проверить ДПДЗ Шевроле Лачетти
Если видео не отображается, обновите страницу или
Речь пойдет о том, как диагностировать датчик положения дроссельной заслонки (ДПДЗ) ВАЗ 2110.
Такое устройство, как датчик положения дроссельной заслонки ВАЗ 2110 Это потенциометр, передающий контроллеру информацию о положении ДЗ. Положение заслонки зависит от нажатия на педаль газа. На выходе датчика положения дроссельной заслонки постоянно меняется напряжение, которое контролирует контроллер и по полученным данным определяет дозу подачи топлива. Если ДПДЗ неисправен, искаженную информацию получит контроллер. Это приведет к переполнению и перебоям в работе двигателя.
ДПДЗ находится в моторном отсеке прямо на дроссельной заслонке. Он соединяется с осью ДЗ.
Что такое датчик положения дроссельной заслонки. Как проверить ДПДЗ ВАЗ 2110?
Индикаторы неисправности датчика:
- На холостом ходу начинают плавать обороты;
- При разгоне возникают рывки, ухудшается динамика;
- Двигатель внезапно останавливается на средних оборотах;
- Мигает сигнальная лампочка.
Причины неисправности ДПДЗ ВАЗ 2110
Самая частая причина поломки — уменьшение толщины слоя основы цоколя в том месте, где начинается прохождение бегунка.В связи с этим становится невозможным линейное увеличение возникающего выходного напряжения.
Также ознакомьтесь
Также ДПДЗ ломает неисправность подвижного сердечника. При повреждении одного из наконечников на подложке появятся множественные петли, что приведет к выходу из строя остальных наконечников. Следствием этого является потеря контакта ползуна со слоем резины.
Проверка датчика положения ВАЗ 2110 в домашних условиях
Что такое датчик положения дроссельной заслонки.Как проверить ДПДЗ ВАЗ 2110?
- Включите зажигание, вольтметром измерьте напряжение, возникающее между знаком «-» и контактом бегунка. Показания не должны быть больше 0,7 В.
- Пластиковый сектор необходимо повернуть, чтобы крышка полностью открылась. После этого снова измерить натяжение. Оно должно быть больше 4 В.
- Включить зажигание на полную мощность, вытащить разъем. Теперь нужно измерить сопротивление, возникающее между контактом бегунка и любым из выводов.
- Медленно вращая сектор отследить показания вольтметра.Движения стрелки должны быть плавными. Если он начинает прыгать, ДПДЗ неисправен.
Как забрать ДПДЗ
Наибольшую популярность у автомобилистов имеют пленочно-резистивные ДПДЗ. Стоимость их невелика, но прочностью они похвастаться не могут.
инфекций, вызванных Scedosporium spp.
(i) Синопульмональные инфекции.
Следуя наиболее распространенному пути проникновения, через дыхательные пути, и неконтролируемые подавленным иммунным ответом, конидии scedosporium могут прорастать и вторгаться гифы, обычно вызывая некротическую пневмонию.За исключением случаев утопления, это очень редкое событие у иммунокомпетентного хозяина (217, 370).
Среди клинических признаков синопульмональной инфекции, вызываемой Scedosporium spp., Лихорадка является единственным наиболее частым клиническим признаком и симптомом в большинстве исследований, колеблющийся от 76 до 100% (73). Другими частыми клиническими симптомами были одышка и плевритная боль в груди. Рентгенологические данные грудной клетки варьировали от очаговых односторонних до двусторонних диффузных инфильтратов и от узелков до бронхопневмонии.В многочисленных публикациях рассматриваются клинические проявления легочного P. boydii (16, 160, 258, 259, 327, 387, 407, 455), Scedosporium apiospermum (73, 126, 233, 304, 351, 390, 432) и S. prolificans (35, 170, 204, 233, 257, 265, 354, 470) инфекции. Симптомы включают лихорадку, продуктивный кашель, кровохарканье, хрипы и хрипы. Уже к моменту постановки диагноза скедоспориозная пневмония у многих пациентов могут быть кожные проявления диссеминированного заболевания.Такие проявления могут проявляться в виде макулопапулезной сыпи или узелковых поражений, которые могут увеличиваться в размерах и становиться некротическими. Другими частыми проявлениями являются миалгии и очаговые признаки ЦНС (208), лежащие в основе потенциального быстрого гематогенного распространения скедоспория из легочного участка.
Синусит может иметь место как у иммунокомпетентных, так и у пациентов с ослабленным иммунитетом (174). Такие проявления широко варьируются, с локализованным поражением слизистой оболочки, которое относительно легко лечить, по сравнению с инвазивной деструктивной инфекцией, которая требует длительного лечения и сочетания различных методов лечения.В качестве примера можно привести случай 77-летней женщины из Мэриленда с историей рецидивирующего синусита в течение 30 лет, которая отметила постоянную боль над правой гайморовой пазухой. Хотя было назначено лечение назальным деконгестантом и триметоприм-сульфаметоксазолом, через 6 месяцев после появления симптомов было создано назоантральное окно. Аспират иглы из правой гайморовой пазухи содержал зеленоватый материал с ветвистыми перегородками гиф. Участие слизистой оболочки не оценили. Культура не проводилась.Из-за постоянных болей через 3 месяца была проведена компьютерная томография (КТ), и процедура Колдвелла-Люка позволила удалить большой объем зеленоватого материала. Снова гистопатологическая оценка показала массу запутанных перегородок гиф с разветвлением под углом 45 ° и нормальной слизистой оболочкой дыхательных путей. В культуре выросло P. boydii . Через семь месяцев после операции контрольная компьютерная томография показала, что правая верхнечелюстная пазуха чиста. Симптомы исчезли с помощью хирургического дренирования (463).Результаты являются прямой функцией иммунного статуса хозяина (80). Абсцесс мозга, вызванный S. apiospermum , был диагностирован посмертно у ребенка женского пола с хроническим гнойным средним отитом и отсутствием другого иммунодефицита (2).
(ii) Внелегочные инфекции.
( a ) Кожные и подкожные инфекции. Pseudallescheria boydii / S. apiospermum и S. prolificans могут быть этиологическими агентами других локализованных инфекций, таких как кожные инфекции.Эти инфекции, скорее всего, являются результатом местной инокуляции грибка в кожных и подкожных тканях, обычно у людей с некоторой степенью иммунодефицита (например, от стероидной терапии или терапии иммунодепрессантами) (79, 154, 156, 240, 253, 293, 296, 323, 353, 448, 475, 482). Кожные инфекции, вызываемые Scedosporium spp. могут имитировать инфекции, вызванные Aspergillus spp., поскольку каждый может проявляться экхимозом, некротическими папулами и геморрагическими пузырями (53). Клинически они также могут проявляться в виде солитарных язв, инфильтративных эритематозных бляшек и узелков или гнойных узелков и язв по споротрихоидному (лимфангиитному) типу (297, 445).Локализованное кожное заболевание, вызванное S. apiospermum / P. boydii у лиц с ослабленным иммунитетом (36, 49, 53, 79, 114, 156, 299, 432, 455).
Сообщалось также, что Scedosporium prolificans вызывает местное заболевание (154). У хозяина с ослабленным иммунитетом (люди, получающие хроническую стероидную терапию по поводу хронической обструктивной болезни легких или фиброза легких или получающие иммуносупрессивную терапию по поводу ревматоидного артрита), инфекции мягких тканей, вызванные S.prolificans находятся на подъеме (35, 124, 312, 423). Сообщалось о синдроме узлового лимфангита или лимфокожного синдрома, вызванном Scedosporium apiospermum (61, 180, 221, 229, 445).
Инфекции мягких тканей могут быть начальным проявлением болезни или признаком гематогенного распространения. Многочисленные другие кожные проявления, такие как язва кожи, узелки, подкожные абсцессы, фолликулит и буллезно-некротическая пурпура, были описаны в инфекциях Scedosporium (297).Как и в случае с другими инфекциями плесени, растущее число лиц с сильной иммуносупрессией и более частое использование инвазивных процедур могут объяснить увеличение числа кожных инфекций скедоспориума. Клиническая картина может вводить в заблуждение, как в случае 25-летней иммунокомпетентной женщины, которой был ошибочно поставлен диагноз туберкулезный лимфаденит, когда у нее развилась шейная и подчелюстная лимфоаденопатия, которая не поддалась лечению противотуберкулезной терапией. Только после повторной биопсии лимфатического узла с тщательным гистологическим исследованием образца, окрашенного метенамином серебра Грокотта-Гомори, были обнаружены разветвленные септатные гифы, и культура гриба выросла на S.apiospermum , был поставлен правильный диагноз (221).
Различить кожное и подкожное поражение может быть сложно, так как прилегающая кожа может иметь некоторую степень вовлечения в явно подкожный инфекционный процесс (6, 22, 35, 36, 46, 47, 52, 53, 57, 79, 82 , 114, 124, 129, 154, 156, 166, 167, 202, 218, 222, 228, 229, 253, 255, 260, 293, 296, 297, 299, 314, 323, 337, 343, 353, 381 , 392, 398, 416, 419, 440, 445, 448-450, 461, 475, 482).
( b ) Кости , мышцы , и инфекции суставов .Остеомиелит, септический артрит или раневые инфекции обычно возникают при нарушении барьеров после травмы или хирургического вмешательства (253, 297). Имеются многочисленные сообщения об инфекциях у иммунокомпетентных людей, включая остеомиелит, дискит и артрит (95, 145, 155, 245, 268, 409, 443, 476), обычно после глубокого распространения местного заболевания. Среди хозяев с ослабленным иммунитетом поражение костей и суставов с большей вероятностью будет вторичным по отношению к гематогенному распространению гриба (242).Большинство пациентов с инфекцией суставов в анамнезе имели местную травму, местное хирургическое вмешательство или внутрисуставное применение стероидов (428). Клиническая картина локализованной инфекции, поражающей сустав, — это острый септический артрит с пятью признаками флогоза: отек, эритема, боль, потеря функции и локализованное повышение температуры. Классическое описание септического артрита с поражением костей, вызванных P. boydii или Scedosporium spp. находится у молодого мужчины с проникающей травмой мягких тканей вокруг коленного сустава в анамнезе.После тяжелой иммуносупрессии (у пациентов с ослабленным иммунитетом) или проникающих травм, местного хирургического вмешательства или инъекций кортикостероидов (у иммунокомпетентных пациентов) возникают болезненность, эритема и воспаление. Обычная рентгенография может быть нормальным явлением на ранних стадиях инфекции, но магнитно-резонансная томография (МРТ) может выявить выпот в сустав и усиление синовита, а иногда и субкондральную костную ткань, что может свидетельствовать о раннем остеомиелите. Симптомы могут присутствовать в течение короткого периода времени, от нескольких дней до недель, и организм не может быть идентифицирован до тех пор, пока не будет проведен посев суставной жидкости или синовиальная биопсия.Случай Scedosporium apiospermum пиомиозит развился через 1 год после того, как у пациента с острым миелобластным лейкозом был дискит, остеомиелит поясничных позвонков и артрит грудино-ключичного сустава во время лихорадки и нейтропении (320).
( c ) CNS . У хозяина с ослабленным иммунитетом инфицирование P. boydii / Scedosporium spp. возникают в тех же клинических условиях, что и аспергиллезные инфекции: у пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями и у пациентов, получающих иммунодепрессанты, включая циклоспорин, азатиоприн, такролимус и кортикостероиды.Наличие признаков и симптомов объемного поражения, таких как головная боль, лихорадка и очаговые неврологические расстройства, позволяют предположить наличие абсцесса головного мозга (7, 9, 110, 137, 216, 310, 329, 375, 465). У пациентов, у которых развивается инфекция, вызванная P. boydii / Scedosporium apiospermum , после почти утопления, как правило, клинические признаки и симптомы развиваются в течение от нескольких дней до нескольких недель после пагубного события. Часто эти пациенты пережили первоначальное острое повреждение легких и эпизоды бактериемии или сепсиса, которые были диагностированы и пролечены после госпитализации.Метастатические поражения кожи могут предвещать фунгемию. Могут быть обнаружены единичные или множественные абсцессы головного мозга.
Менингит, вызванный P. boydii , является необычным явлением и обычно ассоциируется с иммуносупрессией или близостью к утоплению, устройствами для дренирования спинномозговой жидкости и рахианестезией. Прогноз плохой (летальность> 75%). Менингит обычно протекает остро и приводит к летальному исходу и сосуществует с церебральными инфарктами и / или абсцессами (34). Хронические проявления еще более редки, обычно они возникают у иммунокомпетентных людей; однако прогноз не меняется (17, 216).У иммунокомпетентных людей рахианестезия и раны около ЦНС были идентифицированы как факторы риска развития инфекции ЦНС, вызванной P. boydii . У пациентов с ослабленным иммунитетом менингит и менингоэнцефалит протекают быстрее, несмотря на своевременное лечение (264). Клинические проявления обычно проявляются головной болью и болью в пояснице. Физикальное обследование может показать отек диска зрительного нерва, ригидность шеи, паралич шестого нерва и снижение глубоких сухожильных рефлексов, а также, возможно, двусторонний признак Ласега.ЦСЖ может демонстрировать гиперцеллюлярность, повышенный уровень белка и низко-нормальный уровень глюкозы. Культура CSF может быть отрицательной. КТ черепа может быть нормальным. МРТ позвоночника может показать пояснично-крестцовый арахноидит (344).
( d ) Инфекции глаз . Локализованная инфекция, вызванная травматической инокуляцией грибка, хирургическим вмешательством или непрерывным распространением из соседнего участка, является обычным механизмом, с помощью которого иммунокомпетентные люди заражаются инфекцией Scedosporium в глазу (98, 102, 303, 412, 484).Глазные проявления распространения болезни у лиц с ослабленным иммунитетом более совместимы с эндофтальмитом (130, 281).
Кератит — это еще одна локализованная инфекция, вызываемая этими грибами, которая вызывает значительную заболеваемость и угрожает зрению. Хотя эти инфекции могут быть необычными, в медицинской литературе есть многочисленные сообщения, подтверждающие разрушительные последствия инфекций, затрагивающих роговицу, а иногда и более глубокие ткани глазного яблока (40, 43, 98, 101, 102, 112, 115, 187, 226). , 231, 241, 246, 252, 295, 303, 316, 317, 328, 331, 364, 369, 394, 404, 412, 424, 484, 491).Кератит, возможно, является наиболее частым клиническим проявлением инфекции Scedosporium среди иммунокомпетентных хозяев. Кератит проявляется местной болью, светобоязнью, снижением остроты зрения и слезотечением. Клинические проявления кератита обычно возникают после местной травмы глаза, в частности роговицы, возможно, с небольшой ссадиной или изъязвлением. Коинфекция scedosporium и acanthamoeba была зарегистрирована у 45-летней женщины с контактными линзами и 27-летнего мужчины с предыдущей травмой из-за металлической нити, загрязненной сточными водами (136, 369).
Наиболее частыми клиническими проявлениями микотического кератита, подтвержденного посевом, являются поверхность от серого до не совсем белого цвета, клеточная реакция передней камеры, неровные края, приподнятые границы, сухая шероховатая текстура, сателлитные поражения, десцеметовые складки, гипопион, кольцевой инфильтрат, эндотелиальная бляшка. , и кератитные преципитаты (360). Кератит, вызванный Scedosporium spp. схож с другими типами кератита по предрасполагающим факторам и клиническим проявлениям, но может не поддаваться удовлетворительному ответу только на медикаментозную терапию (442).
Даже при подозрении на инфекцию отсутствие клинических подозрений на грибковую этиологию может задержать точный диагноз и лечение. Более того, клиницисты часто назначают антибиотики и / или стероиды без предварительного культивирования секретов, и в этом случае диагноз еще больше откладывается, что позволяет распространить инфекцию в более глубокие ткани. Воспаление обычно лечат с помощью местных стероидов, которые могут дополнительно ослабить локальную защиту хозяина. Даже при правильном лечении кератит может оставлять остаточные лейкомы, которые могут сильно вывести из строя.(484, 491). Иногда требуется проникающая кератопластика с удалением травматической катаракты и имплантацией интраокулярных линз. Более того, энуклеация глазного яблока была необходима в некоторых агрессивных случаях, которые не отвечали на терапию (231, 303, 404, 424). В других случаях кератита Scedosporium результаты были лучше (187). У 35-летней женщины на стекольном заводе была локальная травма глаза. Через два дня после обследования ее острота зрения составила 20/40, и было отмечено небольшое поверхностное ссадина роговицы без инфильтратов.Был назначен бацитрацин; однако через 2 дня прогрессирование инфильтратов привело к соскобу роговицы, который показал грибковые элементы на влажном образце. Грибковые культуры дали S. apiospermum . Окончательная наиболее скорректированная острота зрения составила 20/50.
Инфекционный склерит, вызванный Scedosporium spp. После операции по удалению птеригиума с дополнительным бета-излучением и митомицином С сообщалось, что оно представляет собой одно из самых сложных осложнений, наблюдаемых после удаления птеригиума (302, 303, 404, 424).Использование этих адъювантных методов лечения может разрушить эписклеральные сосуды и сосуды конъюнктивы, препятствовать адекватному заживлению ран и, следовательно, оставить склеру с уменьшенной способностью противостоять инфекции. Также считается, что использование методики обнажения склеры и чрезмерное применение прижигания также могут способствовать развитию инфекционного склерита (284). Клинические проявления склерита, эписклерита и склерокератита аналогичны: боль в глазах, слезотечение, гнойные выделения из глаз и хемоз.
Эндофтальмит, вызванный P.boydii / Scedosporium spp. сообщалось широко (112, 130, 236, 261, 283, 335, 417). Эндофтальмит можно классифицировать в зависимости от того, как микроорганизм проникает в более глубокие ткани глаза, на эндогенный (путем гематогенного распространения в глаз) или экзогенный (путем прямого попадания грибка во время травмы глаза или операции, либо в результате ранее существовавшего склерита или кератита). Эндогенный эндофтальмит — результат метастатического распространения инфекции из отдаленного участка. Глаз становится мишенью множественных микроабсцессов.Этот тип эндофтальмита чаще встречается у пациентов с ослабленным иммунитетом, пациентов, получающих химиотерапию или полное парентеральное питание, и внутривенно. наркопотребители (67, 130, 133, 259, 283, 335, 451, 482). P. boydii был идентифицирован как этиологический агент в случае эндогенного эндофтальмита от инфицированного свиного аллотрансплантата аортального клапана (417) и даже у пациента без распознаваемых факторов риска (324).
Клиническими проявлениями эндофтальмита обычно являются глазная боль и светобоязнь, а иногда и нечеткость зрения или пятна в полях зрения пациента.При обследовании глазного дна эндофтальмит распознается по наличию одного или нескольких кремово-белых, четко очерченных очагов поражения сосудистой оболочки и сетчатки, часто сопровождающихся воспалительным инфильтратом в камере стекловидного тела. Часто также возникает воспаление передней камеры, проявляющееся в виде гипопиона. У пациентов с эндогенным эндофтальмитом могут быть положительные посевы крови.
Экзогенный эндофтальмит возникает при попадании в глаз микроорганизмов. Пациенты с экзогенным эндофтальмитом редко имеют иммунодефицит (50, 66, 157, 438).Удаление катаракты, установка интраокулярной линзы и трансплантация роговицы — хирургические процедуры, наиболее часто связанные с послеоперационным грибковым экзогенным эндофтальмитом (224). Посттравматический эндофтальмит из-за проникающей травмы роговицы древесной стружкой сделал энуклеацию необходимой для борьбы с инфекцией (438).
Другие глазные инфекции, вызванные P. boydii / Scedosporium spp. которые были зарегистрированы, включают язвы роговицы, мицетому конъюнктивы, кератоувеит, ретинит, кориоретинит, эндофтальмит и инфекции глазницы (20, 43, 210, 220, 226, 227, 281, 295, 364, 424, 438).Сообщается, что другие инфекции глаза, такие как хориоретинит, возникают из локальных лимфатических узлов, инфицированных S. apiospermum () (220).
Реже местная инвазия местного грибкового пансинусита приводит к инфекции глазницы (210). Инфекция орбиты также была связана с проникающей травмой лица, как в случае 10-летнего мальчика, получившего удар деревянной палкой под правый глаз, что привело к образованию свищевого тракта, в котором P.boydii был выделен (318).
( e ) Инфекции кровотока и эндокардит . Инфекция кровотока обнаруживается у двух третей пациентов с диссеминированной инфекцией S. prolificans и S. apiospermum (326). В обзоре скедоспориоза у реципиентов трансплантата Husain et al. (201) сообщили о фунгемии у 40% (4/10) пациентов с S.polificans , по сравнению с 4,7% (2/43) пациентов с инфекциями S. apiospermum .Фунгемия присутствовала у 7 (33%) из 21 реципиента HSCT, по сравнению с 6 (11%) из 56 реципиентов трансплантата органов ( P = 0,04).
Высокая частота инфекций кровотока может быть связана со способностью этих организмов размножаться in vivo и, возможно, с побочными конидициями. Сообщалось, что у реципиентов трансплантата, а также в i.v. потребители наркотиков и даже люди с иммунодефицитом. S. apiospermum был выделен из вегетаций митрального клапана, удаленных хирургическим путем и посевов крови у иммунокомпетентной женщины, получившей несколько тяжелых травм в автомобильной аварии. Тот же грибок был выделен из рваных ран на левой стороне черепа пациента сразу после аварии, примерно 2 месяца назад. Из-за стойкой фунгемии клапан заменили; однако гемодинамическая нестабильность продолжалась. Пациент умер после того, как компьютерная томография показала большой теменно-затылочный абсцесс головного мозга. S. apiospermum был выделен из абсцесса мозга при вскрытии (408). Этот случай иллюстрирует эмболизирующую способность очень маленьких микроструктур, а также соответствующую информацию, которую можно получить с помощью посевов крови при инфекциях, вызванных Scedosporium spp. Клиническое значение этого открытия заключается в том, что значительный процент пациентов может быть диагностирован с помощью посева крови.
( f ) Другие инфекции . Другие клинические синдромы, вызванные Scedosporium spp.включают отомикоз, онихомикоз, хронический простатит, перитонит, эзофагит, почечную инфекцию и гепатоспленочные абсцессы. Об онихомикозе также сообщалось в литературе. В исследовании, проведенном в Испании Garcia-Matos et al., Scedosporium spp. были обнаружены в 3% случаев онихомикоза ногтей на ногах (142).
Датчик холостого хода ВАЗ 2110, 21214, 2107, 2112, 2109, 2115
Слаженная работа ДВС возможна только при исправном состоянии всех составляющих его деталей и механизмов.Для этого в автомобиле установлены различные датчики и подсистемы, среди которых особого внимания заслуживает датчик холостого хода. Что это за деталь и какое значение она имеет для отечественных моделей ВАЗов? Ответы на эти вопросы вы найдете в нашей сегодняшней статье.
Назначение и конструкция
Датчик холостого хода (ВАЗ «Форсунка» 1.6) — устройство, контролирующее холостой ход двигателя. С его помощью двигатель внутреннего сгорания может поддерживать оптимальные условия эксплуатации, тем самым увеличивая срок службы всех его компонентов.
Кроме того, холостой ход может прогреть двигатель до рабочей температуры в холодное время. Таким образом, датчик холостого хода (в том числе ВАЗ 2110) играет далеко не последнюю роль в работе ДВС двигателя. Кстати, он состоит всего из трех компонентов:
- Весна.
- Шаговый двигатель.
- Ложа с конической иглой на конце.
Более подробная конструкция этого элемента представлена на рисунке ниже:
Как видите, устройство DXH очень простое, поэтому с ремонтом и заменой данного устройства можно справиться лично.
Где находится датчик холостого хода ВАЗ 2107?
На автомобилях семейства ВАЗ датчик холостого хода расположен на корпусе дроссельной заслонки, рядом с механизмом положения дроссельной заслонки. Он фиксируется двумя винтами.
Принцип работы
Суть датчика холостого хода заключается в открытии и закрытии канала, который проходит через заслонку. При работающем двигателе датчик частоты вращения коленчатого вала сообщает контроллеру (информация часто передается с помощью специальных меток) о скорости детали.В свою очередь, контроллер принимает решение: закрыть или открыть вентиль. При этом он руководствуется различными расчетами и алгоритмами. Затем датчик холостого хода получает команду на выполнение. Таким образом, за счет вытягивания / вытягивания стержня с иглой происходит уменьшение или увеличение подачи топлива в двигатель.
Признаки неисправности
На неисправность датчика холостого хода могут указывать следующие признаки:
- «Плавающие» обороты двигателя на холостом ходу.
- Плохой запуск ДВС даже при нажатой педали акселератора.Часто это причина того, что игла датчика закрывает канал.
- При прогреве автомобиля обороты двигателя не увеличиваются.
- Внезапная остановка двигателя на нейтральной передаче.
- Заметное падение оборота после включения энергопотребителей, таких как плита, кондиционер, фары и магнитола.
Перечисляя признаки неисправности датчика холостого хода, следует отметить, что подобные «симптомы» могут быть спровоцированы другими устройствами (например, топливным фильтром или свечами), которые связаны с системой подачи топлива.Поэтому перед заменой датчика холостого хода ВАЗ 2110 необходимо провести диагностику на исправность ряда других важных деталей. Только убедившись в выходе из строя DXH, можно приступать к его замене. В противном случае вся работа не принесет желаемого результата.
Проверка на исправность
Как проверить датчик холостого хода ВАЗ 2110? Для начала нужно найти сам механизм и вытянуть из него жгут проводов. Если ваша машина оснащена двигателем ВАЗ объемом 1,6 литра, открутите два элемента крепления дроссельного узла и снимите его с торца ресивера на 10 миллиметров.
Далее проводим схему датчика и смотрим, подходит ли ему напряжение. Для этого используется обычный вольтметр. Для определения напряжения сначала подключите отрицательную клемму к земле и подключите провода «A» и «D» к клеммной колодке (они часто указаны на клеммной колодке). Теперь включите зажигание и посмотрите на вольтметр: если напряжение на шкале меньше 12 вольт, вероятно, у вас разряжена батарея. Если признаков подачи тока нет, значит неисправна вся цепь или электронный блок управления.
Если вольтметр показал напряжение 12 вольт и более, продолжаем эксперимент. Выключите зажигание и приступайте к проверке датчика холостого хода ВАЗ 2110. Клеммы тестера подключаются к выводам A, B, C и D. При этом общее сопротивление должно колебаться в районе 50-55 Ом. После этого необходимо померить сопротивление попарно — его значения должны быть бесконечно большими. Если датчик холостого хода (например ВАЗ 21214) выдает другие показания, значит, он неисправен, и его необходимо заменить.Если значения соответствуют норме, скорее всего, проблема кроется в свечах или других элементах автомобиля. В этом случае нужно отправиться на СТО для диагностики.
Как проверить DXH на исправность? Метод № 2
Можно использовать альтернативный метод. Для этого полностью снимите датчик холостого хода и подсоедините к нему колодку. Далее, осторожно нажимая пальцем на кончик иглы DXH, проверьте, насколько далеко он отошел. В идеале исправный датчик на момент выключения зажигания полностью выдвигает этот элемент.Таким образом, ваш палец должен почувствовать легкий толчок. Если этого не произошло, значит, устройство неисправно и подлежит замене. Но DXH может и будет восстановлен, однако об этом чуть позже.
Как заменить датчик холостого хода (ВАЗ 2109-2115) своими руками?
Перед началом работ необходимо обесточить бортовую систему автомобиля. Для этого снимите с АКБ отрицательную клемму. Далее отсоединяется разъем с проводами, ведущими к датчику от корпуса дроссельной заслонки.На пластиковую защелку-фиксатор нужно нажать пальцем.
После удаления двух крепежных винтов датчик снимается с сопла. Иногда могут возникнуть проблемы — винт, который находится рядом со ствольной коробкой, при откручивании может выпасть. Чтобы этого не произошло, рекомендуется сначала снять левый механизм крепления, а затем открутить правый. На следующем этапе слегка потяните датчик на себя и открутите правый винт. Благодаря такой последовательности вы не потеряете крепеж и значительно ускорите процесс демонтажа.
Итак, старый датчик успешно снят с автомобиля. Теперь необходимо установить на его место новый. В целом установка DXH производится так же, как и снятие, только в обратном порядке. Однако перед работой специалисты рекомендуют нанести на уплотнительное кольцо несколько капель моторного масла. В этом нет необходимости, но тем самым вы значительно упростите работу по установке датчика на свой автомобиль.
Калибровка механизма
Теперь можно переходить к завершающему этапу — калибровке DXH.На всех отечественных автомобилях эта процедура полностью автоматизирована, поэтому все, что вам нужно сделать, это поставить минусовую клемму, включить зажигание на 5-10 секунд и снова выключить. Все, на этом калибровка датчика успешно завершена. Автомобиль полностью исправен.
Как отремонтировать датчик холостого хода?
В некоторых случаях для восстановления этой детали достаточно ее тщательно очистить. Сама чистка датчика — процесс очень простой, и для ремонта достаточно иметь всего один инструмент WD-40.
Итак, как восстановить датчик холостого хода ВАЗ 2112? На первом этапе откручиваются две гайки дроссельного узла. Последний, как и в случае замены, отводится на 10 миллиметров в сторону. Далее клеммник отключается от датчика. Применяется ватный стик WD-40, которым тщательно очищаются все каналы. Затем с помощью отвертки Phillips откручиваются два болта, фиксирующие датчик холостого хода ВАЗ 2110. Если здесь нет крепежа, то придется снимать весь дроссельный узел.Затем механизм вытаскивается. Если он покрыт маслом и черной грязью, то, кроме очистки DXH, необходимо будет очистить всю дроссельную заслонку.
Далее WD-40 наносится на коническую иглу с пружиной. Таким образом, через несколько минут механизмы датчиков будут очищены от грязи. Затем устройство просушивается, и его можно смело ставить на место. Перед установкой проверяется расстояние от иглы до корпуса устройства (оно должно быть 23 миллиметра). На данном этапе датчик холостого хода ВАЗ 2115 можно считать успешно отремонтированным.Машина снова может работать в штатном режиме.
Итак, мы выяснили, как устроен датчик холостого хода ВАЗ 2114 (и других моделей). И кстати его можно заменить / восстановить.
комбинаций генов Spok создают множественные мейотические драйверы в Podospora
Геномы всех эукариот несут в себе эгоистичные генетические элементы, которые используют различные механизмы, чтобы подорвать канонические способы репликации ДНК и мейоза с целью искажения их собственной передачи (Werren et al., 1988; Берт и Триверс, 2009). Поскольку распространение этих элементов не зависит от регулируемого воспроизводства организма-хозяина, они могут создавать конфликт внутри генома (Rice and Holland, 1997). Теория предсказывает, что такой внутригеномный конфликт будет стимулировать гонку вооружений между геномом и элементами и, следовательно, действовать как главный двигатель эволюционных изменений (Werren, 2011). Чтобы понять, в какой степени внутригеномный конфликт сформировал эволюцию геномов и популяций, крайне важно определить эгоистичные генетические элементы, которые могут влиять на динамику естественных популяций.
Один важный класс эгоистичных генетических элементов известен как мейотические драйверы. Эти элементы используют множество механизмов, чтобы захватить мейоз, чтобы смещать их передачу к гаметам в пропорциях, превышающих 50% (Sandler and Novitski, 1957). Это искажение сегрегации аллелей может быть трудным для наблюдения, если оно не связано с очевидным фенотипом, таким как пол (Sandler and Novitski, 1957; Helleu et al., 2014), таким образом, преобладание мейотического влечения в природе, вероятно, недооценивается.Тем не менее, мейотический драйв наблюдался во многих модельных системах, включая Drosophila , Mus , Neurospora и Zea mays , что позволяет предположить, что он широко распространен во всех основных группах эукариот (Lindholm et al., 2016; Bravo Núñez et al., 2018b). У грибов-аскомицетов мейотический драйв проявляется в форме уничтожения спор, что представляет собой наиболее прямой способ наблюдения наличия влечения (Turner and Perkins, 1991). Когда штамм, обладающий ведущим аллелем, спаривается с совместимым штаммом, который не несет аллель (т.е., чувствительный штамм), продукты мейоза (аскоспоры), которые несут ведущий аллель, будут вызывать прерывание спор их родственных братьев, не имеющих этого аллеля. Убийство спор очевидно в половых структурах (асках) грибов, потому что оно приводит к половине нормального количества жизнеспособных спор. Из-за гаплонтического жизненного цикла большинства грибов уничтожение спор необычно для мейотических драйверов, поскольку это единственная система, в которой потомство организма погибает от влечения (Lyttle, 1991).Кроме того, за некоторыми исключениями (Hammond et al., 2012; Svedberg et al., 2018), элементы-убийцы спор, по-видимому, управляются одним локусом, который обеспечивает как гибель, так и устойчивость (Grognet et al., 2014; Nuckolls et al. , 2017; Hu et al., 2017), что контрастирует с другими хорошо изученными приводными системами, которые включают участки генома размером с целые хромосомы (Larracuente and Presgraves, 2012; Hammer et al., 1989).
Часто ожидается, что мейотические драйверы относительно быстро закрепятся или исчезнут в популяциях (Crow, 1991), после чего эффекты движущих сил перестанут быть заметными.В соответствии с этим ожиданием, большинство описанных драйверов демонстрируют большие сдвиги частот как во времени, так и в пространстве (Lindholm et al., 2016; Carvalho and Vaz, 1999). Было обнаружено, что в случае убийц спор в пределах одного вида сосуществуют несколько факторов. Эволюционная динамика множественных движущих сил внутри видов до конца не изучена, но известны два противоположных примера. В геномах Schizosaccharomyces pombe обнаружены многочисленные копии как функциональных, так и псевдогенизированных версий генов-драйверов wtf (Nuckolls et al., 2017; Hu et al., 2017; Eickbush et al., 2019). Напротив, два убийцы спор Sk-2 и Sk-3 из Neurospora intermedia были описаны у диких штаммов только четыре раза и один раз, соответственно, тогда как устойчивость к уничтожению спор широко распространена (Turner, 2001). Влияние нескольких факторов, сосуществующих в одной популяции, не было охарактеризовано ни в одном из этих случаев.
Известно, что природные популяции мицелиальных грибов Podospora anserina являются хозяевами множества убийц спор (Grognet et al., 2014; ван дер Гааг и др., 2000; Hamann and Osiewacz, 2004), и, следовательно, представляют собой идеальную систему для исследования взаимодействий между водителями на популяционном уровне. Первым геном-киллером спор, описанным в P. anserina , был ген het-s , ген, который также участвует в аллораспознавании (Dalstra et al., 2003). Другой класс генов-убийц спор в Podospora известен как гены Spok . Spok1 известен только от единственного представителя P.comata , вид, который тесно связан с P. anserina , тогда как было показано, что Spok2 существует с высокой частотой среди штаммов французской популяции P. anserina (Grognet et al., 2014). Spok1 способен убивать в присутствии Spok2 , но не наоборот, что указывает на доминантные эпистатические отношения между двумя генами. Кроме того, с помощью классического генетического анализа было идентифицировано семь генотипов убийц спор (van der Gaag et al., 2000). Они обозначаются как Psk-1 — Psk-7 и были определены путем наблюдения за наличием, отсутствием и частотой убитых спор при определенных скрещиваниях французских и голландских штаммов P. anserina (вставка 1 — рисунок 1). . В начале этого исследования не было известно, представляют ли элементы Psk независимые гены мейотического драйва, или они могут быть связаны с Spoks и / или локусами аллоузнавания. Сам ген het-s не связан с геном Psk s, но его аллораспознавание коррелирует с уничтожением спор Psk (van der Gaag et al., 2003). С другой стороны, отношения между Spok напоминают иерархию убийств среди Psk s, предполагая возможную связь между активностью генов Spok и Psk s.
Вставка 1.
Семь отдельных Psk определяются их процентом уничтожения спор и взаимным взаимодействием.
Чтобы понять, как процент уничтожения спор связан с типами штаммов Psk , необходимо сначала оценить некоторые фундаментальные аспекты биологии Podospora .Внутри плодового тела (перитеция) дикариотические клетки подвергаются кариогамии с образованием диплоидного ядра, которое немедленно вступает в мейоз. После мейоза происходит один раунд постмейотического митоза, в результате которого образуются восемь дочерних ядер. Ядра упаковываются вместе со своими несестринскими ядрами из митоза (пунктирная линия) для образования дикариотических самосовместимых спор. В скрещивании, в котором родительские штаммы несут два альтернативных аллеля для данного интересующего гена (один из которых обозначен красной меткой на хромосоме), могут быть получены споры, которые являются либо гомоаллельными, либо гетероаллельными для гена, в зависимости от тип сегрегации.В частности, если нет события рекомбинации между геном и центромерой, ген подвергается сегрегации первого деления (FDS), и родительские аллели совместно сегрегируются во время мейоза I, генерируя гомоаллельные споры (i). Таким образом, FDS гена, убивающего споры, приведет к образованию аска с двумя спорами (ii). Если происходит событие рекомбинации между интересующим геном и центромерой, происходит сегрегация вторым делением (SDS). В этом случае будут образовываться гетероаллельные споры (i). Для уничтожения спор по-прежнему будет производиться аск с четырьмя спорами, потому что для обеспечения устойчивости требуется только одна копия убийцы спор (ii).Поскольку SDS зависит от рекомбинации, частота SDS связана с относительным расстоянием от центромеры и может использоваться для картирования сцепления. Когда происходит уничтожение спор, процент двухспоровых асков является частотой FDS и называется «процентом уничтожения спор». Psk s были описаны путем скрещивания различных штаммов и оценки их процента уничтожения спор в каждом скрещивании. Было показано, что семь уникальных самолетов Psk взаимодействуют в сложной иерархии, демонстрируя либо доминирующее взаимодействие, либо взаимное сопротивление, либо взаимное уничтожение.(См. Приложение 1 для получения более подробной информации и Рисунок 4 — Приложение к рисунку 1 для воспроизведения иерархии, представленной в van der Gaag et al., 2000).
https://doi.org/10.7554/eLife.46454.004Основная цель этого исследования состояла в том, чтобы определить идентичность генов, которые ответственны за типы спор-киллеров Psk , обнаруженные в P. anserina , и связаны ли они с известными генами мейотического драйва. Мы идентифицировали два новых гомолога Spok ( Spok3 и Spok4 ) и показали, что эти два, вместе с ранее описанным Spok2 , представляют генетическую основу убийц спор Psk .Новые Spoks встречаются в больших новых регионах, которые могут быть обнаружены в разных местах генома у разных штаммов. Наши результаты проливают свет на основную генетику полиморфной системы мейотического влечения и расширяют наши знания об их механизме действия.
границ | Идентификация и характеристика медиаторов толерантности к флуконазолу у Candida albicans
Введение
Candida видов являются основными грибковыми патогенами, которые могут вызывать опасную для жизни системную инфекцию, известную как инвазивный кандидоз. Инфекция Candida связана с высоким уровнем смертности, несмотря на лечение противогрибковыми препаратами. Терапевтические неудачи могут быть частично объяснены приобретением резистентности после лечения (Pfaller and Diekema, 2010). Азолы, и особенно флуконазол (FLC), по-прежнему широко используются для лечения грибковой инфекции, включая инфекции C. albicans (Berman and Krysan, 2020). Механизмы устойчивости к FLC широко изучены (Morschhäuser, 2016). Однако, несмотря на обширные знания об этих механизмах, приобретение устойчивости не объясняет всех терапевтических неудач.Действительно, было замечено, что некоторые изоляты, идентифицированные как чувствительные к FLC in vitro , нельзя эффективно лечить у пациента. Известно, что некоторые клинические изоляты C. albicans переносят присутствие FLC больше, чем другие. Они характеризуются усиленным ростом, известным как остаточный рост, при концентрациях лекарственного средства выше их минимальной ингибирующей концентрации (МИК). Этот остаточный рост, который является характеристикой толерантности к лекарствам, в целом не связан с повышенным МПК (в отличие от резистентности) и, как полагают, способствует приобретению механизмов резистентности за счет увеличения выживаемости примерно C.albicans после обработки. Толерантные изоляты также могут быть источником повторного заражения после прекращения лечения противогрибковыми препаратами (Delarze and Sanglard, 2015).
Несколько механизмов были связаны с толерантностью к FLC в C. albicans в прошлом, даже если четкое определение толерантности еще не было доступно. Было продемонстрировано, что иммунодепрессант циклоспорин может превращать фунгистатическое лекарственное средство FLC в сильное фунгицидное средство in vitro , тем самым отражая потерю толерантности (Sanglard et al., 2003). Циклоспорин А, связанный с циклофилином А ( CYP ), нацелен на кальциневрин, который представляет собой протеинфосфатазу, активируемую кальций-зависимым путем (Sanglard, 2003). Воздействие FLC на делеционный мутант субъединицы А кальциневрина ( CNA / CMP1 ) приводит к сильной потере жизнеспособности, отражающей потерю толерантности к лекарственному средству. Напротив, делеция гена CYP была жизнеспособной в присутствии FLC и циклоспорина A. Кальциневрин регулирует только толерантность к лекарствам, но не резистентность, поскольку присутствие или отсутствие его активности не влияет на чувствительность к лекарствам в анализах чувствительности к лекарствам (Sanglard et al. al., 2003). Путь кальциневрина приводит к активации фактора транскрипции ( CRZ1 ), который, как сообщается, сам по себе изменяет толерантность к FLC (Onyewu et al., 2004; Karababa et al., 2006). Также было показано, что кальциневрин является клиентским белком шаперонного белка теплового шока 90 (Hsp90) (Cowen, 2008). Ингибирование Hsp90 приводит к потере активности кальциневрина и, следовательно, к потере толерантности к FLC, как это наблюдается с мутантом с делецией CNA (Cowen, 2013). В другом исследовании (Luna-Tapia et al., 2015), было показано, что перенос мембраны через позднюю эндосому / пре-вакуолярный компартмент (PVC) оказывает влияние на толерантность C. albicans к FLC. Делеция VPS21 , эндосомальной ГТФазы семейства Rab, участвующей в транспортировке PVC, приводила к усиленному росту в присутствии FLC. Этот усиленный рост проявляется как замедляющий рост в стандартных анализах чувствительности, что указывает на потенциальную роль Vps21 в толерантности к азолам. Кроме того, мутант VPS21 содержал аномально высокие уровни внутриклеточного Ca 2+ , что потенциально увеличивало базальный уровень экспрессии и / или активации кальциневрина (Luna-Tapia et al., 2015). Также было замечено, что Rta3, предполагаемая липидная транслоказа, совместно активируется с переносчиками множества лекарственных средств транскрипционным фактором TAC1 в устойчивых штаммах C. albicans . В то время как делеция RTA3 увеличивает восприимчивость к FLC, сверхэкспрессия RTA3 приводит к повышению толерантности, характеризующемуся замедленным ростом восприимчивого штамма C. albicans SC5314 (Whaley et al., 2016). Недавно сообщалось, что FEN1 и FEN12 , два C.albicans гены, участвующие в биосинтезе сфинголипидов, могут быть вовлечены в толерантность к FLC. Действительно, делеция FEN1 или FEN12 приводила к повышенной толерантности в присутствии FLC. Повышенная выживаемость мутантов была связана с увеличением внутриклеточной концентрации FLC и снижением уровня в плазматической мембране токсичного стерола 14-метилэргоста-8,24 (28) -диен-3,6-диола, ответственного за токсический эффект FLC в C. albicans . Эти изменения в концентрациях токсичных стеролов отражаются высоким уровнем сфинголипидов, которые улучшают прочность клеточной мембраны (Gao et al., 2018). Другое недавно опубликованное исследование выявило механизм толерантности, включающий реакцию pH через путь Rim. Этот путь включает Rim9, Rim21 / Dfg16, Rim8, Rim20 и Rim13. При нейтрально-щелочном pH этот каскад приводит к расщеплению C-концевого ингибирующего домена фактора транскрипции Rim101, что приводит к его активации. Уже известно, что pH культуральной среды влияет на уровень толерантности in vitro (Marr et al., 1999), и было замечено, что толерантность снижается в кислых условиях, в то время как в нейтральных условиях на нее не влияет (pH 6-7). ).Фенотипический и транскриптомный анализ пути Rim показал, что все белки Rim важны для толерантности к FLC, поскольку их соответствующие делеционные мутанты проявляют повышенную чувствительность к FLC (Garnaud et al., 2018). Транскриптомное сравнение мутанта с делецией RIM101 и штамма дикого типа при щелочном и кислом pH привело к идентификации двух нижестоящих мишеней Rim101, включая HSP90, и IPT1. Уже известно, что HSP90 участвует в противогрибковой толерантности в отличие от IPT1 , который кодирует фермент, участвующий в биосинтезе самого распространенного сфинголипида в плазматической мембране [манноза- (инозитол-P) 2-церамид] (Garnaud и другие., 2018). Интересно, что Ipt1 является частью пути биосинтеза сфинголипидов и расположен ниже Fen1 и Fen12, оба из которых были описаны как медиаторы толерантности к FLC (см. Выше). Эти данные, таким образом, подтверждают идею, что гомеостаз сфинголипидов имеет отношение к толерантности к FLC у C. albicans . В дополнение к этим генотипическим / фенотипическим отношениям недавние исследования показали, что толерантность к FLC может развиваться у клинических штаммов из разных субпопуляций (Rosenberg et al., 2018).
Даже если перечисленные выше механизмы могут привести к толерантности к азолам, точные молекулярные основы толерантности до сих пор полностью не поняты. Более того, не было доказано, что большинство этих механизмов опосредуют толерантность клинических изолятов. Переносимость может обеспечить лучшую выживаемость C. albicans при высоких концентрациях лекарственного средства. Сильное давление отбора, вызванное введенными лекарствами, и стойкость, возникающая в результате остаточного роста, могут способствовать приобретению механизмов устойчивости и в конечном итоге могут привести к неудаче лечения.Раскрытие генетических и эпигенетических механизмов, лежащих в основе толерантности, и открытие медиаторов толерантности являются важными шагами для разработки потенциальных ингибиторов, которые в сочетании с FLC могут предложить новые стратегии борьбы с инфекциями, вызванными Candida .
В этом исследовании мы сначала адаптировали стандартизированный метод микроразведения для измерения толерантности в подмножестве клинических изолятов C. albicans . Затем мы обратились к идентификации медиаторов толерантности к FLC, используя стратегию сверхэкспрессии гена в лаборатории C.albicans штамм. Эта стратегия уже оказалась эффективной при идентификации генов, связанных с образованием биопленок и колонизацией кишечника (Znaidi et al., 2018). Начиная с ограниченного пула из генов C. albicans , мы смогли идентифицировать по крайней мере два фактора транскрипции ( CRZ1 , GZF3 ) в качестве медиаторов толерантности к FLC. Один из них, CRZ1 , фактор транскрипции под контролем кальциневринового пути, зависимого от кальция, оказался критически важным в поддержании толерантности к FLC нескольких клинических штаммов.В соответствии с этим открытием мы показали с помощью транскрипционного анализа клинических штаммов, что кальций-зависимый путь кальциневрина стимулировался воздействием FLC.
Материалы и методы
Штаммов, использованных в этом исследовании
Штамм SC5314 дикого типа (WT) и клинические изоляты C. albicans , использованные в этом исследовании, были отобраны из-за их известной чувствительности к FLC и принадлежат коллекции лаборатории Д. Сангларда (дополнительный файл S1). Штаммы SSI были любезно предоставлены M.C. Arendrup (Staten Serum Institute, Копенгаген, Дания) и M. E. Bougnoux (Institut Pasteur, Париж, Франция) предоставили коллекцию штаммов CEC (дополнительный файл S1). Коллекция 572 Tet-индуцибельной сверхэкспрессии со штрих-кодом и обнаруживаемых штаммов C. albicans , использованная в этом исследовании, была любезно предоставлена C. d’Enfert (дополнительный файл S2). Каждый штамм коллекции сверхэкспрессирует определенный ген (или представляющий интерес ген, GOI), кодирующий факторы транскрипции, протеинкиназы, протеинфосфатазы, белки, связанные с репликацией, рекомбинацией и репарацией ДНК, предсказанные белки клеточной поверхности или другие под контролем тетрациклина. .Коллекция была построена, как описано Chauvel et al. (2012). Для тестирования условий культивирования с оптимальной сверхэкспрессией использовали штамм CEC3083, который сверхэкспрессирует люциферазу Gaussia princeps ( gLUC ). Этот штамм был создан параллельно с коллекцией OE, а также предоставлен C. d’Enfert (дополнительная таблица S1) (Chauvel et al., 2012). Клинические изоляты C. albicans , использованные для сверхэкспрессии и делеции кандидатов в регуляторы толерантности, были частью D.Лабораторная коллекция Сангларда (дополнительная таблица S1). Мутанты с делециями CRZ1 и GZF3 , а также двойные мутанты crz1 Δ / Δ, gzf3 Δ / Δ, происходящие из библиотеки делеций фактора транскрипции Хоманна, перечислены в дополнительной таблице S1 (Homann et al., 2009) . Escherichia coli DH5α использовали в качестве хозяина для конструирования и размножения плазмиды.
Среда и условия роста
Все штаммы грибов хранили в 20% глицерине при -80 ° C и обычно выращивали при 30 ° C при постоянном встряхивании (220 об / мин) в полной среде дрожжевого экстракта с пептон-декстрозой (YEPD) (1% бакто-пептон, Difco Laboratories, Базель, США). Швейцария), 0.5% дрожжевой экстракт (Difco) и 2% глюкоза (Fluka, Buchs, Швейцария). При выращивании на твердых планшетах YEPD (YEPDA) добавляли 2% агар (Difco) и планшеты инкубировали при 35 ° C. Бактерии выращивали в бульоне Луриа-Бертани (LB) или на чашках с 2% агаром LB с добавлением 100 мкг / мл ампициллина (AppliChem, Дармштадт, Германия) или 34 мкг / мл хлорамфеникола (Fluka), если необходимо, и инкубировали при 37 ° C.
Для анализа чувствительности к FLC штаммы выращивали в соответствии с рекомендациями EUCAST или CLSI (Институт клинических и лабораторных стандартов [CLSI], 2008; Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам, 2017) в среде RPMI1640 с феноловым красным (Sigma-Aldrich, St .Louis, США) с добавлением 0,2 или 2% глюкозы (Fluka) и буфером 0,33 М морфолинпропансульфоновой кислоты (MOPS). PH доводили до pH 7,5, pH 7, pH 6 и pH 4,5, соответственно, с использованием NaOH или HCl. Исходные растворы были приготовлены в виде двукратного концентрированного RPMI в соответствии с рекомендациями EUCAST (Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам, 2017). RPMI дополнялся или не дополнялся FLC (Toronto Research Chemicals, North York, Canada), доксициклином (Dox) (Sigma-Aldrich) и железом (FeCl 3 ), чтобы при необходимости компенсировать хелатирование железа с помощью Dox (Fiori and Van Dijck, 2012 ).Для анализа люциферазы перед измерением добавляли водорастворимый целентеразин (CTZ, NanoLight Technology, Prolume Ltd. Pinetop, США).
Праймеры и плазмиды
Все праймеры, использованные в этом исследовании, перечислены в дополнительном файле S3. Плазмиды, использованные в этом исследовании, перечислены в дополнительном файле S4. Вставка каждой плазмиды и делеция гена проверяли с помощью ПЦР, как указано в дополнительном файле S3.
Анализы на чувствительность и переносимость FLC
Все анализы чувствительности к FLC были выполнены в соответствии со Справочным методом для определения противогрибковой чувствительности дрожжей в разведении бульона (M27-A3) (Институт клинических и лабораторных стандартов [CLSI], 2008) и методом определения МИК противогрибковых агентов в разведении бульона. для дрожжей (E.DEF 7.3.1) (Европейский комитет по тестированию на чувствительность к противомикробным препаратам, 2017 г.) с небольшими изменениями при необходимости. Анализы чувствительности проводили в 96-луночных планшетах Costar ® с плоским дном (Corning Inc, Corning, США), и рост грибов измеряли спектрофотометрически для обоих методов. Минимальная ингибирующая концентрация (MIC) была определена как первая концентрация лекарственного средства, ингибирующая по меньшей мере 50% роста грибков по сравнению с контролем без лекарственного средства. Штаммы с МПК ниже 4 мкг / мл FLC были определены как чувствительные в соответствии с описанием EUCAST (Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам, 2017).Анализы чувствительности проводили в RPMI при pH 7,5, pH 7, pH 6 или pH 4. Анализы переносимости выполняли в тех же условиях, но с использованием одного фиксированного только при концентрации FLC, как указано в соответствующем эксперименте.
Вкратце, отдельные колонии каждого тестируемого штамма выращивали в течение ночи в среде YEPD при 30 ° C при постоянном встряхивании (220 об / мин). Культуры центрифугировали (5 мин, 4600 об / мин, 4 ° C) и дважды промывали PBS (137 мМ NaCl, 10 мМ фосфат, 2,7 мМ KCl и pH 7,4). Концентрацию клеток оценивали спектрофотометрически (OD 540 нм ) и клетки ресуспендировали при 5 × 10 5 клеток / мл в дистиллированной воде.Затем 100 мкл этой суспензии переносили в лунки 96-луночных планшетов с плоским дном, содержащих 100 мкл 2x RPMI (0,2 или 2% глюкозы для условий CLSI и EUCAST, соответственно) с добавлением 256–0 мкг / мл FLC в двукратные разведения или фиксированные концентрации FLC для получения конечной концентрации клеток 2,5 × 10 5 клеток / мл и концентраций FLC в диапазоне от 128 до 0 мкг / мл (8 мкг / мл для тестов на толерантность) на лунку. Планшеты инкубировали при 35 ° C без встряхивания в течение 24 часов. Рост клеток в каждой лунке измеряли спектрофотометрически (OD , 570 нм, ) с использованием считывающего устройства для микропланшетов (Multiskan Ascent, Thermo Scientific) и сравнивали с контролем без лекарственного средства после корректировки с холостым контролем.Из этих кривых восприимчивости извлекали как MIC, так и индекс толерантности (TI), соответствующие относительному росту (% GC) при 8 мкг / мл FLC, деленному на коэффициент 100 (TI =% GC / 100), для сравнения штаммов. TI используется для определения уровня толерантности тестируемых штаммов.
Чтобы оценить уровень толерантности для каждого штамма коллекции OE и сохранить те же условия по сравнению с анализом обогащения, тесты толерантности коллекции были выполнены при конечной концентрации 32 мкг / мл FLC вместо 8 мкг / мл. .
Конструирование делеционных мутантов и ревертантных штаммов
Клинические изоляты DSY2110, DSY4454, SSI 4622 и DSY4588, а также штаммы WT, штаммы crz1 Δ / Δ и gzf3 Δ / Δ из коллекции Хоманна (Homann et al., 2009) были используется для удаления: (i) URA3 , чтобы трансформировать штаммы с помощью системы OE (Chauvel et al., 2012) и (ii) либо CRZ1 , GZF3 , либо обоих для оценки их роли в толерантности к FLC. .Все делеции генов выполняли путем вставки амплифицированных ПЦР 5′- и 3′-нетранслируемых областей (UTR, 500 п.н.) в плазмиду SAT1 -flipper pSFS2A (Reuss et al., 2004). Подробности о полученных плазмидах можно найти в дополнительном файле S4. URA3 был удален с использованием плазмиды pSFSU1 (дополнительный файл S4). Из-за технических проблем с некоторыми клонами второй аллель был удален путем посева гетерозиготных мутантов на 5-фтороротовую кислоту (5-FOA), чтобы вызвать делецию второго аллеля, как уже описано (Веллингтон и Рустченко, 2005).Для делеции CRZ1 и GZF3 использовали плазмиды pED19-2, pED20-7 и pET2-1 соответственно (дополнительный файл S4). Плазмиду pET2-1 использовали только для удаления второго аллеля GZF3 в DSY5217, в результате чего был получен штамм DSY5252.
Все плазмиды трансформировали в их штаммы-мишени после переваривания Kpn I и Sac I для выделения флиппер-кассеты SAT1 . Трансформанты высевали и отбирали на планшеты YEPD, содержащие 200 мкг / мл нурсеотрицина.Кассета была перевернута, как описано ранее (Reuss et al., 2004). Для проверки делеций генов в выбранных изолятах и наличия аллелей дикого типа в ПЦР использовали специфические для генов праймеры (дополнительный файл S3).
Для создания ревертантных штаммов, в которых CRZ1 и GZF3 были повторно введены на фоне делеционных мутантов, аллели дикого типа из SC5314 и соответствующие 5′- и 3′-UTR (± 500 п.н.) были повторно вставлены путем замены 5 ‘-UTR делеционной плазмиды с помощью амплифицированных генов CRZ1 и GZF3 , что приводит к плазмидам pLB1 и pET3, соответственно (дополнительный файл S4).Затем аллели дикого типа повторно вводили в дополнение к кассете SAT1 -flipper в гомозиготные мутанты путем расщепления плазмид Kpn I и Sac I.
Определение оптимальной концентрации Dox для OE
Чтобы оптимизировать условия культивирования для сверхэкспрессии с коллекцией OE, способность Dox индуцировать OE оценивали с использованием штамма gLUC -OE CEC3083 (дополнительная таблица S1). Вкратце, отдельные колонии выращивали в жидкой среде YEPD при 30 ° C и постоянном встряхивании.Затем культуру центрифугировали (5 мин, 4600 об / мин, 4 ° C) и осадок клеток дважды промывали физиологическим раствором с фосфатным буфером (PBS). Затем клетки ресуспендировали при 7,5 × 10 6 клеток / мл в среде RPMI при pH 7,5, 7, 6 и 4,5. Каждый посевной материал был разделен на пять субкультур и дополнен 100, 50, 10 и 2 и 0 мкг / мл Dox, соответственно. Затем культуры инкубировали в течение 24 ч при 30 ° C при постоянном встряхивании. На следующий день по 50 мкл каждой культуры переносили в лунки черного планшета для микротитрования с плоским дном и половинной площадью.Планшеты помещали в люминометр (FLUOstar Omega, BMG Labtech, Ортенберг, Германия) и вводили 50 мкл 2,5 мкМ водорастворимого CTZ перед измерением активности люциферазы в каждой лунке.
Преобразование дрожжей
Дрожжи трансформировали с помощью процедуры с ацетатом лития, как описано ранее (Sanglard et al., 1996).
Обогащение пула толерантными / устойчивыми штаммами
Чтобы обогатить объединенную коллекцию OE устойчивыми / устойчивыми к FLC изолятами, штаммы выращивали в среде RPMI с 2% глюкозой при pH 6 в присутствии 1 мМ FeCl 3 и с 100 мкг / мл Dox и 32 мкг / мл или без них. мл FLC.Чтобы быть как можно ближе к нашим условиям анализа лекарственной чувствительности (рекомендации EUCAST), клетки культивировали в 96-луночных планшетах, каждая лунка содержала 200 мкл клеточной суспензии в RPMI. Каждое условие соответствует 20 мл культуры.
Вкратце, пул коллекции штаммов 572 инкубировали в течение ночи в YEPD при 35 ° C при постоянном встряхивании. На следующий день клетки центрифугировали (5 мин, 4600 об / мин, 4 ° C) и дважды промывали PBS. Осадок клеток ресуспендировали при 10 7 клеток / мл в RPMI pH 6 и этот посевной материал разделяли на четыре субкультуры по 20 мл.Остатки ночной культуры центрифугировали и осадок замораживали (-20 ° C) перед экстракцией ДНК в конце анализа обогащения для оценки начальной популяции нашего пула (день 0). Четыре субкультуры были соответственно дополнены: (i) 32 мкг / мл FLC, (ii) 100 мкг / мл Dox, (iii) 32 мкг / мл FLC и 100 мкг / мл Dox. Последняя субкультура представляла собой контроль роста, в который не добавляли ни FLC, ни Dox. В каждую субкультуру также добавляли 1 мМ FeCl 3 , чтобы избежать известного синергетического эффекта FLC-Dox (Fiori and Van Dijck, 2012).Затем двести микролитров этих субкультур переносили в каждую лунку 96-луночных планшетов, оставляя две лунки в качестве контроля загрязнения. Затем планшеты инкубировали 24 ч при 35 ° C. Каждый день в течение следующих 5 дней клетки из ночной культуры в 96-луночных планшетах собирали с помощью многоканальной пипетки и собирали в пробирку на 50 мл. Затем культуры обрабатывали, как в день 0. Сначала клетки центрифугировали (5 мин, 4600 об / мин, 4 ° C), дважды промывали PBS и ресуспендировали при 10 7 клеток / мл в 20 мл свежей RPMI в четырех новых. Пробирки на 50 мл перед добавлением FLC, Dox и FeCl 3 .Остальные ночные культуры центрифугировали еще раз и осадок замораживали (-20 ° C) до экстракции ДНК.
Экстракция геномной ДНК
Геномную ДНК получали сферопластингом из осадка замороженных клеток согласно Calabrese et al. (2000).
Усиление штрих-кодов
Чтобы оценить присутствие штамма в разных популяциях, BC каждой клетки амплифицировали с помощью ПЦР для секвенирования в соответствии с протоколом подготовки библиотеки метагеномного секвенирования 16S (Illumina, Inc., Сан-Диего, США) рекомендации по добавлению так называемых выступающих последовательностей Illumina к ампликонам (дополнительный файл S3). Однако, чтобы избежать ошибок во время секвенирования из-за сходных фланкирующих областей ампликонов BC, к прямым праймерам были добавлены спейсерные основания (0, 4, 8 и 12 N) для сдвига сигнала во время секвенирования (дополнительный файл S3). Вкратце, приблизительно 12,5 нг экстракции ДНК использовали для амплификации BC с использованием ДНК-полимеразы Phusion High-Fidelity (New England Biolabs, Ipswich, США) в соответствии с рекомендациями производителя.Единственная модификация подготовки образцов заключалась в использовании четырех прямых праймеров вместо одного (дополнительный файл S3), каждый из которых был разбавлен до соотношения 1: 4. ПЦР проводили в термоциклере peqSTAR 2x (Peqlab-VWR, Radnor, США) по следующей программе: 3 мин при 95 ° C, затем 30 циклов при 95 ° C, 57,9 ° C и 72 ° C в течение 30 с. каждый. Окончательное удлинение проводили в течение 5 мин при 72 ° C. Чтобы повысить качество наших образцов, все продукты ПЦР были загружены в 1% агарозный гель для электрофореза и представляющие интерес полосы были очищены с использованием набора NucleoSpin ® Gel and PCR Clean-up (Macherey-Nagel, Düren, Германия), после чего рекомендации производителя.
Подготовка библиотеки и секвенирование
Создание библиотеки было выполнено в Лозаннском центре геномных технологий (LGTF, Университет Лозанны — Центр интегративной геномики, Лозанна, Швейцария). Библиотеки были подготовлены с использованием протокола 16S Metagenomic Sequencing Library Preparation () (Illumina) в соответствии с рекомендациями производителя. Одностороннее секвенирование с помощью MiSEQ Illumina 300 п.н. было выполнено на библиотеках LGTF.
Количественное определение штрих-кода
Количественная оценка популяций по штрих-коду из анализа обогащения пула проводилась с использованием сценария, разработанного Марион Патхот.Каждая секвенированная библиотека была выведена в виде файла FASTQ. Для обработки данных секвенирования был настроен конвейер биоинформатики с использованием языка программирования Perl (версия 5.24.0) и оболочки bash (версия 3.2.57 для Mac OS X 10.11.16). Вкратце, конвейер подсчитывает наличие известных последовательностей штрих-кода в файле FASTQ путем запуска MegaBLAST. В конвейер есть два входа: файл FASTQ и текстовый файл, содержащий имя и последовательность каждого штрих-кода. Оба файла сначала конвертируются в формат FASTA. Затем каждая последовательность штрих-кода выравнивается с каждым считыванием файла FASTQ.Выравнивание допускало 8 несовпадений. Конвейер выводит появление каждого штрих-кода в виде текстового файла. Данные последовательности обрабатывались с использованием разработанного конвейера. Счетчики для каждой временной точки и условия были объединены в один текстовый файл с помощью bash Shell. Затем была рассчитана доля каждого штамма в популяции и нанесена на график с использованием программного обеспечения с открытым исходным кодом R (v. 3.2.4). На втором этапе подсчеты были проанализированы с использованием статистического руководства WT для исследований DMS, описанного Matuszewski et al.(2016). Этот подход рассчитывает выбор оценщиков коэффициентов, используя логарифмические отношения количества отсчетов для деформаций к количеству отсчетов для эталона.
Экстракция РНК
РНК экстрагировали согласно Amorim-Vaz et al. (2015). Вкратце, отдельные колонии каждого тестируемого штамма выращивали в течение ночи в среде YEPD при 30 ° C при постоянном встряхивании (220 об / мин). Культуры центрифугировали (5 мин, 4600 об / мин, 4 ° C) и дважды промывали PBS (137 мМ NaCl, 10 мМ фосфат, 2.7 мМ KCl и pH 7,4). Концентрацию клеток оценивали спектрофотометрически (OD 540 нм ), и клетки ресуспендировали при 5 × 10 5 клеток / мл в дистиллированной воде. Затем 100 мкл этой суспензии переносили в лунки 96-луночных планшетов с плоским дном, содержащих 100 мкл 2x RPMI (2% глюкозы) с дополнением или без 16 мкг / мл FLC для получения конечной концентрации клеток 2,5 × 10 5 клеток / мл и 8 мкг / мл FLC на лунку. Каждое тестируемое условие соответствовало целому 96-луночному планшету и составляло примерно 18.Всего 8 мл культуры. Планшеты инкубировали при 35 ° C без встряхивания в течение 24 часов. Все нуклеиновые кислоты экстрагировали механическим разрушением с использованием стеклянных шариков и разделения фенол-хлороформ, как описано ранее (Amorim-Vaz et al., 2015). Перед обработкой ДНКазой нуклеиновые кислоты хранили при -80 ° C. Геномную ДНК удаляли обработкой ДНКазой с использованием набора для удаления ДНК без ДНК (Thermo-Fisher Scientific) в соответствии с рекомендациями производителя, и образцы хранили при -80 ° C.
Секвенирование РНК и анализ данных RNAseq
Подготовка и секвенирование библиотеки были выполнены LGTF, а секвенирование — в системе Illumina HiSeq 2500 (Illumina) с использованием TruSeq Stranded RNA, 125 bp single read protocol.Анализ проводился с тремя биологическими повторностями для каждого условия. Данные RNAseq обрабатывали с использованием CLC Genomic Workbench Version 10.1.1 (Qiagen, Hilden, Германия). Считывания были сопоставлены с геномом C. albicans SC5314, а количество считываний нормализовано с использованием метода квантильного подхода. Все условия сравнивались друг с другом и фильтровались в соответствии с определенным статистическим порогом, как описано в разделе «Результаты». Исходные данные могут быть доступны под номерами биопроектов PRJNA638239 и PRJNA638870.
Программное обеспечение и статистический анализ
Графический и статистический анализ выполняли в GraphPad Prism 7.03 (GraphPad Software, Inc., Ла-Хойя, США). Онлайн-программное обеспечение Morpheus использовалось для создания тепловых карт для скрининга профиля допусков.
Результаты
Оптимизация условий культивирования для определения толерантности к FLC
Существует несколько методов определения профилей противогрибковой чувствительности определенных изолятов Candida .Большинство из них основаны на анализах диффузии лекарств либо в твердой агаризованной среде, либо в жидких условиях, причем каждый протокол имеет свое определенное считывание конечной точки (Pappas et al., 2018). Несмотря на то, что они преследуют одну и ту же цель (т. Е. Определение чувствительных и устойчивых изолятов), каждый метод имеет свои преимущества и недостатки. Действительно, в зависимости от вида Candida и тестируемого препарата один протокол может быть более оптимальным, чем другой. Метод идентификации и количественной оценки толерантности к FLC на агаризованной среде уже был предложен (Gerstein et al., 2016). Здесь мы сосредоточились на идентификации толерантности с использованием стандартизированных анализов чувствительности в микротитровальных планшетах (предложенных EUCAST и CLSI), поскольку это может быть реализовано и воспроизведено в большинстве лабораторий.
Сначала мы выполнили анализы лекарственной чувствительности нескольких клинических изолятов, о которых известно, что они проявляют устойчивость к FLC и / или другой паттерн остаточного роста (или «замыкающий») в тестах EUCAST и CLSI на чувствительность к FLC с небольшими модификациями. Запаздывающий рост теперь будет называться феноменом, связанным с толерантностью.Мы также провели анализ чувствительности к FLC при значениях pH 7,5, 6 и 4,5, поскольку сообщалось, что pH культуральной среды может влиять на уровень толерантности (Marr et al., 1999). Результаты показали, что оба метода сопоставимы с точки зрения категоризации штаммов. Тестируемые штаммы явно проявляли повышенную толерантность к FLC, когда питательная среда становилась кислой (дополнительный рисунок S1). Тестируемые клинические изоляты SSI 1489, SSI 4622 и SSI 6028 могут быть отнесены к категории чувствительных во всех тестируемых условиях, что представлено их МПК ниже клинической точки разрыва (CBP) 4 мкг / мл для FLC в C.albicans , за исключением изолята SSI 2503, который был известен как устойчивый к FLC (дополнительный файл S1). Изолят SSI 5579 был более неоднозначным, поскольку его относительный рост находился около 50% относительного порога роста при ингибирующих концентрациях лекарственного средства для СЛЦ. Снижение роста все еще может наблюдаться при низких концентрациях FLC (0–0,125 мкг / мл FLC) и, таким образом, указывает на то, что этот штамм можно рассматривать не как устойчивый, а скорее как высокотолерантный к FLC. Подводя итог, можно сказать, что каждый штамм явно демонстрировал разный уровень толерантности выше МПК, в диапазоне от низких значений относительного роста (1-2% по сравнению с контролем без лекарств) до примерно 50% в зависимости от штамма и тестируемых условий (дополнительные Рисунок S2).Мы отразили эти уровни толерантности с помощью так называемого индекса толерантности [TI = относительный рост (%) / 100], основанного на измерении роста штаммов при фиксированной концентрации супра-МПК FLC 8 мкг / мл (рис. 1). .
Рисунок 1. Сравнение протоколов CLSI и EUCAST для идентификации толерантных изолятов. Сравнение проводили при pH 7,5, 6,0 и 4,5 ( A – C , соответственно) для оценки влияния pH на толерантность, как указано Marr et al. (1999). (D) Представляет корреляцию между обоими подходами с соответствующими R 2 , соответствующими каждому протестированному pH (Двусторонняя корреляция Пирсона. Доверительный интервал = 95%). Каждая полоса соответствует среднему значению биологических дубликатов. Статистическая значимость была рассчитана с использованием множественных сравнительных тестов Сидака (двухфакторный дисперсионный анализ, 95% доверительный интервал). P -значения: <0,0001 (****).
Чтобы помочь различать изоляты дикого типа, толерантные и устойчивые, мы предложили установить пороговые значения TI.Сначала мы посчитали, что штаммы без снижения роста выше CBP устойчивы. С другой стороны, мы считали изоляты диким типом, если остаточный рост выше их МИК не превышал 20% или относительного роста (TI <0,2). Взяв за основу результаты дополнительного рисунка S1, мы предложили отнести штаммы к толерантным, если их относительный рост находится в диапазоне от 20 до 80% (TI ≥ 0,2 и ≤ 0,8). Несмотря на то, что эти пороговые значения TI не основаны на возникновении молекулярных маркеров толерантности, которые еще предстоит обнаружить, они все же позволяют различать фенотипы, которые будут полезны в этом исследовании, с использованием одной концентрации FLC (8 мкг / мл). для облегчения сравнения штаммов и крупномасштабных скринингов.
Применение анализа толерантности для идентификации толерантных штаммов
Чтобы подтвердить эффективность TI для выявления толерантных штаммов, мы затем провели большой скрининг клинических изолятов C. albicans, из разного происхождения ( n = 181), включая изоляты с известными механизмами приобретенной устойчивости к азолам. Данные, обобщенные в виде тепловой карты на Рисунке 2, показывают, что в соответствии с полученными ТИ можно выделить 5 основных категорий фенотипов.Первая категория (рис. 2, категория 1) содержала в основном азолустойчивые штаммы выше порогового значения TI 0,8 при всех испытанных значениях pH. Поскольку большинство этих штаммов содержат известные механизмы устойчивости к азолам (дополнительный файл S1), это подтверждает выбор порогового значения TI 0,8 для штаммов, устойчивых к азолам. Вторая категория (рис. 2, категория 2) включала изоляты, проявляющие толерантность при определенных значениях pH. Третья категория (рис.2, категория 3) включала изоляты, проявляющие толерантность при низком pH (pH 4.5). Четвертая категория (рис. 2, категория 4) содержала азолочувствительные изоляты с характеристиками дикого типа (порог TI ≤ 0,2). Последняя и пятая категории включали изоляты, проявляющие толерантность только при высоких значениях pH (pH 7,0–7,5). Не было выявлено корреляций между отнесением тестируемых штаммов к кладам и профилями TI. Разнообразие моделей толерантности к FLC предполагает, что могут быть задействованы множественные механизмы толерантности.
Рисунок 2. Экран допуска FLC 181 C.albicans штаммов. На тепловой карте представлены средние значения TI по крайней мере для 2 биологических повторностей. Категории легенды «восприимчивый» и «невосприимчивый» основаны на определениях EUCAST. Подробные результаты можно найти в дополнительном файле S1. Тепловая карта была создана с помощью Morpheus (https://software.broadinstitute.org/morpheus/) с метриками евклидова расстояния и методом средней связи, включая иерархическую кластеризацию по значениям TI и условиям pH. Названия изолятов, помеченные красным, соответствуют изолятам с известными механизмами устойчивости к азолам (дополнительный файл S1).
Стратегия сверхэкспрессии гена для идентификации медиаторов толерантности к FLC
Чтобы идентифицировать гены, участвующие в толерантности к FLC, мы выбрали стратегию сверхэкспрессии гена. Для достижения этой цели коллекция из 572 штаммов, описанная Chauvel et al. (2012) и Znaidi et al. (2018), причем каждый штамм сверхэкспрессировал определенный ген Dox-зависимым образом. Вкратце, система OE состоит из двух отдельных плазмид. Сначала вектор (pNIMX), экспрессирующий тетрациклин (TET) -связывающий трансактиватор (TA) под контролем промотора TDh4 (P TDh4 ), был введен в родительский штамм CEC161, производный от BWP17, дающий штамм CEC2097 (Chauvel et al., 2012). Затем была введена коллекция плазмид CIp10-P TET (572 плазмиды) с каждой плазмидой, экспрессирующей интересующий ген (GOI, перечисленный в дополнительном файле S2) под контролем TET-индуцируемого промотора (P TET ). в CEC2097. Эти вторые плазмиды также несут специфические теги размером 20 п.н. (или штрих-коды, BC), позволяющие их идентифицировать путем секвенирования, что облегчает планирование экспериментов с пулом. В этой работе объединенные штаммы подвергали FLC-селекции в присутствии доксициклина (Dox).В этих условиях штаммы, экспрессирующие гены, опосредующие толерантность, могут иметь преимущество перед штаммами с характеристиками дикого типа.
Перед селекционными экспериментами с этой коллекцией объединенных штаммов необходимо было определить оптимальные условия OE. Мы решили выращивать коллекцию C. albicans OE в среде RPMI, чтобы соответствовать условиям культивирования EUCAST. Было необходимо определить, при какой концентрации Dox может быть обнаружен значительный OE. Для ответа на этот вопрос использовали Dox-зависимый репортерный штамм люциферазы Gaussia princeps ( gLUC ) (CEC3083).Этот штамм использовали для определения оптимального pH и концентрации Dox для анализа обогащения пула (дополнительный рисунок S2). Сигнал люминесценции становился насыщенным при 100 мкг / мл Dox и при pH 7 и 7,5. PH среды также влиял на уровень детектируемой люминесценции. При pH 4,5 сигнал был по крайней мере в 10 раз ниже по сравнению с другими условиями pH и независимо от концентрации Dox. Сигналы люминесценции, возникающие в результате добавления Dox, выглядели одинаково при pH 6,0, 7,0 и 7.5. Таким образом, с этими наблюдениями, pH 6,0 и 7,0 казались оптимальными для гена OE. Также известно, что Докс действует синергетически с FLC, превращая это лекарство в фунгицидное, а не фунгистатическое средство. Этот синергетический эффект обусловлен способностью Dox хелатировать железо, но может быть отменен добавлением железа (FeCl 3 ) в среду (Fiori and Van Dijck, 2012).
Обогащение устойчивыми / толерантными штаммами OE в пульном анализе и однократном профилировании
Для выявления новых медиаторов толерантности с использованием коллекции OE было выполнено обогащение толерантными штаммами из пула.Вкратце, 572 штамма объединяли и выращивали при сильном давлении FLC (32 мкг / мл) и в присутствии или в отсутствие Dox (100 мкг / мл) при pH 6,0. Для выбора толерантных штаммов культуру поддерживали в течение 5 дней с ежедневным повторным инокуляцией в свежую среду для поддержания концентраций FLC и Dox. После 5 дней субкультивирования доля каждого штамма в популяции оценивалась для каждого тестируемого состояния путем секвенирования BC. Чтобы оценить влияние этого длительного культивирования на эволюцию популяции, популяция BC на пятый день (D 5 ) в отсутствие Dox и FLC [D 5 (D − F−)] сравнивалась с начальная популяция (D 0 ).Среднее отношение D 5 (FD -) / D 0 , измеренное для всех штаммов, составило 0,99 (рис. 3A), предполагая, что штаммы были представлены в одинаковой пропорции на D 5 и D 0 и подтверждая, что колебания в популяциях на D 5 из-за различных условий роста (рис. 3A, верхняя линия). Чтобы оценить эффект FLC и Dox, пропорцию каждого штамма в присутствии обоих соединений [D 5 (D + F +)] сравнивали с контрольными условиями [D 5 (D-F-)] ( Рисунок 3А, вторая строка).Штаммы были в 600 раз обогащены и в 25 раз истощены в присутствии FLC и Dox по сравнению с эталоном (дополнительный файл S2). Сравнение популяции только в присутствии FLC [D 5 (D-F +)] с эталоном позволило идентифицировать внутренне устойчивые / толерантные штаммы со штаммами, обогащенными до 900 раз в присутствии FLC и высокочувствительными штаммами, которые были истощены до 15 раз (рис. 3A, третья строка, дополнительный файл S2). Чтобы определить влияние Dox в отсутствие FLC на популяцию, популяцию в присутствии только Dox [D 5 (D + F-)] сравнивали с контрольными условиями.Здесь штаммы были до 15 раз обогащены и до 500 раз истощены при D 5 (D + F-), что указывает на небольшое влияние Dox на популяцию, которое, вероятно, связано с нерегулируемой системой OE. (Рисунок 3A, четвертая строка, дополнительный файл S2). Наконец, эффект Dox в присутствии FLC был оценен путем сравнения популяции D 5 (D + F +) с популяцией D 5 (D-F +) (рисунок 3B, нижняя строка). Ожидается, что это последнее сравнение даст ценную информацию о генах, которые обеспечивают преимущество селективного роста в популяции при сверхэкспрессии в присутствии FLC.В этом сравнении 78 штаммов были по крайней мере в 2 раза обогащены, а 39 штаммов 2-кратно истощены, когда их соответствующие гены были сверхэкспрессированы под сильным давлением FLC (пунктирная линия на Фигуре 3B и дополнительном файле S2). Среди них три главных штамма были те, которые сверхэкспрессировали GZF3 , orf19.399 и CRZ1 (60-кратное, 38-кратное и 25-кратное обогащение, соответственно) (Таблица 1). С другой стороны, три штамма, которые были наименее представлены в пуле, были штаммами, сверхэкспрессирующими orf19.2097, SFL2 и CPh2 (18-кратное, 11-кратное и 9-кратное истощение, соответственно) (Рисунок 3B и Таблица 1).
Рис. 3. Сравнение популяции пула коллекции 572-Tet-индуцибельных штаммов OE после 5 дней обогащения. (A) Тепловая карта представляет собой сравнение культур на 5-й день (D 5 ) и исходной популяции (D 0 ) в присутствии (F +) или отсутствии (F–) FLC (32 мкг / мл), а также в присутствии (D +) или отсутствии (D–) 100 мкг / мл Dox.Каждая линия представляет собой среднее относительное количество биологических дубликатов. Тепловая карта фильтруется на основе сравнения [D 5 (D + F +) / D 5 (D – F +)]. (B) Обогащение специфических Tet-зависимых штаммов OE в присутствии FLC с Dox и без него. Пунктирная линия представляет двукратное пороговое обогащение клеток, подвергшихся воздействию FLC, в отсутствие и в присутствии Dox. Y — ось в логарифмическом масштабе 2. Подробные данные можно найти в дополнительном файле S2.
Таблица 1. 10 лучших обогащенных и истощенных штаммов после 5 дней пересева.
Чтобы избежать систематической ошибки, вызванной ростом пулов, и подтвердить гены-кандидаты, идентифицированные в процессе обогащения пула, профиль толерантности каждого штамма в коллекции тестировался индивидуально (рис. 4). Рост в присутствии FLC и Dox (D + F +) и только в присутствии FLC (D-F +) сравнивали с ростом в контрольных условиях F-D-. Относительный рост в присутствии Dox и FLC (D + F +) составлял от 14 до 67% по сравнению с контрольными условиями F-D-, в то время как относительный рост только под давлением FLC (D-F +) составлял от 8 до 65%. (Дополнительный файл S5).Чтобы выбрать толерантные / устойчивые штаммы, были отобраны изоляты с относительным ростом, по крайней мере, в 2 раза выше в присутствии Dox и FLC (D + F +), чем в присутствии только FLC (D-F +) (рис. 4A и дополнительные Файл S2). Интересно, что в отличие от результатов, полученных при анализе обогащения пула (78 штаммов, по крайней мере, в 2 раза обогащенных), только четыре штамма показали 2-кратное увеличение роста в присутствии FLC и Dox в анализе одного штамма (рис. 4B). Это предполагает эффект пула в анализе обогащения пула, который может быть связан с продолжительностью эксперимента с пулом (5 дней).Эти четыре штамма включали те, которые со сверхэкспрессией GZF3 (рост в 2,14 раза), YVh2 (увеличение в 2,05 раза), PTC2 (увеличение в 2,02 раза) и YCK2 (увеличение в 2,01 раза) (Рисунок 4B и Таблица 2). С другой стороны, ни один из штаммов не показал относительный рост, сниженный по крайней мере в 2 раза при добавлении Dox. Действительно, только штамм, сверхэкспрессирующий CSK1 , показал снижение роста в присутствии Dox (снижение в 0,52 раза), но это истощение роста было связано с аномально высоким ростом (65% от контроля роста) при выращивании только в присутствии FLC. (Рисунок 4).Трудность наблюдения снижения роста при индукции Dox в присутствии FLC может быть связана с уже низким уровнем толерантности родительского штамма CEC161, используемого для создания коллекции. Интересно, что штамм GZF3 OE оказался наиболее успешным как для объединенных, так и для единичных анализов, что сделало его привлекательным потенциальным медиатором толерантности к FLC. Используя результаты как обогащения, так и анализа отдельных штаммов, в общей сложности было отобрано двенадцать штаммов для дальнейшей характеристики их чувствительности к FLC и профиля толерантности, включая штаммы со сверхэкспрессией GZF3 , CRZ1 , PTC2 , YVh2 , YCK2 , orf19.399, orf19.5157, orf19.2320, SGS1 , ASF1 , UBA4 и ZCF21 .
Рис. 4. Профилирование с допуском одиночной деформации. (A) Тепловая карта, представляющая относительный рост коллекции 572 Tet-индуцибельных OE BC штаммов при pH 6, в присутствии 32 мкг / мл давления FLC (F +) и в присутствии (D +) или отсутствии (D–) 100 мкг / мл Dox. Каждая линия представляет средний относительный рост биологических троек. (B) Влияние индукции Dox на толерантность к FLC, представленное как коэффициент роста между состоянием с Dox и без него [(D + F +) / (D – F +)].Указаны конкретные гены с коэффициентом увеличения относительного роста в 2 раза выше (пунктирная линия) и ниже коэффициента 1,0. Подробные данные можно найти в дополнительном файле S2.
Таблица 2. Перечень 10 наиболее успешных штаммов, показывающих самый высокий и самый низкий коэффициент роста в тесте на толерантность к FLC с одним штаммом.
Положительные регуляторы допуска FLC
Учитывая, что генетический фон штамма C. albicans BWP17, использованного в предыдущих скринингах, демонстрирует низкую толерантность к FLC, это затрудняет устранение потенциальных негативных регуляторов толерантности к FLC.Мы скорее сосредоточились на позитивных регуляторах предполагаемой позитивной толерантности. 12 выбранных изолятов коллекции OE, включая SC5314 дикого типа, были повторно протестированы индивидуально, чтобы установить их профили чувствительности к FLC при pH 6,0 в присутствии Dox (рис. 5). При этой концентрации Dox все штаммы демонстрировали сходные значения MIC независимо от индукции Dox, при этом все значения MIC оставались на уровне около 0,125 мкг / мл FLC. Толерантность к FLC оценивали с помощью TI при фиксированной концентрации FLC, равной 8 мкг / мл, и путем сравнения TI в отсутствие и в присутствии Dox.В этом анализе значительное увеличение TI в присутствии Dox было получено только у штаммов, сверхэкспрессирующих GZF3 (TI = 0,048–0,2), CRZ1 (TI = 0,07–0,21) и YCK2 (TI = 0,06–0,2). 0,14). CRZ1 представляет собой регулируемый кальциневрином фактор транскрипции, который, как уже было установлено Onyewu et al., Играет роль в толерантности к FLC. (2004) и Карабаба и др. (2006) и недавно Rosenberg et al. (2018). GZF3 является предполагаемым фактором транскрипции типа GATA, ортолог которого Saccharomyces cerevisiae отрицательно регулирует экспрессию катаболического гена азота (Soussi-Boudekou et al., 1997). YCK2 кодирует белок плазматической мембраны, подобный казеинкиназе I S. cerevisiae , который необходим для переноса через мембрану Pdr5 (ортолог мультилекарственного транспортера CDR1 в S. cerevisiae ) к поверхности клеток. (Decottignies et al., 1999). Повторная идентификация CRZ1 здесь подчеркивает, что выбор медиаторов FLC с помощью предпринятых экспериментальных подходов возможен, даже если необходимо учитывать ограничения (см. Ниже).Далее мы сосредоточились только на CRZ1 и GZF3 , поскольку Dox-зависимая сверхэкспрессия этих генов у C. albicans достигла порога толерантности (TI ≥ 0,2), который мы ранее определили для клинических изолятов.
Рисунок 5. Профили чувствительности выбранных Tet-индуцибельных штаммов в присутствии Dox. Профили чувствительности были выполнены при pH 6, в диапазоне концентраций FLC (0–16 мкг / мл), в присутствии (Dox +) или в отсутствие (Dox–) доксициклина в концентрации 100 мкг / мл и с добавлением 1 мМ FeCl 3 .Чувствительность к FLC была представлена их модальным значением MIC (левая панель) и TI при 8 мкг / мл FLC (правая панель). Стандартные отклонения значений MIC рассчитывали на основе среднего значения MIC для каждого образца. Горизонтальная пунктирная линия представляет нижний порог толерантности (TI = 0,2) и предел восприимчивости (TI = 0,5), как определено EUCAST. Каждая полоса представляет собой три биологических экземпляра. Статистическая значимость была определена с использованием множественных сравнительных тестов Сидака (двусторонний дисперсионный анализ, доверительный интервал = 95%). P -значения: (****) ≤ 0,0001.
CRZ1 и GZF3 OE в делеционных мутантахЧтобы лучше понять механизмы толерантности и потенциальную связь между CRZ1 и GZF3 , каждый ген был сверхэкспрессирован у одинарных и двойных мутантов. Для этой цели был сконструирован двойной мутант crz1, Δ / Δ, gzf3, Δ / Δ (EDY28-2, дополнительная таблица S1) с использованием мутанта crz1 Δ / Δ из коллекции делеционных мутантов Хоманна (Homann et al. ., 2009). Система OE для CRZ1 или GZF3 была затем трансформирована в этом двойном мутанте, как в одиночных мутантах Homann: crz1 Δ / Δ и gzf3 Δ / Δ, так и в родительском штамме WT коллекции Homann. . Контрольную плазмиду (CIp10-P TET -GTW, дополнительная таблица S1) также трансформировали в каждом штамме в качестве контроля системы OE. Затем были установлены профили чувствительности этих штаммов к FLC в присутствии или в отсутствие Dox и FLC для оценки их соответствующих MIC и TI (Рисунки 6A – D).Эти анализы чувствительности проводили при pH 6,0 и 7,0.
Рисунок 6. Профиль чувствительности мутантов CRZ1 и GZF3 , сверхэкспрессирующих либо CRZ1 , либо GZF3 . (A, C) Чувствительность к FLC представлена как модальное значение MIC со стандартным отклонением, рассчитанным на основе среднего значения MIC для всех повторов. (B, D) Профиль толерантности мутантных штаммов. Представлены средний TI и стандартные отклонения.Горизонтальные пунктирные линии представляют нижний порог толерантности (TI = 2) и верхний предел восприимчивости (TI = 0,5), как описано EUCAST. Каждый набор данных представляет собой среднее значение (или режим) биологических дубликатов. Статистическую значимость (B, D) оценивали с использованием тестов множественного сравнения Сидака (двухфакторный дисперсионный анализ, 95% доверительный интервал) между условиями Dox– и Dox + в одном и том же наборе мутантов. P -значения: (****) ≤ 0,0001. В дополнительной таблице S1 указано соответствие между генотипом и номером штамма.
В целом, все штаммы показали сходные значения MIC в присутствии или в отсутствие Dox. MIC для всех тестируемых штаммов при pH 7,0 был равен 0,0625 мкг / мл FLC с незначительными вариациями. Мутант gzf3 Δ / Δ, сверхэкспрессирующий CRZ1 , показал самое высокое увеличение значения MIC, достигнув 0,25 мкг / мл FLC в присутствии Dox (Фигуры 6A, C). В глобальном масштабе профиль восприимчивости остался прежним при pH 6,0. Что касается толерантности к FLC, все штаммы показали базальный TI ниже нижнего порога толерантности (т.е.е., TI = 0,2) при обоих значениях pH в отсутствие Dox. В соответствии с наблюдениями анализа обогащения пула, CRZ1 и GZF3 OE привели к значительному увеличению TI на фоне WT. У мутантов gzf3Δ / Δ значительное увеличение TI можно было наблюдать при обоих значениях pH ниже CRZ1 и GZF3 OE. Действительно, TI увеличился с 0,17 до 0,28 и от 0,16 до 0,31 при pH 7,0 и с 0,07 до 0,13 и от 0,07 до 0,14 при pH 6,0 для CRZ1 и GZF3 OE, соответственно (Рисунки 6B, D).С другой стороны, только CRZ1 OE приводило к увеличению толерантности у двойного мутанта crz1 Δ / Δ, gzf3 Δ / Δ. Эффект GZF3 OE на толерантность не наблюдался в мутанте crz1Δ / Δ , а также в двойном мутанте crz1 Δ / Δ, gzf3 Δ / Δ (Фигуры 6B, D). Однако CRZ1 OE в этих мутантных фонах приводили к повышенной толерантности при pH 7,0 и 6,0 соответственно (Фигуры 6B, D).
Рисунок 7. Уровни толерантности различных мутантов с делецией как для CRZ1 , так и для GZF3 в генетических фонах DSY2110, DSY4454, SSI 4622 и DSY4588 при pH 6,0 и 7,0. Каждая полоса соответствует как минимум биологическим дубликатам. Статистическая значимость была рассчитана с использованием тестов множественного сравнения Турции (доверительный интервал 95%). P -значения: 0,1234 (нс), ≤0,0332 (*), ≤0,0021 (**), ≤0,0002 (***), ≤0,0001 (****). Голубые звездочки соответствуют сравнению с исходными клиническими изолятами (синие столбцы).Черные звездочки соответствуют сравнениям между родственными мутантными штаммами. В дополнительной таблице S1 указано соответствие между генотипом и номером штамма.
Подводя итог, наши результаты показывают, что избыточная экспрессия CRZ1 приводит к увеличению толерантности к FLC во всех мутантных фонах, но, с другой стороны, GZF3 OE увеличивает толерантность только при наличии CRZ1 . Эти результаты предполагают, что CRZ1 контролирует экспрессию одного или нескольких промежуточных белков или кофакторов, необходимых для активности GZF3 , которые, в свою очередь, могут активировать другие регуляторы толерантности.Принимая гипотезу о том, что CRZ1 и GZF3 могут быть частью одного и того же пути, наши результаты показывают, что GZF3 может действовать выше CRZ1 .
CRZ1 a nd GZF3 Делеции в толерантных клинических изолятахЧтобы подтвердить роль CRZ1 и GZF3 в развитии толерантности к флуконазолу не только в лабораторных штаммах, один или оба аллеля каждого гена были удалены в клинических изолятах C. albicans DSY2110, DSY4454, SSI 4622 и DSY4588, о котором уже известно, демонстрирует другой уровень толерантности к FLC (дополнительный рисунок S3).Ревертантные штаммы были сконструированы путем повторной вставки аллелей CRZ1 и GZF3 из контрольного изолята SC5314. Профили чувствительности к FLC каждого мутанта и связанных родительских клинических изолятов оценивали при pH 7,5, 7,0, 6,0 и 4,5, а их значения MIC и TI извлекались для сравнения. В глобальном масштабе не наблюдалось никаких различий между значениями MIC исходных клинических изолятов и их соответствующих мутантов, при этом все значения MIC были ниже клинической контрольной точки FLC (CBP), равной 4 мкг / мл (дополнительный рисунок S4).
При изучении вариаций толерантности к FLC у созданных мутантов и ревертантов общая тенденция заключалась в том, что делеция CRZ1 снижала уровни толерантности во всех тестируемых штаммах (для удобства только данные измерений pH 6,0 и 7,0 показаны на Рисунке 7, все значения pH показаны на дополнительном рисунке S5). Только для штамма DSY4488 делеция GZF3 приводила к небольшому, но значительному снижению толерантности к FLC при pH 6,0 и 7,0 по сравнению с исходным клиническим штаммом.Реверсия делеций гена аллелями CRZ1 и GZF3 из SC5413 дикого типа из SC5413 в их геномных локусах не всегда приводила к исходным уровням толерантности. Например, восстановление CRZ1 на фоне мутанта crz1 Δ / Δ DSY2110 не вернуло толерантность к уровням клинических штаммов дикого типа, а также к гетеро- и гомозиготным мутантам CRZ1 . С помощью другого фенотипического теста (чувствительность к SDS, дополнительный рисунок S6) мы подтвердили, что ревертант CRZ1 может дополнять мутантные фенотипические дефекты, показывая, что повторно введенный аллель CRZ1 все еще функционирует.Взятые вместе, результаты делеций и реверсий CRZ1 и / или GZF3 показали, что CRZ1 был фактором, который наиболее заметно изменял толерантность клинических пятен к FLC. Результаты зависели от тестируемых значений pH и генетического фона изолятов.
Транскриптомные отпечатки ответа FLC в FLC-толерантных клинических изолятах
Как было показано ранее, клинические штаммы демонстрируют несколько степеней толерантности к FLC. Одним из альтернативных подходов к изучению механизмов, лежащих в основе развития толерантности к FLC, является сравнение профилей транскрипции между штаммами, демонстрирующими разные уровни толерантности к FLC.Было интересно изучить профиль транскрипции такого штамма в присутствии FLC в условиях, в которых тестировалась толерантность. Учитывая, что лучший вариант сравнения — между родственными изолятами, мы проверили нашу коллекцию штаммов на предмет родственных штаммов, демонстрирующих разные профили толерантности к FLC. Выбранные штаммы происходили из группы родственных штаммов, включая DSY4454, DSY4452 и DSY4588. Эти штаммы были получены от пациента, страдающего эндокардитом, который длительное время лечился с помощью FLC (8 лет).DSY4454 был самым ранним штаммом, извлеченным от пациента (2005 год), а DSY4588 — последним (2013 год). Подробные сведения о пациенте и взятии образцов приведены в дополнительном файле S6 и профилях допуска FLC на дополнительном рисунке S7. DSY4454 показал низкие значения TI при всех значениях pH (кроме pH 4,5), в то время как DSY4452 и DSY4588 показали значения TI выше порогового значения 0,2 при нейтральных значениях pH. Взаимосвязь между штаммами была исследована с помощью Multi Locus Sequence Typing (MLST, дополнительный файл S6) (Gow et al., 2003). Единственная потеря гетерозиготности (LOH) была обнаружена в аллеле SYA1 изолята DSY4588 по сравнению с другими штаммами, что позволяет предположить, что между штаммами могла происходить микроэволюция. Однако результаты MLST показали, что штаммы принадлежали к одному типу, что свидетельствует о сильной генетической связи между ними.
АнализRNAseq проводили, как описано в разделе «Материалы и методы». Изолят SC5314 был включен в этот анализ RNAseq как контрольный изолят, демонстрирующий низкий уровень толерантности (дополнительный рисунок S7).Изменения экспрессии генов извлекали путем попарного сравнения условий с FLC и без него. Данные были отфильтрованы по значимости (частота ложных обнаружений, FDR ≤ 0,05) и по изменению экспрессии (≥2-кратное) между условиями воздействия лекарственного средства и условиями без воздействия (дополнительный файл S7). Отфильтрованные данные суммированы в таблице 3. Регулируемые FLC гены клинических штаммов DSY4452, DSY4454, DSY4588 и SC5314 были затем подвергнуты анализу обогащения набора генов (GSEA) с использованием базы данных списка генов, взятых из 307 опубликованных исследований (дополнительный файл S8).Эта база данных включает условия, в которых (i) C. albicans подвергались воздействию различных противогрибковых агентов, (ii) мутанты C. albicans подвергались воздействию различных условий роста, (iii) C. albicans подвергались воздействию клеток-хозяев и (iv) C. albicans выращивали in vitro в условиях, имитирующих среду хозяина. Список GSEA также содержит гена C. albicans с сайтами связывания для нескольких факторов транскрипции. В общем, используемые условия делятся на списки генов с повышенной и подавляющей регуляцией.Программа сравнивает запрашиваемый список генов с повышенной и пониженной регуляцией с существующими списками генов и определяет те из них, которые перекрываются посредством статистической оценки. Сеть связанных списков генов может быть сформирована с использованием программного обеспечения для визуализации, такого как Cytoscape (карта обогащения GSEA), в зависимости от совпадения условий. Эти данные обобщены на рисунке 8 (для простоты показана только карта GSEA для DSY4452).
Таблица 3. Гены, регулируемые FLC в клинических штаммах.
Рисунок 8. Карта обогащения GSEA генов, регулируемых FLC, в клиническом изоляте DSY4452. Параметры анализа были следующими: норма, meandiv; scoring_scheme, взвешенный; set_min, 15; нперм, 1000; set_max, 500. Результаты GSEA были загружены в Cytoscape 3.0 со следующими параметрами: P -value cutoff, 0,01; FDR q -значение 0,05. Красные узлы представляют расширенные списки генов в генах с активированной регуляцией GSEA. Синие узлы представляют собой расширенные списки генов в генах с пониженной регуляцией GSEA.Узлы соединяются ребрами, когда между узлами существует перекрытие. Размер узлов отражает общее количество генов, соединенных ребрами с соседними узлами. Толщина кромки отражает уровень доверия между узлами.
Карта GSEA для DSY4452 выделяет несколько особенностей, которые также можно наблюдать на картах других изолятов (дополнительный рисунок S8). Во-первых, гены, регулируемые FLC в клинических изолятах, как и ожидалось, перекрывались с опубликованными наборами данных, в которых C.albicans подвергали воздействию FLC в различных условиях роста. Связанные узлы «FLUCONAZOLE_UP» и «FLC3H_UP» перекрывались с большинством FLC-активируемых генов в клинических штаммах. Данные «FLUCONAZOLE_UP» получены из исследования (Vasicek et al., 2014), в котором C. albicans подвергали воздействию в течение 6 часов в присутствии 10 мкг / мл FLC в YEPD при 30 ° C. Данные «FLC3H_UP» взяты из исследования (Keller et al., 2015), в котором C. albicans обрабатывали 0,5 мкг / мл FLC в течение 3 часов в среде RPMI при 37 ° C.Все эти эксперименты проводились в жидких культурах при перемешивании. Учитывая, что большинство генов с подавлением FLC также обнаруживается в узлах «KETOCONAZOLE_DN», «FLC3H-DN» и «FLUCONAZOLE_DN», полученные здесь результаты согласуются с уже опубликованными данными транскрипции клеток, подвергшихся воздействию FLC.
Если смотреть на гены с повышенной регуляцией FLC, данные GSEA DSY4452 содержат кластеры узлов, связанных с путем кальциневрина (CALCINEURIN, CNA_CRZ1 и CNA 20 min_up). Поразительно, что эти узлы были связаны с узлами, происходящими из состояний, подверженных воздействию FLC («FLUCONAZOLE_UP», «KETCONAZOLE_UP», «FLC3H_UP») и от узлов факторов транскрипции, контролирующих гомеостаз стеролов («UPC2_UP»).Эти сети, содержащие гены, позитивно регулируемые с помощью FLC, также были связаны с узлом, содержащим гены, активируемые с помощью UPC2 с усилением функциональной мутации («UPC2_G648D_UP») (Dunkel et al., 2008). Это подчеркивает важность этого фактора транскрипции в ответе на азолы. Взятые вместе, эти данные предполагают, что путь кальциневрина связан с ответом C. albicans на FLC, что согласуется с вышеупомянутой связью между CRZ1 и толерантностью к FLC.
Для идентификации потенциальных медиаторов толерантности в наборе клинических штаммов, экспрессия которых может варьироваться между изолятами дикого типа (DSY4454) и устойчивыми к FLC (DSY4452 и DSY4588), соотношение генов, регулируемых FLC, определяли между парами. изолятов. Коэффициенты экспрессии сначала были рассчитаны между DSY4452 и DSY4454 и между DSY4588 и DSY4454 (дополнительный файл S8). Значительные кратные изменения были выбраны между этими условиями ( p -значения ≤ 0.05), и данные были отфильтрованы с двукратным изменением выражения в качестве отсечки. Соотношение экспрессии между DSY4452 и DSY4454 было изменено более чем в 1,5 раза для 41 гена (дополнительный файл S9). Интересно, что 12 из этих 41 гена регулируются кальциневрином и / или CRZ1 . Более того, соотношение экспрессии этих 41 гена между DSY4588 и DSY4454 было выше 1,5-кратного порога. Эти результаты предполагают сохранение ответа FLC между толерантными штаммами DSY4452 и DSY4588 по сравнению с DSY4454.Интересно, что большинство соотношений 41 вышеупомянутого гена между DSY4454 и SC5314, оба из которых можно рассматривать как «дикий тип» с точки зрения толерантности к FLC, были ниже 1,5-кратного порога. Взятые вместе, данные, представленные здесь, предполагают, что экспрессия генов, которые, как известно, являются зависимыми от кальциневрина и / или CRZ1 , повышена в устойчивых к FLC клинических штаммах, и это указывает на то, что путь кальциневрина модифицируется еще не охарактеризованными факторами. в этих штаммах.
Обсуждение
В этом исследовании мы стремились лучше определить толерантность к FLC и идентифицировать медиаторы толерантности к FLC у C. albicans . Термин толерантность слишком часто путают с описанием лекарственной устойчивости в опубликованных исследованиях. Сначала мы обратились к адекватным методам количественной оценки толерантности к FCL, чтобы облегчить сравнение между различными изолятами. Стандартизированные анализы чувствительности к микроразбавлениям, которые включают протоколы CLSI и EUCAST, широко используются для оценки чувствительности грибов к противогрибковым препаратам.Мы воспользовались преимуществами этих установленных тестов для измерения толерантности к FLC. Однако, поскольку протокол EUCAST объединяет использование измерений оптической плотности в качестве показаний, этот протокол был выбран в качестве теста для количественной оценки толерантности у C. albicans . В принципе, анализ заключается в измерении оптической плотности в планшетах для микроразведений при фиксированной концентрации FLC (8 мкг / мл) выше порогового значения MIC CBP, равного 4 мкг / мл FLC, и для выражения роста как относительного значения (от 0 до 1), который мы назвали «индексом толерантности» (ТИ).Недавно был опубликован альтернативный анализ толерантности, в котором использовались статические условия роста на диско-диффузионных анализах с чашками с агаром. Рост внутри зоны ингибирования был количественно оценен и послужил основой для количественной оценки толерантности к FLC (Rosenberg et al., 2018).
Используя большую коллекцию из изолятов C. albicans , некоторые из которых были секвенированы по геному, измеренные значения TI позволили разделить изоляты на 3 основные категории. В первую категорию вошли изоляты со значениями TI ≤ 0,2, которые были отнесены к изолятам, чувствительным к FLC дикого типа.Во вторую категорию вошли изоляты со значениями TI> 2 и <0,8. Эти изоляты считались чувствительными к FLC, но толерантными к FLC. В третью категорию вошли изоляты со значениями TI ≥ 0,8 и изоляты, признанные устойчивыми к FLC. Эта категоризация подтверждается тем фактом, что большинство изолятов с TI> 0,8 демонстрируют известные механизмы устойчивости к азолам (рис. 2). Пороговое значение TI 0,2 для различения изолятов дикого типа и толерантных изолятов менее очевидно для закрепления за счет наличия определенных механизмов, поскольку механизмы толерантности еще не связаны с конкретными генными мутациями. имеют характеристики дикого типа при запросе механизмов толерантности.
Одно из наблюдений, сделанных в тестах на толерантность, заключается в том, что в профилях толерантности наблюдался pH-зависимый эффект. Используя конкретную подгруппу изолятов, мы наблюдали, что кислый pH увеличивает толерантность к FLC (рис. 1). Противоположная тенденция (снижение толерантности с понижением pH) была отмечена ранее Marr et al. (1999) и совсем недавно Rosenberg et al. (2018). Непонятно, почему наши результаты отличаются от опубликованных результатов. Методы, использованные в этих исследованиях, относились к минимальной и сложной культуральной среде и к анализу диффузии в агаре, соответственно.Таким образом, можно утверждать, что эти условия анализа могли повлиять на полученные результаты. Поскольку в этих различных исследованиях использовались разные изоляты, трудно определить причину таких разногласий. Наши собственные результаты со средами RPMI и YEPD в тестах на толерантность к FLC показывают, что использование YEPD, аналогичного среде, используемой Rosenberg et al. (2018) — приводит к снижению толерантности к FLC при низком pH у некоторых штаммов, но не у всех, по сравнению с RPMI (дополнительный рисунок S9). Это говорит о том, что состав среды является важной переменной в анализах толерантности к FLC, однако генетический фон тестируемых штаммов также может вносить вклад в эту переменную.Это согласуется с результатами, полученными на Рисунке 2, на котором собраны TI большого набора штаммов, и подчеркивается, что pH-зависимость толерантности к FLC является довольно зависимым от штамма признаком, поскольку около 70% протестированных изолятов (категории 4 и 5) не проявляют повышение толерантности к FLC при низком pH в RPMI. Другое исследование было опубликовано Luna-Tapia et al. (2015), в которых мутант VSP21 проявил высокую толерантность к FLC как при pH 7,0, так и при pH 3,0. В этой работе использовался протокол CLSI, который, следовательно, был более тесно связан с тестируемыми здесь условиями.Луна-Тапиа и др. (2015) продемонстрировали, что толерантность к мутанту VSP21 снижалась при pH 3,0 по сравнению с нейтральными условиями. Хотя эти данные подтверждают зависимость pH от толерантности к FLC, в результатах использовался конкретный мутант, который может вызывать pH-специфический ответ и может отличаться от клинических изолятов дикого типа. Таким образом, зависимость толерантности к FLC от pH остается спорной.
Затем мы обратились к идентификации медиаторов толерантности к FLC с помощью прямого генетического скрининга с подходом обогащения пула с использованием коллекции из 572 штаммов со штрих-кодом.В этой стратегии использовалась среда RPMI и условия роста, используемые для определения толерантности клинических штаммов. Каждый из этих штаммов сверхэкспрессировал определенный ген под контролем Dox (Chauvel et al., 2012). Тот же набор объединенных штаммов был использован Znaidi et al. (2018) в генетическом скрининге, проведенном на мышиной модели колонизации желудочно-кишечного тракта. В этом исследовании авторы использовали штрих-коды для идентификации представляющих интерес штаммов, которые были обогащены и / или истощены в животной модели в присутствии Dox.В отличие от системы секвенирования штрих-кода, использованной в настоящем исследовании, Znaidi et al. (2018) использовали систему обнаружения штрих-кода, основанную на микрочипах, на которые были нанесены все теги штрих-кода. В системе отбора моделей животных только один ген, CRZ2 , был идентифицирован как обеспечивающий преимущество в селективном росте при сверхэкспрессии в кишечнике животных. CRZ2 кодирует фактор транскрипции цинкового пальца семейства C2h3, который подобен кальциневрину-мишени Crz1p, однако он не участвует в передаче сигналов кальция (Karababa et al., 2006). В настоящем исследовании объединенная коллекция поддерживалась под сильным давлением FLC в течение 5 дней в присутствии и в отсутствие Dox. Мы впервые смогли идентифицировать обогащенные и истощенные изоляты в этих условиях. Профили восприимчивости этих генов-кандидатов были дополнительно исследованы в анализах одного штамма, чтобы учесть потенциальные эффекты пула в анализе обогащения. Мы наблюдали плохую корреляцию между анализом объединенного и одиночного штамма. Среди возможных объяснений повторяющиеся субкультуры в качестве продолжительности эксперимента (5 дней) в объединенном эксперименте по сравнению с анализом одного штамма (1 день) могли создать несколько ошибок при выборе устойчивых к FLC штаммов.Даже учитывая эти ограничения, мы составили список из 12 предполагаемых посредников толерантности к FLC, скрестив эти результаты обоих селекционных экспериментов. Только два из них, CRZ1 и GZF3 , могут быть связаны со значительным повышением толерантности при индукции Dox выше клинического порога (TI> 0,2). Одним из этих двух генов был регулируемый кальциневрином фактор транскрипции CRZ1 , который, как уже было установлено, играет роль в толерантности к FLC Onyewu et al. (2004) и Карабаба и др.(2006). Чтобы действовать как фактор транскрипции, Crz1 должен быть перемещен в ядро. Это достигается дефосфорилированием с помощью кальциневрина, который, как известно, действует как протеинфосфатаза (Karababa et al., 2006). В этой работе мы показали, что сверхэкспрессия CRZ1 запускает толерантность к FLC, которая может быть достигнута активацией транскрипции и, таким образом, сдвигом баланса в сторону дефосфорилированного Crz1. Связь между сверхэкспрессией CRZ1 и дефосфорилированием Crz1 здесь не тестировалась, но нуждается в рассмотрении в будущих исследованиях.Другим идентифицированным геном был предполагаемый фактор транскрипции типа GATA GZF3 , ортолог S. cerevisiae отрицательно регулирует экспрессию катаболического гена азота (Soussi-Boudekou et al., 1997). Мало что известно о функции GZF3 у C. albicans , но было показано, что она индуцируется через Cap1 в условиях окислительного стресса (Wang et al., 2006). Большая часть информации о GZF3 поступает с фенотипических экранов Homann и Noble (Homann et al., 2009; Noble et al., 2010). В их работах гомозиготный мутант gzf3 Δ / Δ приводил к аномальному росту на среде Spider и снижению конкурентоспособности на модели системной инфекции мышей. Homann et al. (2009) также наблюдали повышенную чувствительность к теплу, FLC, хлориду лития, меди и рапамицину. Однако до сих пор никакие генетические ключи не могли объяснить эти фенотипы. Насколько нам известно, это первый случай, когда GZF3 был связан с увеличением толерантности к FLC при сверхэкспрессии в C.Альбиканс . Также был идентифицирован третий ген, YCK2 . Этот ген кодирует белок плазматической мембраны, подобный казеинкиназе I S. cerevisiae , который необходим для переноса через мембрану Pdr5 (ортолог мультилекарственного транспортера CDR1 в S. cerevisiae ) на поверхности клеток ( Decottignies et al., 1999). Сверхэкспрессия YCK2 значительно повышала толерантность к FLC. Однако он не достиг порога толерантности (TI <0.2) определен для клинических изолятов. Однако этот ген остается хорошим кандидатом для будущих исследований молекулярных механизмов толерантности к FLC. Интересно, что недавно было показано, что YCK2 препятствует устойчивости к каспофунгину (Caplan et al., 2020), а ранее было показано, что он участвует в ответе на FLC (Jung et al., 2017). Анализ одного штамма также подтвердил, что наш протокол обогащения пула является ценным подходом для идентификации предполагаемых положительных медиаторов толерантности к FLC.Дополнительные эксперименты по обогащению с использованием расширенных коллекций OE могут раскрыть новое понимание механизмов, лежащих в основе этого фенотипа.
Чтобы дополнительно охарактеризовать возможные взаимодействия, существующие между CRZ1 и GZF3 (поскольку оба могут опосредовать толерантность к FLC), мы заметили, что GZF3 значительно увеличивал толерантность при сверхэкспрессии, но только когда была хотя бы одна копия CRZ1 . настоящее время. Принимая гипотезу, что CRZ1 и GZF3 могут быть частью одного и того же пути, наши результаты предполагают, что Gzf3 действует выше Crz1.Дальнейшее исследование генов-мишеней Crz1 и Gzf3 посредством секвенирования РНК или иммунопреципитации хроматина может выявить другие белки, необходимые для повышения толерантности к FLC, а также выявить связь между обоими TF. Было показано, что как CRZ1 , так и GZF3 также играют роль в толерантности к FLC у клинических изолятов. CRZ1 Делеция значительно снижает толерантность к FLC в четырех протестированных клинических штаммах (рис.7) до уровней ниже порога толерантности (TI <0.2) клинических изолятов. С другой стороны, делеция GZF3 могла снижать уровни толерантности, но только тогда, когда оба аллеля были удалены в конкретном изоляте (DSY4588). Эксперименты, направленные на повторное введение CRZ1 и GZF3 на фоне делеционных мутантов в клинических штаммах, дали разные результаты фенотипической комплементации (фигура 7). Например, ревертантные изоляты CRZ1 и из штаммов DSY2110 и DSY4454 не вернулись к исходным родительским уровням дикого типа.Для реверсии полного исходного фенотипа может потребоваться повторное введение двух копий CRZ1 в их геномные локусы. Для реверсии исходного фенотипа может также потребоваться присутствие аллелей CRZ1 , происходящих от клинических штаммов, а не от SC5314. Чтобы подтвердить эту гипотезу, в будущих экспериментах следует ввести аллели CRZ1 из родительских клинических штаммов в их соответствующие гомозиготные мутанты. Эта последняя гипотеза предполагает, что аллели CRZ1 из этих клинических штаммов могут проявлять полиморфизм, ответственный за усиление толерантности к FLC.
В недавнем исследовании, опубликованном группой Дж. Бермана, были даны некоторые механистические взгляды на основы толерантности к FLC (Rosenberg et al., 2018). Как показывают наши результаты, это исследование показало, что с использованием химически индуцированных фенотипов путь кальциневрина участвует в развитии толерантности к азолам. Исследование Rosenberg et al. (2018) использовали мутанты, сконструированные из лабораторных штаммов (например, crz1 , cnb1 ), и снижение замедленного роста в диско-диффузионных анализах, чтобы подтвердить свою гипотезу.Кроме того, это исследование показало, что развитие толерантности у клинических штаммов, все еще чувствительных к FLC, было связано с отдельными субпопуляциями (Rosenberg et al., 2018). Среди других интересных наблюдений Rosenberg et al. (2018) наблюдали, что толерантные штаммы с большей вероятностью будут изолированы от пациентов, получавших FLC, чем другие, что позволило предположить, что C. albicans может адаптироваться к этому препарату. Если лечение азолом продолжается, толерантные изоляты могут сохраняться и, таким образом, могут вызывать более серьезные повреждения хозяина.Однако взаимосвязь между возникновением толерантности к FLC и эффективностью FLC все еще не установлена четко у C. albicans . Исследование Astvad et al. (2018), проведенное с использованием изолятов C. tropicalis , демонстрирующих различные профили толерантности, проверили эффективность FLC на моделях системной инфекции мышей. Данные этого исследования показали, что высокая толерантность к FLC снижает эффективность FLC у мышей, что позволяет предположить клиническую значимость феномена толерантности.
Транскриптомика — это мощная технология, предназначенная для изучения функций генов и получения информации о цепях, активируемых при нарушениях окружающей среды.Химический стресс может вызывать изменения транскрипции, отражающие как общие (например, пути детоксикации), так и специфические реакции организма на изменение одного или нескольких биологических путей, на которые влияет обработка химическим веществом (Hughes et al., 2000). Хотя условия воздействия лекарственных препаратов могут быть полезны для получения значимых биологических данных, использование клинических штаммов с определенными фенотипами также полезно для выявления механизмов, контролирующих эти фенотипы. В этой работе мы рассмотрели профилирование транскриптов нескольких изолятов в присутствии FLC, некоторые из которых проявляют толерантность к FLC.Основное различие в этих экспериментах по сравнению с аналогичными опубликованными результатами с использованием C. albicans , подвергнутых FLC, состояло в том, что условия инкубации имитировали стандартные анализы чувствительности, проводимые в соответствии с рекомендациями EUCAST. В этих условиях мы показали здесь, что FLC индуцировал ответ, который включал несколько кальциневрин-зависимых генов. Такой профиль ответа еще не был четко продемонстрирован в опубликованных исследованиях профилей с FLC. Такая ассоциация убедительно свидетельствует о том, что FLC задействует путь кальциневрина, который, как уже было показано, имеет решающее значение для выживания C.albicans , подвергнутые воздействию FLC (Sanglard et al., 2003).
Клинические изоляты, используемые здесь в транскрипционном анализе, были связаны друг с другом, что, как ожидалось, уменьшило транскрипционный шум, который может возникать от штаммов, демонстрирующих различный генетический фон. В этих последовательных изолятах DSY4454 был первым выделенным изолятом от пациента, страдающего эндокардитом. DSY4454 показал относительно низкий TI по сравнению с другими изолятами (DSY4452 и DSY4588). Пациент в течение нескольких лет лечился FLC до тех пор, пока посев крови не был положительным на DSY4452 и DSY4588 примерно через 7 и 9 лет после выделения DSY4454.Вероятно, что продолжительность лечения FLC в течение этих лет выбрана для изолятов с модификациями генома, благоприятствующими, среди других фенотипов, развитию толерантности к азолам. Сравнительная геномика может привести к выяснению молекулярных основ толерантности к азолам в клинических изолятах. Такой подход может быть затруднен из-за вероятной дивергенции генома, которая возникла за годы сохранения штаммов в организме хозяина. Наши данные показали, что несколько генов пути кальциневрина были активированы по сравнению с исходным изолятом (DSY4454).В настоящее время генетическая основа этой модификации неизвестна. Согласно нашим данным профилирования транскриптов, CRZ1 был более активирован в толерантных изолятах по сравнению с изолятами дикого типа (примерно в 2 раза между DSY4452 и DSY4454 и между DSY4588 и DSY4454, дополнительный файл S7). Как упоминалось ранее в этой работе, сверхэкспрессии CRZ1 , опосредованной искусственным регулируемым промотором, достаточно для индукции толерантности к FLC у C. albicans . Изменения экспрессии CRZ1 , следовательно, могут быть приняты в качестве маркера-кандидата на устойчивость к азолам.Интересно, что недавнее исследование показало, что количество копий CRZ1 коррелировало с возникновением толерантности к FCL у изолятов C. albicans , подвергшихся воздействию FLC. Предполагая, что количество копий гена CRZ1 может коррелировать с повышенной экспрессией, это исследование подтверждает наши наблюдения (Todd and Selmecki, 2020). Как сверхэкспрессия CRZ1 опосредует толерантность к азолам, пока неизвестно. В настоящее время нет подробной информации о генах-мишенях CRZ1 , которые в конечном итоге могут отвечать за толерантность к азолам.Необходимо систематически проводить идентификацию генов-мишеней CRZ1 , которые могут опосредовать толерантность к азолам. В заключение, даже если настоящие результаты сходятся к участию пути кальциневрина в развитии толерантности к азолам, необходимы дополнительные исследования для выяснения молекулярных деталей, лежащих в основе этого явления.
Заявление о доступности данных
Наборы данных, представленные в этом исследовании, можно найти в онлайн-репозиториях. Названия репозитория / репозиториев и номера доступа можно найти в статье / Дополнительных материалах.
Авторские взносы
ED написал рукопись и провел эксперименты. LB, ET, MP, CP и FM проводили эксперименты. SZ, MC, ML и M-EB предоставили материал. Cd’E разработала стратегии. Д.С. разработал стратегии и написал рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.
Финансирование
Эта работа была поддержана Швейцарским национальным исследовательским фондом грантами 31003A_146936 и 31003A_172958 DS. Авторы благодарят Франсуаз Ишер и Даниэль Брандализ за отличную техническую помощь и М.Арендруп за щедрый подарок изолятов C. albicans . Содержание этой рукописи было опубликовано как часть диссертации ED (Delarze, 2019). С.З. был получателем постдокторских стипендий Европейской комиссии (FINSysB, PITN-GA-2008-214004), Национального агентства исследований (KANJI, ANR-08-MIE-033-01) и инвестиционного агентства Франции. Программа Avenir (Institut de Recherche Technologique BIOASTER, ANR-10-AIRT-03). Cd’E поддерживается программой правительства Франции Investissement d’Avenir (Лаборатория интегративной биологии новых инфекционных заболеваний, ANR-10-LABX-62-IBEID).
Конфликт интересов
ED используется Resistcell AG. CP используется Abionic SA. FM работает в компании Philip Morris Product SA.
Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Дополнительные материалы
Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389 / fmicb.2020.5 / full # дополнительный материал
Сноски
Список литературы
Аморим-Ваз, С., Тран Вду, Т., Прадерванд, С., Пагни, М., Кост, А. Т., и Санглард, Д. (2015). Метод обогащения РНК для количественного транскрипционного анализа патогенов in vivo применительно к грибку Candida albicans . мБио 6: e00942-15. DOI: 10.1128 / mBio.00942-15
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Аствад, К.М. Т., Санглард, Д., Деларз, Э., Хейр, Р. К., и Арендруп, М. К. (2018). Последствия феномена следа EUCAST у Candida tropicalis для восприимчивости in vivo в моделях беспозвоночных и мышей. Антимикробный. Агенты Chemother. 62: e01624-18. DOI: 10.1128 / AAC.01624-18
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Калабрезе Д., Билле Дж. И Санглард Д. (2000). Новый ген переносчика оттока нескольких лекарственных препаратов суперсемейства основных фасилитаторов из Candida albicans (FLU1), придающий устойчивость к флуконазолу. Microbiology 146 (Pt 11), 2743–2754. DOI: 10.1099 / 00221287-146-11-2743
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Каплан Т., Лоренте-Масиас А., Стогиос П. Дж., Евдокимова Э., Хайд С., Веллингтон М. А. и др. (2020). Преодоление грибковой устойчивости к эхинокандину путем ингибирования несущественной стресс-киназы Yck2. Cell Chem. Биол. 27, 269.e5–282.e5. DOI: 10.1016 / j.chembiol.2019.12.008
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Шовель, М., Nesseir, A., Cabral, V., Znaidi, S., Goyard, S., Bachellier-Bassi, S., et al. (2012). Универсальная стратегия сверхэкспрессии патогенных дрожжей Candida albicans: идентификация регуляторов морфогенеза и приспособленности. PLoS One 7: e45912. DOI: 10.1371 / journal.pone.0045912
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Институт клинических и лабораторных стандартов [CLSI], (2008). Эталонный метод испытания дрожжей на противогрибковую чувствительность при разведении бульона; Утвержденный стандарт — — Документ M27-A3 , 3-е изд., Изд.CLSI, (Уэйн, Пенсильвания: CLSI).
Google Scholar
Коуэн, Л. Э. (2008). Эволюция грибковой лекарственной устойчивости: изменение траектории от генотипа к фенотипу. Нат. Rev. Microbiol. 6, 187–198.
Google Scholar
Decottignies, A., Owsianik, G., and Ghislain, M. (1999). Казеинкиназа I-зависимое фосфорилирование и стабильность дрожжевого мультилекарственного транспортера Pdr5p. J. Biol. Chem. 274, 37139–37146. DOI: 10.1074 / jbc.274.52.37139
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Деларзе, Э. (2019). Идентификация и характеристика медиаторов толерантности к флуконазолу у Candida albicans. Диссертация. Лозанна: Университет Лозанны.
Google Scholar
Деларзе Э. и Санглард Д. (2015). Определение границ между устойчивостью к противогрибковым препаратам, толерантностью и концепцией стойкости. Устойчивость к лекарствам. Updat. 23, 12–19. DOI: 10.1016 / j.drup.2015.10.001
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Дункель, Н., Блас, Дж., Роджерс, П. Д., и Моршхойзер, Дж. (2008). Мутации в регуляторе множественной лекарственной устойчивости MRR1 с последующей потерей гетерозиготности являются основной причиной сверхэкспрессии MDR1 в устойчивых к флуконазолу штаммах Candida albicans . Мол. Microbiol. 69, 827–840. DOI: 10.1111 / j.1365-2958.2008.06309.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Европейский комитет по тестированию на чувствительность к противомикробным препаратам, (2017). ОПРЕДЕЛЕННЫЙ ДОКУМЕНТ EUCAST E.DEF 7.3.1 — Метод определения минимальных ингибирующих концентраций противогрибковых агентов для дрожжей при разведении бульона. Швеция: Европейский комитет по тестированию на чувствительность к противомикробным препаратам.
Google Scholar
Фиори, А., и Ван Дейк, П. (2012). Мощный синергетический эффект доксициклина с флуконазолом против Candida albicans опосредован вмешательством в гомеостаз железа. Антимикробный. Агенты Chemother. 56, 3785–3796. DOI: 10.1128 / AAC.06017-11
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Гао, Дж., Ван, Х., Ли, З., Вонг, А. Х.-Х. Х., Ван, Ю.-З. Z. Y., Guo, Y., et al. (2018). Candida albicans приобретает устойчивость к азолам за счет изменения состава сфинголипидов. Нат. Commun. 9, 1–14. DOI: 10.1038 / s41467-018-06944-1
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Гарно, К., Гарсиа-Оливер, Э., Ван, Ю., Мобон, Д., Bailly, S., Despinasse, Q., et al. (2018). Ободочный путь опосредует противогрибковую толерантность у Candida albicans через недавно идентифицированные транскрипционные мишени Rim101, включая Hsp90 и Ipt1. Антимикробный. Агенты Chemother. 62: e01785-17. DOI: 10.1128 / AAC.01785-17
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Герштейн А.С., Розенберг А., Хехт И., Берман Дж. И Дискимейдж Р. (2016). Количественная оценка устойчивости и толерантности к противомикробным препаратам с использованием диско-диффузионных тестов. Микробиология 162, 1059–1068. DOI: 10.1099 / mic.0.000295
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Гоу, Н. А. Р., Бугну, М.-Э., Оддс, Ф. К., Д’Энфер, К., Магнье, А., Мейден, М. К. Дж. И др. (2003). Совместный консенсус для оптимизированного мультилокусного типирования последовательностей Candida albicans . J. Clin. Microbiol. 41, 5265–5266. DOI: 10.1128 / jcm.41.11.5265-5266.2003
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Хоманн, О.Р., Деа, Дж., Нобл, С. М., и Джонсон, А. Д. (2009). Фенотипический профиль регуляторной сети Candida albicans . PLoS Genet. 5: e1000783. DOI: 10.1371 / journal.pgen.1000783
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Хьюз, Т. Р., Мартон, М. Дж., Джонс, А. Р., Робертс, К. Дж., Стоутон, Р., Армор, К. Д. и др. (2000). Функциональное открытие через сборник профилей экспрессии. Ячейка 102, 109–126. DOI: 10.1016 / S0092-8674 (00) 00015-5
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Юнг, С.И., Родригес, Н., Ирризари, Дж., Либоро, К., Богарин, Т., Масиас, М. и др. (2017). Казеинкиназа 2 дрожжей регулирует морфологию, образование биопленок, целостность клеточной стенки и повреждение клеток-хозяев Candida albicans. PLoS One 12: e0187721. DOI: 10.1371 / journal.pone.0187721
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Карабаба, М., Валентино, Э., Пардини, Г., Кост, А. Т., Билле, Дж., И Санглард, Д. (2006). CRZ1, мишень кальциневринового пути в Candida albicans . Мол. Microbiol. 59, 1429–1451. DOI: 10.1111 / j.1365-2958.2005.05037.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Keller, P., Müller, C., Engelhardt, I., Hiller, E., Lemuth, K., Eickhoff, H., et al. (2015). Противогрибковое производное бензимидазола ингибирует биосинтез эргостерина и выявляет новые стерины. Антимикробный. Агенты Chemother. 59, 6296–6307. DOI: 10.1128 / AAC.00640-15
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Луна-Тапиа, А., Кернс, М. Э., Эберле, К. Э., Юрсич, Б. С., и Палмер, Г. Э. (2015). Передача через поздние эндосомы значительно влияет на толерантность Candida albicans к азольным противогрибковым средствам. Антимикробный. Агенты Chemother. 59, 2410–2420. DOI: 10.1128 / AAC.04239-14
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Марр К. А., Рустад Т. Р., Рекс Дж. Х. и Уайт К. (1999). Фенотип конечной точки в тесте на чувствительность к противогрибковым препаратам зависит от pH. Антимикробный. Агенты Chemother. 43, 1383–1386. DOI: 10.1128 / AAC.43.6.1383
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Матушевски С., Хильдебрандт М. Э., Гену А. Х., Йенсен Дж. Д. и Банк К. (2016). Статистическое руководство по разработке экспериментов по глубокому мутационному сканированию. Генетика 204, 77–87. DOI: 10.1534 / genetics.116.1
- Двигатель начинает подрываться.Это означает, что DD не отправляет сигналы в систему управления и не регулирует угол опережения зажигания;
- Сильно ухудшается динамика, авто;
- Ускорение замедляется, двигатель ревет, машина медленно набирает скорость;
- «» Загорается при трогании с места, при катании под гору и при ускорении. Более того, если «Чек» горит только при включении зажигания, а через 6 секунд гаснет, это нормально: «мозги» тестируют все комплектующие авто.
- Код 0325 указывает на обрыв провода питания. Самая частая версия произошедшего — окисление контактов, сама проводка рвется редко. Зачистка клемм в большинстве случаев устраняет проблему.Однако, если после обработки ошибка не исчезла, нужно проверить ремень ГРМ: значит, он проскочил на несколько зубцов. проблема исчезает;
- 0328 в большинстве случаев сигнализирует о неисправностях высоковольтных проводов, но в некоторых случаях может снова сообщить о скачке ремня;
- 0326 и 0327 говорят о слабом сигнале с датчика детонации. Здесь возможны 2 варианта: либо ослабла затяжка ДД, либо, опять же, окислились контакты.
- Выключаем зажигание и залезаем под капот;
- При наличии 2-х контактного датчика детонации гайка закручивается ключом на 13, если есть 1-контактный, берется инструмент 22;
- Мультиметр (или вольтметр) настроен на режим работы максимум 200 МВ;
- Электроды аппарата подключаются к клеммам DD … Официально считается, что индикатора вольтметра (мол, напряжение есть) вполне достаточно. Однако опытные водители так не считают: датчик должен реагировать на детонационные удары. Поэтому проводятся дополнительные исследования: датчик слегка постукивают ручкой отвертки; при ударах показания счетчика должны измениться. Если они остаются постоянными, ДД требует замены.
- частый перегрев мотора;
- при сильном нажатии отчетливо слышен стук на педаль газа;
- бортовой компьютер выдает ошибку, расшифровка которой свидетельствует о неисправности датчика.
- Установите предел на устройстве 200 милливольт.
- Подключите щупы вольтметра к контакту DD.
- Постучать по корпусу датчика без приложения силы, например, отверткой.
- Запишите показания цифрового вольтметра.
- Резонансный (цилиндрической формы).
- Широкополосный (в форме планшета).
- Одноконтактный датчик.
- Двухконтактный.
- двигатель.
- Низкая динамика автомобиля.
- При старте на подъеме загорелась проверка возраста.
- Проверка возраста сработала, когда автомобиль разогнался.
- широкополосный контроллер;
- прибор резонансного типа.
- падение мощности 8- или 16-клапанного мотора;
- время от времени на приборной панели может появляться индикатор Ckeck Engine, особенно при увеличении мощности, в самом начале езды или при движении в гору; К
- признакам неисправности можно отнести и тройной двигатель — при движении на малых оборотах двигатель начинает трястись; Автоматическая диагностика
- также покажет ошибки 0325, 0326, 0327, 0328, которые указывают на неисправность в электрической цепи устройства.
- Для начала нужно понять, где установлен контроллер.В случае с «десяткой» регулятор установлен на кожухе двигателя в моторном отсеке, в частности, его видно между 2 и 3 цилиндрами. Рядом с местом установки также есть щуп для измерения уровня жидкости в двигателе.
- Затем убедитесь, что зажигание выключено и вы можете отсоединить силовую проводку от устройства.
- Ключом на 12 или 13, в этом случае все зависит от типа контроллера, нужно открутить фиксирующую гайку, после чего устройство разбирается и заменяется новым.
- Перед проверкой датчика детонации его необходимо снять с блока питания … Для этого необходимо, нажав на защелку, отсоединиться от клеммной колодки.
- Откручиваем гайку крепления и демонтируем изделие, сняв его со шпильки.
- Для диагностики снятого прибора требуется подать питание на выводы мультивольтметра, выставив минимальный предел измерения.
- Отсоединить минусовой провод питания от аккумуляторной батареи.
- Отсоединяет проводку продукта от блока жгута.
- Снимаем застежки изделия и демонтируем его.
- Для активации датчика детонации нужно постучать по корпусу изделия.
- При исправном устройстве изделие покажет скачкообразные значения разности потенциалов в пределах от 40 до 200 мВ.
- — отвертка,
- — вольтметр.
- Омметр (мультиметр, тестер).
- Набор инструментов для снятия датчика.
- Тряпка или салфетка.
- Набор гаечных ключей, отверток. ватные перчатки, предохранители, новый датчик уровня топлива.
- — инструмент для демонтажа мешающих деталей; — омметр (мультиметр).
- — гаечные ключи;
- — Отвертки;
- — плоскогубцы.
- — ключ 10;
- — Отвертка плоская;
- — мультиметр;
- — мегомметр.
- Ремонт и эксплуатация автомобилей ВАЗ
- — устройства АЗ-1 и МД-1;
- — вольтметр и резистор 2 кОм
- как проверить датчик холла ВАЗ 2109
- — Отвертки;
- — датчик новый;
- — набор ключей гаечных;
- — емкость для охлаждающей жидкости;
- — перчатки хлопковые.
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Morschhäuser, J.(2016). Развитие устойчивости к флуконазолу у Candida albicans — пример микроэволюции грибкового возбудителя. J. Microbiol. 54, 192–201. DOI: 10.1007 / s12275-016-5628-4
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Нобл, С. М., Френч, С., Кон, Л. А., Чен, В., и Джонсон, А. Д. (2010). Систематический скрининг библиотеки гомозиготных делеций Candida albicans разделяет морфогенетическое переключение и патогенность. Нат. Genet. 42, 590–598. DOI: 10,1038 / нг.605
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Onyewu, C., Wormley, F. L., Perfect, J. R., and Heitman, J. (2004). Мишень кальциневрина, Crz1, действует при толерантности к азолам, но не требуется для вирулентности Candida albicans . Заражение. Иммун. 72, 7330–7333. DOI: 10.1128 / IAI.72.12.7330-7333.2004
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Папас, П.Г., Лионакис, М. С., Арендруп, М. К., Остроски-Цайхнер, Л., и Куллберг, Б. Дж. (2018). Инвазивный кандидоз. Нат. Преподобный Дис. Prim. 4, 1–20. DOI: 10.1038 / nrdp.2018.26
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Ройсс, О., Вик, А., Кольтер, Р., и Моршхойзер, Дж. (2004). Флиппер SAT1, оптимизированный инструмент для разрушения генов у Candida albicans . Ген 341, 119–127. DOI: 10.1016 / j.gene.2004.06.021
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Розенберг, А., Эне, И. В., Биби, М., Закин, С., Сегал, Э. С., Зив, Н. и др. (2018). Противогрибковая толерантность — это субпопуляционный эффект, отличный от резистентности, и он связан со стойкой кандидемией. Нат. Commun. 9: 2470. DOI: 10.1038 / s41467-018-04926-x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Санглард Д. (2003). Механизмы устойчивости и толерантности к противогрибковым препаратам у грибковых патогенов. Миколог 17, 74–78. DOI: 10.1017 / S0269915X03002076
CrossRef Полный текст | Google Scholar
Санглард, Д., Ишер, Ф., Маркетти, О., Энтенза, Дж., И Билле, Дж. (2003). Кальциневрин А из Candida albicans : участие в противогрибковой толерантности, клеточном морфогенезе и вирулентности. Мол. Microbiol. 48, 959–976. DOI: 10.1046 / j.1365-2958.2003.03495.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Санглард Д., Ишер Ф., Моно М. и Билле Дж. (1996). Чувствительность мутантов-переносчиков нескольких лекарственных препаратов Candida albicans к различным противогрибковым агентам и другим метаболическим ингибиторам. Антимикробный. Агенты Chemother. 40, 2300–2305. DOI: 10.1128 / AAC.40.10.2300
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Soussi-Boudekou, S. S., Vissers, S., Urrestarazu, A., Jauniaux, J.-C. К., Андре Б. и Андре Б. (1997). Gzf3P, четвертый фактор GATA, участвующий в регулируемой азотом транскрипции у Saccharomyces cerevisiae. Мол. Microbiol. 23, 1157–1168. DOI: 10.1046 / j.1365-2958.1997.3021665.x
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Васичек, Э.М., Берков, Э. Л., Бруно, В. М., Митчелл, А. П., Видерхольд, Н. П., Баркер, К. С. и др. (2014). Нарушение регулятора транскрипции Cas5 приводит к усиленному уничтожению Candida albicans флуконазолом. Антимикробный. Агенты Chemother. 58, 6807–6818. DOI: 10.1128 / AAC.00064-14
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Wang, Y., Cao, Y.-Y., Jia, X.-M., Cao, Y.-B., Gao, P.-H., Fu, X.-P., et al. (2006). Cap1p участвует во множестве путей реакции на окислительный стресс у Candida albicans . Free Radic. Биол. Med. 40, 1201–1209. DOI: 10.1016 / j.freeradbiomed.2005.11.019
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Whaley, S. G., Tsao, S., Weber, S., Zhang, Q., Barker, K. S., Raymond, M., et al. (2016). Ген RTA3, кодирующий предполагаемую липидную транслоказу, влияет на чувствительность Candida albicans к флуконазолу. Антимикробный. Агенты Chemother. 60, 6060–6066. DOI: 10.1128 / AAC.00732-16
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Знаиди, С., ван Вейлик, Л., Эрнандес-Сервантес, А., Сертур, Н., Дессейн, Дж. Л., Винсент, Ф. и др. (2018). Систематическая сверхэкспрессия гена Candida albicans определяет регулятор ранней адаптации к кишечнику млекопитающих. Cell. Microbiol. 20, 1–21. DOI: 10.1111 / cmi.12890
PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar
Датчик детонации ВАЗ 2114 8 клапанов. Датчик детонации ВАЗ
Текущая доступность автосервиса не избавляет автовладельца от необходимости знать признаки неисправности датчика детонации ВАЗ 2114 и других узлов автомобиля.С ней нужно дружить, нужно ее слушать — и тогда вы будете водить машину, а не лежать под ней (или платить за соответствующую работу немалые суммы). Что касается DD, то не стоит думать о нем как о чем-то незначительном, соотнося его функции с его маленькими размерами.
От этого датчика зависит регулярность работы двигателя: он контролирует моменты детонации, часто определяет ее причины, передает информацию бортовым «мозгам», которые корректируют угол опережения зажигания и регулируют воспламенение смеси, поступающей в двигатель.
Позднее зажигание — это одна из иллюстраций того, как система управления и датчик детонации работают вместе. Если не регулировать процесс, отдельные узлы (в частности, шатуны) будут постоянно перегреваться, быстрее изнашиваются, все чаще требуется разносторонний текущий ремонт, а затем капитальный.
Признаки неисправности датчика детонации ВАЗ 2114 также можно определить по показаниям бортового компьютера, и по поведению самого автомобиля.
Тревожные симптомы
Компьютерные подсказки
Бортовая система может сообщить, что не так с DD, если она смогла определить место неисправности. Вам просто нужно запомнить номера ошибок:
Проверка датчика
Если соединения в норме, а «Проверка» горит, придется приступить к диагностике самого датчика. Он расположен довольно неудобно, между 2-м и 3-м цилиндрами (это дает возможность снимать показания со всего блока). Для проверки выполняем следующий алгоритм:
Конструкция каждого автомобиля включает большое количество различных датчиков.Эти устройства необходимы для того, чтобы следить за состоянием основных узлов автомобиля и передавать информацию в электронный блок управления. ЭБУ на основе полученных данных регулирует работу конкретной системы и при необходимости вносит соответствующие изменения.
Датчик детонации на ВАЗ-2114 расположен между цилиндрами двигателя. Такое расположение позволяет максимально эффективно использовать этот простой, но чрезвычайно важный механизм … Каково основное назначение датчика детонации и каковы основные симптомы его неисправности?
.jpg «alt =» (! LANG: ВАЗ 2114 датчик детонации «srcset =» «data-srcset =» https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-1-8..jpg 300 Вт «>!}
Как устроен датчик и что это за
В основе механизма лежит принцип пьезоэлемента. Это означает, что если в цилиндре двигателя возникает вибрация другой природы, сигнал в ЭБУ будет передаваться с помощью электронных импульсов. В свою очередь, последний элемент этой цепочки внесет изменения в работу угла зажигания.
Такой алгоритм действий позволяет защитить узлы и детали от механических повреждений. На «четырнадцатом» в большинстве случаев присутствуют широкополосные механизмы, но чаще всего производитель устанавливал устройства резонансного типа, чаще всего на самых первых экземплярах ВАЗ-2114
data-lazy-type = «image» data- src = «https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-2-7..jpg 687w, https://vazremont.com/ wp-content / uploads / 2017/08 / foto-2-7-300×221..jpg 660w «sizes =» (max-width: 687px) 100vw, 687px «>
Принципиальное отличие устройства резонансного типа в том, что оно способно улавливать только шум с частотой детонации.
Механизм широкополосной связи превосходит своего аналога в том, что он имеет более широкий диапазон возможностей. Такой датчик способен улавливать шум различной частоты, что, несомненно, придает системе автомобиля дополнительную устойчивость.
Приборы работают по разным принципам, поэтому в случае выхода из строя резонансного датчика его нельзя заменить на широкополосный. Аналогичная ситуация и в обратном случае. Если возникнет острая необходимость в замене и изменении принципа работы механизма, то придется приобрести новый блок управления.
Основные симптомы неисправности
Data-lazy-type = «image» data-src = «https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-3-8.jpg» alt = «(! LANG : Неисправности датчика детонации «srcset =» «data-srcset =» https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-3-8..jpg 300w «>!}
Если датчик детонации ВАЗ-2114 вышел из строя, то в большинстве случаев водитель сможет заметить на приборной панели мигающий индикатор Check Engine.При этом неисправность легко заметить по самому поведению автомобиля. Автомобиль плохо разгоняется, не обгоняет, «задыхается» при подъеме в гору. Двигатель нестабилен и имеет явные признаки неисправности. Другие симптомы включают:
Детонационные детонации часто возникают из-за некачественного бензина.Если все вышеперечисленные симптомы присутствуют, лучше всего провести полную компьютерную диагностику автомобиля. Мониторинг позволит определить, на каких этапах работы двигателя наблюдается худшая производительность, а компьютерная диагностика позволит узнать код ошибки датчика детонации.
Диагностика позволяет выявить такие неисправности, как обрыв цепи, превышение уровня сигнала или слишком низкое его значение.
Если диагностика выявила неисправность датчика детонации, необходимо еще своими руками убедиться, что прибор работает некорректно.
Проверка ДД дома
Data-lazy-type = «image» data-src = «https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-4-8.jpg» alt = «(! LANG : Тест датчика детонации «srcset =» «data-srcset =» https://vazremont.com/wp-content/uploads/2017/08/foto-4-8..jpg 300w, https://vazremont.com/ wp-content / uploads / 2017/08 / foto-4-8-660×496.jpg 660w «>!}
Как проверить датчик детонации ВАЗ 2114 в домашних условиях? Определить работоспособность механизма можно с помощью омметра или цифрового вольтметра.Первый позволяет определить сопротивление, а второй — напряжение между контактами. У исправно работающего датчика детонации ВАЗ 2114 сопротивление практически бесконечное. Если этот индикатор полностью отсутствует, то механизм подлежит замене.
Порядок измерения напряжения с помощью вольтметра следующий:
Возможны разные показатели, так как цифра в большинстве случаев зависит от силы удара по телу. Далее, сравнив полученные показатели, можно приступать к замене ДД. Если цифровой вольтметр вообще не отображал никаких цифр, это говорит о том, что ДД полностью вышел из строя и его необходимо срочно заменить.
Как заменить датчик
Data-lazy-type = «image» data-src = «https: // vazremont.com / wp-content / uploads / 2017/08 / foto-5-8.jpg «alt =» (! LANG: замена широкополосного DD «srcset =» «data-srcset =» https://vazremont.com/wp -content / uploads / 2017/08 / foto-5-8..jpg 300w «>!}
Заменить механизм самостоятельно несложно. Он находится между вторым и третьим цилиндрами, нужно открыть капот и обеспечить себе беспрепятственный доступ. Важно, чтобы двигатель в это время был выключен. Как только ДД обнаружен, необходимо отключить вилку, идущую на провода датчика.
Если механизм широкополосный, то вам понадобится ключ на «13» для выполнения всей работы. В случае резонансного устройства вооружитесь ключом на «22». Вам просто нужно открутить гайки со шпилек ключом на «13» или сам пьезоэлектрический датчик ключом «22». Также необходимо очистить контакты наждачной бумагой, удалить всю грязь и окисления. Не пренебрегайте этой процедурой, ведь качество передаваемого сигнала зависит от состояния контактов.
.jpg «alt =» (! LANG: Резонансная замена DD «srcset =» «data-srcset =» https: // vazremont.com / wp-content / uploads / 2017/08 / foto-6-6..jpg 300w «>!}
Окисление и различные виды налета мешают передаче высококачественного сигнала. Как следствие, это приводит к снижению уровня и точности пульса, что наложит свой отпечаток на работу автомобиля. После этого необходимо установить новый механизм и собрать в обратном порядке.
Полезное видео
С другой полезной информацией вы можете посмотреть видео ниже:
17.09.2012
Где находится датчик детонации? Чтобы найти ответ на вопрос, где находится датчик детонации, обратите внимание на рисунок. Он расположен между вторым и третьим цилиндрами на стороне радиатора блока цилиндров.
Датчик детонации двигателя ВАЗ выпускается 2-х типов:
Эти два типа не взаимозаменяемы, поэтому при покупке обязательно выберите правильный датчик.
Также датчики:
Для чего нужен датчик детонации?
Датчик детонации обеспечивает нормальную работу двигателя. Если датчик детонации сломан, это приведет к тройке двигателей, увеличению расхода бензина. Разобрались, для чего нужен датчик детонации, теперь нам нужно выяснить принцип работы.
Принцип действия
Датчик детонации контролирует детонацию двигателя.Чем сильнее удар, тем большее напряжение подает датчик, который, в свою очередь, правильно выравнивает угол опережения зажигания. Другими словами, если в двигателе возникает детонация, датчик срабатывает позже для нормальной работы двигателя.
Признаки неисправности датчика
Если вас беспокоит один из этих моментов, то, возможно, неисправен датчик детонации.Для более точной диагностики проверьте датчик детонации ().
Если ваш бортовой компьютер выдает ошибку о неисправности датчика детонации, то смотрите статью :.
Сегодня каждый автомобиль оснащен различными регуляторами и контроллерами, предназначенными для контроля и управления различными системами … Один из таких автомобилей — детонация. Подробнее о назначении, видах и процессе замены вы можете узнать из этого материала.
Назначение и принцип работы датчика
На 8- и 16-клапанных двигателях ВАЗ 2110 выполняет функцию управления системой зажигания горючей смеси.Из-за позднего зажигания водитель может столкнуться с проблемой увеличения расхода бензина, снижения мощности двигателя и перегрева. Если воспламенение горючей смеси произойдет позже, это может привести к прогоранию клапанов, а также снижению мощности двигателя.
Что касается принципа работы устройства на двигателе внутреннего сгорания на 8 или 16 клапанов, то он заключается в пьезоэффекте. То есть уровень напряжения полностью зависит от физического воздействия на компонент. Если давление выше, импульс напряжения соответственно увеличится.
Разновидности
Если говорить о типах датчика фазы ВАЗ, то в отечественных «десятках» могут применяться регуляторы следующих типов:
В широкополосных версиях преобразователь АЦП воспринимает влияние всех импульсов тока, которые генерирует устройство. Если в системе внезапно возникает резонанс, то измерительный блок может воспринимать колебания только той или иной частоты, актуальной для момента детонации в двигателе.
Следует отметить, что оба типа сами по себе не являются взаимозаменяемыми, поскольку они имеют существенно разные уровни импульсов. Так что если вы столкнулись с проблемой сбоев в работе устройства и, соответственно, с необходимостью замены датчика детонации, то лучше установить тот же регулятор, который уже был установлен (автор видео — Канал Ремонт двигателя! И интересно!).
Общие неисправности
Перед тем, как поменять устройство на 8-ми клапанном моторе, нужно уделить время его диагностике, для этого в первую очередь проверить силовую проводку.Как показывает практика, часто ошибка датчика фазы связана с окислением контактов, если это так, то их нужно будет только почистить. Этот регулятор обычно очень надежен и редко показывает признаки неисправности.
А вот если выходит из строя контроллер на 8 или 16 клапанном моторе, можно либо проверить на компьютере, либо проанализировать признаки неисправности:
Проверка работоспособности
Как проверить датчик детонации своими руками? Для диагностики понадобится мультиметр, который сначала нужно настроить на работу в диапазоне 200 мВ. Чтобы проверить работоспособность регулятора, необходимо подключить щупы прибора к его разъемам. Если в вашей «десятке» есть резонансный контроллер, то в этом случае к корпусу нужно подключить один зонд.
Затем нужно постучать отверткой по корпусу устройства.Как вы помните, показания напряжения, которые рассчитывает тестер, будут полностью зависеть от того, насколько сильным будет воздействие на датчик. То есть чем сильнее удар отверткой, тем больше сигнал напряжения. В том случае, если эта зависимость имеет место, то проверенный регулятор полностью исправен.
После этого мультиметр следует переключить на измерение параметра сопротивления. В конечном итоге диагностика, полученная на исправном устройстве, должна составлять от 1 до 10 МОм. В случае неисправности контроллера параметры сопротивления будут стремиться к бесконечности, а если датчик пробит, то значения будут равны 0.001-0.09 Ом.
Инструкции по замене
В том случае, если машина стала хуже вести себя на дороге, а проверка показала выход из строя контроллера, скорее всего потребуется замена датчика детонации ВАЗ 2110. Для замены понадобится сам прибор и немного времени , в целом процедура замены несложная и может быть завершена за несколько минут.
Выполните следующие действия:
Принцип работы такого устройства, как датчик детонации, одинаков во всех современных автомобилях. Это устройство обладает достаточной надежностью и представляет собой однородный монолит с интегрированной специальной пластиной с пьезоэлементом, который реагирует на воздействие необходимой частоты. Именно это волновое воздействие определенной частоты формируется в блоке цилиндров силовой установки при сгорании топливовоздушной смеси.
Электрический ток с напряжением в несколько милливольт, возникающий в результате этого действия, служит источником измерений, которые поступают на бортовой компьютер транспортного средства.И уже электронная система автомобиля регулирует значение момента зажигания, нейтрализуя этими действиями возможные ударные эффекты, возникающие при детонации топлива.
Несмотря на то, что датчик детонации ВАЗ 2110, цена которого вполне приемлема, имеет небольшие линейные размеры и очень простую конструкцию, его важность трудно переоценить. Ведь потеря коммутационного сигнала с этого изделия приводит к отображению на дисплее бортового компьютера соответствующего кода отказа, который расшифровывается в ВАЗ 2110 как ошибка датчика детонации и приводит к передаче ЭБУ в безопасный режим работы.
Это, в свою очередь, оптимизирует затраты на программное обеспечение электронного блока управления, регулирует угол опережения зажигания до минимального значения, что приводит к увеличению расхода топлива и снижению динамической мощности транспортного средства.
Если датчик детонации выходит из строя, автомобиль некоторое время эксплуатируется без этой настройки. То же касается и случая, когда в датчике детонации обнаружены неисправности, но заменить его нет возможности. В любом случае откладывать ремонт или замену этого устройства не стоит.
Датчик детонации — неисправности при работе
Чтобы устранить неисправность датчика детонации, необходимо знать, где он находится в силовом отсеке автомобиля. Его расположение недалеко от масляного щупа в верхней части блока цилиндров.
Иногда неисправность можно устранить, просто подтянув или ослабив крепеж изделия к мотору; усилие затяжки должно быть в пределах 20 Нм. Контроль силы затяжки этого типа лучше всего производить специальным динамометрическим ключом.В случае, когда регулировка не дала положительного эффекта, необходимо провести проверку датчика детонации ВАЗ 2110 с последующей его заменой на новое изделие.
Поиск неисправности в датчике детонации необходимо проводить на специальном стенде, которым оборудованы СТО или ремонтные предприятия. В домашних условиях отремонтировать датчик детонации ВАЗ 2110 можно, если у вас есть базовые понятия в электротехнике и автолюбитель может использовать тестер или аналогичный прибор со шкалами милливольтметра и мегомметра.
Порядок определения неисправности датчика детонации следующий:
Важно: следует учитывать, что для датчика детонации с одним контактом с черным проводом, который связан с отрицательным контактом, подключение производится к монтажному гнезду крепежного болта, а красный провод положительного направления должен подключаться к сигнальному контакту в разъеме блока.
Замена датчика детонации
Периодичность работ по замене датчика детонации «Десятки»:
При необходимости можно измерить сопротивление внутреннего контура детали. Важно помнить, что это значение для устройств этого типа очень велико и стремится к бесконечности.
При отсутствии хотя бы одного индикатора (сопротивления или напряжения) необходимо купить новое изделие и подготовиться к замене датчика детонации ВАЗ 2110, так как других способов реанимировать его нет.
Как проверить датчик уровня топлива на ВАЗ
При движении водитель контролирует не только ситуацию на дороге, но и состояние автомобиля. Наличие наддува и давления масла, оборотов, оборотов двигателя. Самое главное — количество топлива в баке.Но есть некоторые неудобства, когда показания указателя сильно колеблются.
Уровень топлива в баке контролируется датчиком и индикатором. Причем датчик на всех моделях автомобилей ВАЗ используется поплавкового типа. Разницу можно увидеть только в дизайне. Например, на автомобилях с системой впрыска топлива датчики уровня и топливный насос объединены в один функциональный блок. Реостат используется как активный элемент датчика уровня. Чтобы провести ремонт, нужно знать принцип его работы и подключать основные узлы.Устройство и принцип действия
Чувствительным элементом является реостат (переменный резистор). Выход датчика — два управляющих провода, масса подключается отдельно. Основа датчика уровня — рычаг. С одного конца на нем установлен небольшой пластиковый поплавок, а другой конец соединен с реостатом, точнее с его бегунком, соединенным с массой. Реостат имеет два вывода, один из которых (нижний) ни к чему не подключен, а верхний выдает аналоговый сигнал, который подается на указатель уровня топлива.В системе мониторинга измеряется напряжение. Индикатор представляет собой вольтметр, его полная шкала равна значению питающего напряжения. Говоря простым языком, индикатор выполняет измерение напряжения, а датчик уровня меняет свое значение в зависимости от количества топлива в баке. Колотушка также отвечает за включение контрольной лампы. Когда в баке остается пять литров бензина, загорается лампочка на индикаторе. Это реализуется тем, что второй контакт, выходящий из корпуса датчика, подключен к контрольной лампе.К этой лампе подключается положительный вывод, а к датчику — отрицательный.Ремонт и диагностика датчика уровня
Для начала нужно посмотреть, какие симптомы наблюдаются. Стрелку устройства можно держать на максимуме, на минимуме или даже плавать на шкале. Индикатор либо горит постоянно, либо никогда не загорается, либо даже не мигает. Иногда могут появиться симптомы неисправности лампы и прибора. Но поломка в датчике. Снимите гайки крепления, сняв с трубок два шланга.Снимите датчик и оцените его состояние по внешнему виду. Если пробит поплавок и в нем есть бензин, его лучше заменить. Можно, конечно, с помощью паяльника прогреть место поломки. Но не пытайтесь использовать герметики или эпоксидную смолу. Бензин разъедает эти материалы. Теперь проверьте состояние реостата и бегунка. Возможно, ползунок отошел от поверхности резистора и, следовательно, стрелка будет постоянно в нуле. Если стрелка постоянно на максимуме, значит в реостате короткое замыкание, он потерял сопротивление.В этом случае требуется только его замена. Но если положение стрелки нестабильно, постоянно меняется, значит ползунок не приближается к поверхности. Попробуйте сместить его к краю дорожки, там развитие реостата меньше. Для верности все же возьмите омметр и проверьте сопротивление резистора. Если он сильно отличается от 345 Ом, то лучший ремонт — замена датчика уровня.Совет 2: Как проверить датчик топлива
Неработающий указатель уровня топлива В бензобаке доставляет свою долю дискомфорта при вождении.Двигаться вперед, не зная информации об остатке топлива — занятие не из приятных. Если по дороге есть СТО, туда выезжают автоэлектрика. В противном случае ремонт производится своими руками.
Вам понадобится
Инструкция
1
Меня всегда поражает тот факт, что большинство автомобилистов, не проходящих до самостоятельного ремонта двигателя или агрегатов трансмиссии, испытывают невероятные трудности в процессе работы с электрооборудованием.На самом деле выявление и устранение причин возникновения этих неисправностей не представляет особой сложности.
2
Попробуем сначала разобраться в принципе работы электрооборудования, предназначенного для информирования водителя об объеме текущего остатка бензина в баке. Устройство-индикатор на панели в автомобиле позволяет человеку, сидящему за рулем, визуально проверить наличие доступного топлива во время движения или повернув ключ в замке зажигания, стоя на месте.
3
Устройство напрямую подключено к датчику уровня топлива , который представляет собой не что иное, как обычный потенциометр (переменное сопротивление). И единственная точка, в которую изначально подается напряжение этой цепи, — это вывод индикаторного устройства.
4
Ток проходит через прибор и идет к датчику уровня топлива , а сопротивление, возникающее при его прохождении, зависит от степени отклонения стрелки указателя на щитке, расположенном в салоне автомобиля. под рулем.
5
О неисправности датчика уровня топлива Можно с уверенностью сказать, что после поворота ключа в замке зажигания стрелка прибора отрывается от нижнего края и остается в одном положении без дальнейшего движения по шкале, вне зависимости от объема бензина в баке.
6
Для подтверждения или снятия подозрений датчик уровня топлива вынимается из бензобака и рукой (при включенном зажигании) перемещается поплавковое устройство.Указанные действия помогут точно определить техническое состояние данного элемента электрооборудования.
Совет 3: Как проверить датчик уровня топлива
При уменьшении количества топлива в поплавковом баке датчик Опускание и перемещение контакта переменного резистора, изменение уровня его сопротивления. Напряжение на входе указателя уровня топлива также изменяется и вызывает колебания в игле устройства.
Вам понадобится
Инструкции
1
При извлечении датчика убедитесь, что топливный бак не полностью заполнен. Слейте топливо из бака или откачайте его насосом. Не вдыхайте пары бензина, чтобы не отравиться. Работайте на открытом воздухе или в проветриваемом помещении.
2
Отсоедините все провода от клемм аккумулятора.Поднимитесь к датчику уровня топлива , расположенному на топливном баке. Уложить топливные шланги любым способом (например, изолентой). Отсоединить топливные шланги от датчика уровня топлива , ослабив их хомуты. Отсоединяйте шланги постепенно, вытирая пролитое топливо тряпкой. Отсоединить от датчика электрический разъем .
3
Если датчик установлен на топливном модуле, к нему подходят несколько проводов.Чтобы облегчить сборку, обратите внимание на расположение и цвет отключаемых проводов. Отвинтив кронштейн датчика , приподнимите его и снимите, наклонив в сторону. Топливо, которое ускользнуло от горного хрусталя, удаляется. Отсоедините маркированные топливные шланги.
4
Для проверки датчик подключите омметр к клеммам заземления и переменному резистору датчик . Удерживая датчик в положении, когда поплавок находится внизу (отсутствие топлива ), а контакты контрольной лампы контрольной лампы топлива замкнуты, снимите показание омметра.Сравните показания с указанными в спецификации.
5
Переверните датчик так, чтобы поплавок находился в верхнем положении (полный бак). Измерьте сопротивление между контактами и сравните с требованиями спецификации. Плавно перемещайте датчик из одного положения в другое. Сопротивление на омметре тоже должно меняться плавно, без скачков и провалов. Подключите омметр к клеммам массы , датчику и контрольной лампе топлива .В нормальном положении (пустой бак) сопротивление должно быть почти нулевым. В перевернутом положении (полный бак) сопротивление должно быть бесконечно большим.
6
При сборке датчика установите новое уплотнительное кольцо. Для этого сначала вставьте уплотнительное кольцо в отверстие, а затем сам датчик. После сборки проверьте работу указателя топлива на панели приборов.
Совет 4: Как заменить датчик уровня топлива
На панели приборов большое количество датчиков , которые показывают техническое состояние вашего автомобиля.Один из них — датчик уровня топлива в бензобаке. Однако очень часто он выходит из строя и требует досрочной замены, так как рассчитать пробег по количеству оставшегося в баке бензина очень сложно.
Вам понадобится
Инструкции
1
Установите автомобиль на ровной платформе. Откройте капот и снимите отрицательную клемму аккумулятора, чтобы обесточить бортовую систему питания.Теперь найдите блок предохранителей. Это можно сделать, прочитав инструкцию по эксплуатации вашего автомобиля. На крышке блока вы увидите таблицу, в которой указано, какой из предохранителей отвечает за тот или иной датчик. Найдите предохранитель датчика уровня топлива . вытащите и проверьте. Тонкая нить внутри должна быть целой. Обратите внимание на плинтус. Если на нем есть следы пригоревшего или налета, значит, он сгорел. Замените неисправный предохранитель новым.
2
Слейте бензин из бака.Для этого используют компрессор и обычную трубку. Определите, где удобнее всего попасть в бак — через багажник или через заднее сиденье. Снимаем пластиковую защиту с бензобака. Под ним вы увидите датчик, который ввинчивается в резервуар. Отсоедините штекеры проводов от датчика, предварительно пометив их, чтобы избежать путаницы при повторной сборке. Возьмите отвертку с крестообразным шлицем и ослабьте хомут, которым крепится топливный шланг. После этого аккуратно снимите шланг с топливозаборника.Теперь найдите шесть гаек, которыми корпус датчика крепится к внешней стороне резервуара. Отвинтите их плавными движениями. Осторожно выньте датчик из бака.
3
Тщательно осмотрите датчик. Если он треснул и в нем нет частиц. затем необходимо снять и очистить бак, чтобы эти осколки не попали в топливную систему. Установите новый датчик. Используйте только фирменные датчики, так как датчики сомнительных компаний могут стать причиной пожара! После замены резиновых прокладок затяните все шесть гаек.Соберите в обратном порядке. Подсоедините штекеры к новому датчику. Наденьте отрицательную клемму на аккумулятор. Теперь залейте в бак полную 20-литровую канистру бензина. Заводить машину. Подождите немного и проверьте уровень бензина, который показывает датчик. Он должен соответствовать 20 литрам.
Совет 5: Как проверить датчики автомобиля
Современный инжекторный двигатель управляется набором датчиков. Но не всегда электронная система управления мотором может быть причиной его выхода из строя. Поэтому перед проверкой исправности датчиков убедитесь, что остальные детали и детали силового агрегата исправны.Единственный факт, прямо указывающий на неисправность какого-либо датчика, — это лампа Check Engine на щитке приборов.
Вам понадобится
Инструкции
1
Датчик положения дроссельной заслонки (ВМТ) представляет собой переменный резистор. Чтобы проверить это, измерьте сопротивление между его выводами. Полученные показания сравниваются с заводскими значениями, указанными в инструкции по эксплуатации (на разных машинах разные датчики).Несоответствие в 20% считается нормальным. Также на выход из строя СПДЗ может указывать нестабильность холостого хода, скачки при нарастании оборотов.
2
Датчик детонации без специального оборудования не может быть проверен. Косвенное свидетельство его поломки — усиление детонации при включении двигателя. Для диагностики и замены датчика обращайтесь к специалисту. То же самое и с датчиком времени. Устанавливается только на двигатели с четырьмя клапанами на цилиндр.Проверяется с помощью специальных диагностических приборов.
3
Если двигатель не запускается, это индикатор неисправности датчика положения коленчатого вала. Этот датчик единственный, при выходе из строя мотора мотор не запускается. Для проведения дополнительных испытаний измерьте сопротивление между выводами, предварительно отсоединив разъем. В норме этот показатель должен составлять 550-750 Ом.
4
Также причиной неисправности датчика положения коленчатого вала может стать контроллер, установленный на ведущем шкиве коленчатого вала.Резиновый демпфер, установленный на шестерне контроллера, можно повернуть против шкива. Чтобы проверить это, найдите метки на распредвале и маховике. Кстати, метка на маховике дублирует метку на коленвале. При правильной установке ролика указанные метки совпадают, а между двумя недостающими зубьями между ведущим диском и осью датчика коленчатого вала умещаются 19-20 зубцов ведущего диска.
5
Для проверки датчика массового расхода воздуха отсоедините подходящую для него клеммную колодку.Затем измерьте сопротивление между выводом, указанным в цепи электронного управления двигателем, и массой. Как правило, оно должно составлять 4-6 кОм. Или снимите датчик с мотора. При этом двигатель не будет понижать обороты менее 1500. Также неисправностью датчика расхода воздуха является нестабильная работа силового агрегата, затрудненный запуск, задержки, скачки, провалы при движении, недостаточная мощность и тяга автомобиля.
6
Чтобы проверить исправность датчика скорости, перейдите на нейтральную передачу на холостом ходу автомобиля.При исправном датчике обороты немного увеличатся. На автомобилях ВАЗ-2110/2111/2112 с неисправным датчиком скорости перестает работать спидометр.
7
Чтобы проверить датчик температуры охлаждения, найдите специальную таблицу в ремонтной документации. Изменение температуры в системе охлаждения должно сопровождаться изменением сопротивления этого датчика согласно данным в таблице.
8
Датчик кислорода проверьте измерение сопротивления нагревателя, предварительно отсоединив от него разъем.Результат должен быть от 0,5 до 10 Ом, в зависимости от модели датчика. Найдите точную информацию в инструкциях по ремонту. Также для проверки снимите разъем с датчика, включите зажигание и измерьте опорное напряжение контроллера датчика положения коленчатого вала, которое должно быть 0,45 В.
Совет 6: Как отрегулировать указатель уровня топлива
Сегодня зарубежное в автомобилях датчик уровень топлива регулируется специалистом с помощью компьютера и специального программного обеспечения.Отечественные автомобили и старые иномарки имеют простую регулируемую конструкцию датчика топлива а. Поэтому, если индикатор уровня топлива начнет ложить, просто отрегулируйте его.
Вам понадобится
Инструкции
1
Если топливный бак автомобиля полный, слейте 10 литров бензина. Доберитесь до монтажной розетки бензонасоса на баке.В зависимости от конструкции автомобиля, для этого демонтируют обшивку салона, снимают заднее сиденье, стальной лист защиты бензобака. От помпы отсоединяем разъем с проводами. Закройте бензобак открытой крышкой, чтобы сбросить в нем внутреннее давление.
2
Используйте абсорбирующие материалы, чтобы избежать проливания бензина на пол и обшивку кабины, так как это может повредить покрытие. Осторожно сбросьте давление в топливных шлангах. Для этого одним ключом ослабьте штуцер, а гайку шланга высокого давления держите от другого.Не путайте, иначе пролитого бензина не избежать.
3
Снимите опору бензонасоса и снимите ее с установочного патрубка. В зависимости от способа крепления поверните насос и / или снимите его в направлении вверх. Подождите, пока из фильтра не сольются остатки бензина. Затем подключите разъем проводов к помпе и включите зажигание автомобиля.
4
Наблюдая за показаниями указателя уровня топлива , вывести иглу поплавка в крайние положения до упора.Стрелка индикатора также должна измениться с «0» (пустой бак) на «1» (полный бак). Если в одном из крайних положений иглы стрелка указателя показывает неправильное количество топлива , отрегулируйте датчик , отогнув левый или правый регулировочный язычок так, чтобы спица могла перемещаться влево или вправо от его крайнее положение.
5
После регулировки уровня топлива датчик , но необходимо настроить указатель. Для этого выключите зажигание и разберите панель приборов.Отсоедините необходимые провода и трос спидометра, извлеките комбинацию приборов и разберите ее. Сняв стрелку указателя уровня топлива с его штифта, подсоедините все провода к комбинации приборов, не устанавливая ее на место.
6
Включите зажигание и подождите 5-10 минут. Затем спицы датчика но переводят в одно из крайних положений, соответствующее полному баку. Наведите указатель так, чтобы он указывал точно на отметку «1», и зафиксируйте его.Установите бензонасос в гнездо топливного бака и закрепите крепежными гайками. Подсоедините к нему соединительный провод и топливные шланги высокого давления. Затяните фитинги с необходимым усилием.
7
Залейте бензин в бак до полного уровня и положения указателя указателя. Если после всех процедур регулировки стрелка по-прежнему не показывает правильное количество бензина, снова снимите бензонасос и согните спицу поплавка двумя плоскогубцами. Одни держат иглу у основания, а другие загибают.Повторяя эту процедуру, убедитесь, что стрелка указывает на отметку «1». После этого выключите зажигание и соберите все снятые и разобранные детали.
Совет 7: Как проверить термостат на ВАЗ 2109
Если двигатель автомобиля ВАЗ 2109 стал сильно перегреваться при движении или, наоборот, слишком долго прогреваться до достижения рабочей температуры, в первую очередь необходимо проверить правильность работы термостата.
Термостат в автомобиле ВАЗ 2109 — важнейший элемент системы охлаждения, который с помощью клапана регулирует поток охлаждающей жидкости и обеспечивает прогрев автомобиля, своевременный отвод лишнего тепла от нагретых деталей и защиту двигателя. от перегрева.
Диагностика термостата в домашних условиях
Для домашнего осмотра автомобиля ВАЗ термостат 2109 требует предварительного демонтажа детали с двигателя. Все работы следует проводить на неотапливаемом автомобиле, поскольку есть риск получения сильных ожогов. Перед снятием термостата необходимо демонтировать защиту картера и полностью слить антифриз из системы охлаждения — после завершения диагностических работ его можно использовать повторно. Для слива антифриза необходимо сначала открыть крышку расширительного бачка, а затем подставить заранее подготовленную емкость для слива жидкости под блоком цилиндров.Открыв сливную пробку, слейте антифриз. После этого поместите емкость под сливное отверстие радиатора и, открутив на ней пробку, слейте всю охлаждающую жидкость. После слива антифриза ослабьте хомуты и отсоедините несколько форсунок от корпуса термостата: шланг от расширительного бачка, шланг от радиатора, шланг от патрубка помпы, шланг, соединяющий термостат с двигателем. Осторожно сняв термостат, в первую очередь визуально диагностируется главный клапан компонента: он может заклинивать в открытом положении, что вызывает сбои в работе термостата.Если клапан закрыт, диагностика термостата ВАЗ 2109 проводится медленно нагретой емкостью с водой. Термостат погружают в емкость вместе с термометром и, постепенно нагревая воду, устанавливают время начала работы клапана и уровень температуры в этот момент. Нормальная рабочая температура термостата ВАЗ 2109 — 87 градусов по Цельсию, уровень погрешности не более 2-3 градусов. Правильно работающий термостат будет постепенно открывать клапан по мере повышения температуры жидкости, позволяя части воды проходить через основное сопло.При достижении температуры 108-110 градусов клапан термостата должен полностью открыться и слить нагретую воду в контур радиатора. По мере продолжения охлаждения термостат, вынутый из воды, должен полностью закрывать вентиль.Диагностика термостата прямо на автомобиле
Проверка термостата на автомобиле проводится при холодном двигателе. После запуска мотора необходимо проверить патрубок отвода от радиатора на ощупь. В норме нагрева форсунки не происходит, пока датчик температуры охлаждающей жидкости на панели приборов не покажет прогрев до 80-90 градусов.Если форсунка нагревается раньше этого времени, можно предположить, что клапан не работает должным образом, что приводит к увеличению времени прогрева двигателя и значительному увеличению расхода топлива. Если форсунка остается холодной при высоких температурах охлаждающей жидкости, причиной может быть заклинивание клапана. В этом случае необходимо как можно скорее заменить термостат.Совет 8: Как проверить термостат
Иногда автовладельцы сталкиваются с такой проблемой, что перегревается двигатель (на это указывает показание датчика температуры охлаждающей жидкости на панели приборов) или, наоборот, зимой в салоне автомобиля. в салоне долго холодно, потому что воздух в отопительной плите не нагревается.Такая поломка часто кроется в работе термостата , который отвечает за циркуляцию охлаждающей жидкости в системе охлаждения двигателя.
Чтобы исключить другие варианты неисправностей в системе охлаждения, необходимо самостоятельно проверить термостат. Для этого нужно вспомнить принцип его действия и возложенные на него функции. Работа термостата — обеспечить быстрый прогрев двигателя при минусовых температурах, а также защитить двигатель от перегрева летом.Принцип действия термостата заключается в открытии или закрытии клапана трубопровода с охлаждающей жидкостью. При запуске двигателя клапан термостата должен находиться в закрытом положении, чтобы охлаждающая жидкость циркулировала по небольшому контуру. Если через 2-3 минуты попробовать рукой шланг, соединяющий термостат и радиатор, и будет холодно — значит термостат находится в закрытом положении. Если он окажется теплым, это означает, что клапан неплотно закрыт и двигатель будет долго прогреваться, что влечет за собой повышенный расход топлива, потому что мотор не достигает рабочей температуры.Когда датчик температуры достигает 85-90 градусов, соединение от термостата к радиатору должно быть максимально горячим, так как при достижении этой температуры клапан должен открываться, а охлаждающая жидкость должна проходить через большую охлаждающую жидкость через радиатор. Если этого не происходит, это означает, что термостат заклинило в закрытом положении, охлаждающая жидкость не может циркулировать и остывать, и двигатель может перегреться. Если эти симптомы возникают — неисправен термостат. Чтобы самостоятельно проверить термостат и убедиться, что он сломан, необходимо его снять.Делать это нужно на холодной машине, чтобы не обжечься. Сначала нужно слить охлаждающую жидкость, а затем снять сам термостат. Удалите с него всю пену и грязь и начните тестировать его работоспособность дома. Из приборов потребуется только градусник со шкалой более 100 градусов. Берем старую кастрюлю, заливаем чистой водой, опускаем в нее термостат и ставим кастрюлю на плиту. Проверка следующая: при нагревании до 81-85 градусов клапан должен открываться, а при остывании ниже 80 градусов закрываться.В чистой воде эти моменты будут видны. При обнаружении неисправности термостата его необходимо заменить, так как он не подлежит ремонту.
Совет 9: Как проверить датчик фаз
Датчик фаза в автомобиле находится на крышке масляного насоса. Он дает контроллеру необходимую информацию об угловом положении коленчатого вала и моменте, когда поршни перемещаются по первому и второму цилиндрам. Когда полость проходит через зубцы проходящего диска на шкиве привода генератора мимо датчика, в ней генерируется опорный импульс синхронизации.Чтобы снять и проверить датчик, выполните следующие действия.
Вам понадобится
Инструкция
1
Поставьте машину на яму или эстакаду, так как к фазовому датчику удобнее подъезжать снизу. Выключите зажигание автомобиля. Отсоедините отрицательный провод аккумуляторной батареи от аккумуляторной батареи. Снимаем защиту двигателя снизу, открутив отверткой четыре болта на крышке.Доступ к масляному насосу двигателя открыт. Датчик фазы расположен рядом с масляным фильтром помпы.
2
Отсоедините разъем датчика фазы. Снимите болт 10 гаечным ключом. Снимите датчик с кронштейна крышки масляного насоса. Теперь это нужно проверить.3
Выполните внешний осмотр датчика, определите повреждения корпуса, сердечника, контактной площадки и ее контактов. Очистите контакты спиртово-бензиновой смесью. Очистите сердечник сенсора от металлических частиц и грязи.
4
Измерьте сопротивление датчика с помощью мультиметра. Установите переключатель прибора на 2000 Ом. Подключите контакты устройства к датчику. Сопротивление исправного датчика должно быть в пределах 550-750 Ом (данные для автомобиля ВАЗ-2109). Испытание следует проводить при температуре 22 ± 2 ° C с учетом погрешности измерительного прибора.
5
Проверить индуктивность обмотки датчика между контактами первой и второй контактных площадок измерителем R (L, C E7-8) на частоте 1 кГц.Индуктивность должна быть в пределах 200-420 МГц.
6
Измерить сопротивление изоляции датчика между сердечником и контактами первой и второй контактных площадок с помощью мегомметра F4108 / 1. Величина сопротивления должна быть не менее 20 МОм при напряжении 500 В.
7
Заменить неисправный датчик фазы на новый. Установите его на крышку масляного насоса в обратном порядке. Закрепите защитную крышку двигателя.
примечание
Проверка работоспособности фазового датчика может производиться на холостом ходу двигателя по частоте импульсов на форсунке.Хороший датчик фазы дает частоту 6-7 Гц, неисправный — 12-14 Гц.
Источники:
Совет 10: Как проверить датчик Холла на ВАЗ
Бесконтактная система зажигания автомобиля ВАЗ состоит из датчика Холла , переключателя, катушки и дистрибьютор (траллер). Поэтому при диагностике системы зажигания все ее компоненты по очереди проверяются на работоспособность. Сам датчик Холла можно проверить несколькими способами.
Вам потребуется
Инструкция
1
Проверить работоспособность датчика Холла с помощью приборов АЗ-1 и МД-1 следующим образом. Устройство МД-1 подключаем вместо выключателя, включаем зажигание, но мотор не запускается. Включенное состояние светодиода P сигнализирует о исправности замка и реле зажигания. Горение светодиода К свидетельствует о исправности катушки зажигания.Включите стартер. Если светодиод D мигает, то датчик Холла в порядке. Если светодиод D не мигает, подключите AZ-1 вместо датчика Холла. Устройство заменит вышедший из строя датчик и позволит продолжить движение со скоростью до 90 км / ч. Горящий на нем свет означает, что устройство готово к работе. Отключенный индикатор указывает на неисправность проводки.
2
Проверьте работоспособность датчика Холла с помощью вольтметра и резистора 2 кОм. Для этого снимаем распределитель зажигания и подсоединяем к нему вольтметр и сопротивление как показано на рис.Подключите источник питания с напряжением 10–12 В. Для того, чтобы вольтметр давал правильные показания, его предел измерения должен быть не менее 15 В, а внутреннее сопротивление должно быть не менее 100 кОм. Начинаем медленно крутить вал распределителя. Показания вольтметра должны резко измениться от минимума до максимума. При этом минимальное напряжение не должно быть более 0,4 В, а максимальное напряжение должно отличаться от напряжения питания более чем на 3 В.3
При отсутствии каких-либо устройств и в дорожных условиях проверить работоспособность Датчик Холла примитивным способом с помощью свечи зажигания.Откручиваем одну из свечей и ставим на двигатель. Включите зажигание и проверьте питание на обоих контактах катушки зажигания. Затем снимите центральный трос с крышки трамблера и проденьте его между трубками тормозного цилиндра так, чтобы открытый контакт находился на расстоянии 5-10 мм от корпуса цилиндра. С помощью куска провода соедините центральный контакт переключателя и отрицательную клемму аккумулятора. Если между корпусом тормозного цилиндра и протянутым к нему проводом возникает искра, датчик Холла неисправен.Все проверки проводятся при включенном зажигании.
4
Новый датчик Холла при установке следующим образом. Вставьте его в разъем, включите зажигание и проденьте металлическую пластину в ее прорезь. Если между проводом и пластиной возникает искровой промежуток, датчик неисправен.
Источники:
Совет 11: Как заменить выключатель вентилятора
Вентилятор, позволяющий подавать дополнительный воздушный поток для охлаждения работающего мотора, установлен практически во всех автомобилях.За работу этого вентилятора отвечает специальный датчик , который включается при достижении охлаждающей жидкостью определенной температуры. Этот датчик является расходным материалом и периодически требует замены.
Вам понадобится
Инструкции
1
Загнать машину в гараж и заглушить двигатель.Дайте автомобилю остыть. Лучше всего заменить утро на холодный мотор. Не пытайтесь заменить датчик на просто заглушенный автомобиль! Вы рискуете получить ожог от нагретых деталей. Кроме того, пока двигатель работает, охлаждающая жидкость достигает максимальной температуры.
2
Найдите место датчик включение вентилятор в вашем автомобиле. Для этого внимательно прочтите инструкцию по эксплуатации вашего автомобиля. На нем должно быть точное расположение датчика а, а также инструкция по его замене.
3
Если нет инструкции, то посетите форум владельцев вашей модели автомобиля. Наверняка кто-то уже менял датчик на и делился впечатлениями от этой процедуры.
4
Слейте охлаждающую жидкость из системы. Для этого откручиваем крышку на радиаторе. На некоторых моделях необходимо снять аккумулятор, чтобы получить легкий доступ к дренажному горлу. Не сливайте охлаждающую жидкость на землю! Он очень токсичен, поэтому может нанести непоправимый вред окружающей среде.При сливе старайтесь не вдыхать пары.
5
Отсоедините от датчик но колодки проводов. Не тяните за шнур, иначе вы рискуете его повредить. Берем только туловище.
6
Выкрутите датчик ключом правильного размера. Обычно нужен ключ на «30». Вынуть датчик из разъема. Присмотритесь к его поверхности.
7
Проверить работу датчик a.